儀器分析實(shí)驗(yàn)報(bào)告范文

儀器分析實(shí)驗(yàn)報(bào)告范文姓名：班級：農(nóng)學(xué)（藥用植物）院系：林學(xué)院植物資源利用系學(xué)號：指導(dǎo)教師：日期：2022年12月26日到2022年12月30日一、實(shí)習(xí)目的口二、實(shí)習(xí)時間口2022年12月26日到2022年12月30日。三、實(shí)習(xí)地點(diǎn)口云南省昆明植物研究所、西南林學(xué)院實(shí)驗(yàn)室?？谒?、實(shí)習(xí)內(nèi)容（一）高效液相色譜儀1、簡介高效液相色譜（HPLC）是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，引入氣相色譜理論，并在技術(shù)上采用了高壓泵、高效固定相和高靈敏度檢測器而實(shí)現(xiàn)分離分析的方法。該方法具有分離速度快、分離效率高、選擇性好、檢測靈敏度高、操作自動化程度高和應(yīng)用范圍廣等特點(diǎn)。2、結(jié)構(gòu)高效液相色譜系統(tǒng)由流動相儲液體瓶、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成，其整體組成類似于氣相色譜，但是針對其流動相為液體的特點(diǎn)作出很多調(diào)整。3、工作原理儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱（固定相）內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運(yùn)動時,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。使用高效液相色譜時，液體待檢測物被注入色譜柱，通過壓力在固定相中移動，由于被測物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同，不同的物質(zhì)順序離開色譜柱，通過檢測器得到不同的峰信號，最后通過分析比對這些信號來判斷待側(cè)物所含有的物質(zhì)。高效液相色譜作為一種重要的分析方法，廣泛的應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別，它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相，適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物。3、應(yīng)用高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機(jī)分析等各種領(lǐng)域。5、使用方法(1)過濾流動相，根據(jù)需要選擇不同的高效液相色譜儀濾膜。(2)對抽濾后的流動相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。(3)打開高效液相色譜儀工作站(包括計(jì)算機(jī)軟件和高效液相色譜儀)，連接好流動相管道，連接檢測系統(tǒng)。(4)進(jìn)入高效液相色譜儀控制界面主菜單，點(diǎn)擊manual,進(jìn)入手動菜單。(5)有一段時間沒用，或者換了新的流動相，需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥，需要在manual菜單下，先點(diǎn)擊purge，再點(diǎn)擊tart，沖洗時速度不要超過10ml/min?？?6)調(diào)節(jié)流量，初次使用新的流動相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，一般不要超過2000。點(diǎn)擊injure，選用合適的流速，點(diǎn)擊on，走基線，觀察基線的情況。(7)設(shè)計(jì)走樣方法。點(diǎn)擊file，選取e-lectuerandmethod，可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法，點(diǎn)擊newmethod。選取需要的配件，包括進(jìn)樣閥，泵，檢測器等，根據(jù)需要而不同。選完后，點(diǎn)擊protocol。一個完整的走樣方法需要包括：a.進(jìn)樣前的穩(wěn)流，一般2-5分鐘；口b.基線歸零；口c.進(jìn)樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換；口d.