胰月示亞硫酸鹽環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(chǔ)

品種名稱：胰月示亞硫酸鹽環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(chǔ)(TSC)音譯名：TryptoseSulfiteCycloserineAgarBase品種編號：028020規(guī)格：100g十粉培養(yǎng)基培養(yǎng)基用途：用于食品和臨床樣本中產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù)。培養(yǎng)基使用原理：胰月示、大豆蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源、維生素和生長因子;葡萄糖和乳糖為可發(fā)酵糖類提供碳源;偏亞硫酸氫鈉和檸檬酸鐵銨用于檢測硫化氫的產(chǎn)生，使菌落中心呈黑色;卵黃含有卵磷脂，可檢測某些含卵磷脂酶的梭菌;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;D-環(huán)絲氨酸抑制非梭菌的細(xì)菌。圖鑒：培養(yǎng)基配方(每升):胰月示15g大豆胨5g酵母膏粉5g偏亞硫酸氫鈉1g檸檬酸鐵銨1g瓊脂15g最終pH7.6±0.2胰月示亞硫酸鹽環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(chǔ)使用方法：稱取本培養(yǎng)基42g，加入蒸餾水或去離子水1000mL,攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，每瓶250mL,121°C高壓滅菌15mL。待TSC培養(yǎng)基冷至50C左右，每100mL培養(yǎng)基基礎(chǔ)加入配套試劑1支（SR0290）（D-環(huán)絲氨酸0.5mg），（制作卵黃平板：加50%卵黃乳液10mL到100mL培養(yǎng)基中），立即搖勻。傾注TSC瓊脂到10個(gè)滅菌平皿中，每皿約5mL，并迅速旋轉(zhuǎn)平皿，使瓊脂鋪平。當(dāng)瓊脂凝固后，將每個(gè)平皿編號標(biāo)記，以無菌操作，吸取稀釋樣品1mL分別加到每個(gè)瓊脂平板表面中心。再向平皿中傾注TSC瓊脂15mL，緩慢地旋轉(zhuǎn)平皿，使其與接種物混合均勻。也可用L型玻璃棒，將0.1mL樣品稀釋液均勻地涂布于含卵黃乳液的TSC瓊脂上，將平板水平靜置5-10min使接種物被吸收。然后用不含卵黃的TSC瓊脂10mL覆蓋平板表層（含卵黃的TSC瓊脂最適于同時(shí)含有其他還原亞硫酸鹽梭狀芽孢桿菌的食品）。瓊脂凝固后，將平板正置于厭氧罐內(nèi)，于36±1C培養(yǎng)。不含卵黃的TSC瓊脂平板培養(yǎng)20h，含卵黃的TSC瓊脂平板培養(yǎng)24h。取出平板用肉眼觀察生長情況和觀察有無黑色菌落。挑選生長有20-200個(gè)黑色菌落的平板，用菌落計(jì)數(shù)器將黑色菌落計(jì)數(shù)并半算每克食品中產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌數(shù)。產(chǎn)氣莢膜梭菌的菌落在含卵黃的培養(yǎng)基上呈黑色。并通常有2-4mm寬的白色沉淀環(huán)（卵磷脂酶作用的結(jié)果）。但有少數(shù)菌株的卵磷脂酶反應(yīng)較弱，或呈陰性。應(yīng)對所有懷疑為產(chǎn)氣莢膜梭菌的黑色菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，并做進(jìn)一步的證實(shí)試驗(yàn)。卵黃乳液：用硬刷刷洗鮮蛋，瀝干，放70%乙醇中浸泡1h。以無菌操作取出蛋黃，加等體積無菌0.85%氯化鈉溶液，混合置4C貯存。培養(yǎng)基質(zhì)量控制：卜列菌株接種于含卵黃的TSC瓊脂平板于36±1C培養(yǎng)24h結(jié)果如下:菌名菌號生長狀況培養(yǎng)特征產(chǎn)氣莢膜梭菌HK9051良好黑色菌落，有白色沉淀環(huán)金黃色葡萄球菌AT