走樣時間，隨不同的樣品而不同?？?8)進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法，點(diǎn)擊tart。進(jìn)樣，所有的樣品均需過濾。方法走完后，點(diǎn)擊potrun，可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后，再用上面的方法走一段基線，洗掉剩余物。(9)關(guān)機(jī)時，先關(guān)計(jì)算機(jī)，再關(guān)液相色譜。(二)紅外光譜儀1、基本原理利用紅外光譜對物質(zhì)分子進(jìn)行的分析和鑒定。將一束不同波長的紅外射線照射到物質(zhì)的分子上，某些特定波長的紅外射線被吸收，形成這一分子的紅外吸收光譜。每種分子都有由其組成和結(jié)構(gòu)決定的獨(dú)有的紅外吸收光譜，據(jù)此可以對分子進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析和鑒定。紅外吸收光譜是由分子不停地作振動和轉(zhuǎn)動運(yùn)動而產(chǎn)生的，分子振動是指分子中各原子在平衡位置附近作相對運(yùn)動，多原子分子可組成多種振動圖形。當(dāng)分子中各原子以同一頻率、同一相位在平衡位置附近作簡諧振動時，這種振動方式稱簡正振動(例如伸縮振動和變角振動)。分子振動的能量與紅外射線的光量子能量正好對應(yīng)，因此當(dāng)分子的振動狀態(tài)改變時，就可以發(fā)射紅外光譜，也可以因紅外輻射激發(fā)分子而振動而產(chǎn)生紅外吸收光譜。分子的振動和轉(zhuǎn)動的能量不是連續(xù)而是量子化的。但由于在分子的振動躍遷過程中也常常伴隨轉(zhuǎn)動躍遷，使振動光譜呈帶狀。所以分子的紅外光譜屬帶狀光譜。分子越大，紅外譜帶也越多。2、色散型紅外光譜儀主要部件(1)、光源：紅外光譜儀中所用的光源通常是一種惰性固體,用電加熱使之發(fā)射高強(qiáng)度的連續(xù)紅外輻射。常用的是Nernt燈或硅碳棒?？谀芩固?zé)簦涸谑覝叵率欠菍?dǎo)體，使用前需有輔助加熱器預(yù)熱，就可使之導(dǎo)電。特點(diǎn)是發(fā)光強(qiáng)度大，使用壽命長，穩(wěn)定性較好。硅碳棒：由碳化硅燒結(jié)而成，不需預(yù)熱；堅(jiān)固，發(fā)光面積大。特點(diǎn)是：壽命長、便宜、發(fā)光面積大，較適合長波區(qū)，但工作時需要預(yù)熱。(2)、單色器：由色散元件、準(zhǔn)直鏡和狹縫構(gòu)成。光柵是常用的色散元件；傅立葉變換紅外光譜儀不需要分光。(3)、檢測器：現(xiàn)今常用的紅外檢測器是高真空熱電偶、熱釋電檢測器(TGS)和碲鎘汞(MCT)檢測器?？?、傅里葉變換紅外光譜儀傅里葉變換紅外光譜儀不使用色散元件，主要由光源(硅碳棒、高壓汞燈)、邁克爾遜干涉儀、樣品室、檢測器(熱釋電檢測器)、計(jì)算機(jī)和記錄儀等組成。傅里葉變換紅外光譜儀特點(diǎn)：(1)、分析速度快，響應(yīng)速度快。(2)、分辨率高。(3)、光譜范圍寬。(4)、波數(shù)測量準(zhǔn)確度高。4、試樣的處理和制備（1）、氣體樣品在玻璃氣槽內(nèi)進(jìn)行測定，測定時，先將氣槽抽真空，再將試樣注入。氣槽的兩端有鹽窗，一般由NaCl或KBr制成，用金屬槽架將鹽窗固定。（2）、液體1）、液膜法適于沸點(diǎn)較高的試樣，直接滴在兩片吸收池窗板之間，形成液膜。2）、溶液法（液體池法）適于沸點(diǎn)較低，揮發(fā)性較大的試樣，可注入封閉液體池中。有些可用適當(dāng)?shù)娜軇┡涑上∪芤簛頊y定。溶劑：CCl4，CS2常用。（3）、固體1）、研糊法（液體石臘法）：將固體樣品在研缽內(nèi)研碎后，滴入幾滴液體懸浮劑（液體石蠟油），充分研磨成糊狀，再用刮刀將糊狀物均勻地涂在兩鹽片之間，用可拆池進(jìn)行測定。2）、KBr壓片法：將1-2mg試樣與200mg純KBr粉末于研缽中研磨混勻，壓制成透明的薄片后，置于光路中進(jìn)行測定。這是固體樣品應(yīng)用最廣泛的方法。3）、薄膜法主要用于高分子化合物的測定。直接高溫加熱熔融后涂制或壓制成膜，進(jìn)行測定。5、特點(diǎn)（1）只需三個分束器即可覆蓋從紫外到遠(yuǎn)紅外的區(qū)段；（2）專利干涉儀，連續(xù)動態(tài)調(diào)整，穩(wěn)定性極高；(3)可實(shí)現(xiàn)LC/FTIR、TGA/FTIR、GC/FTIR等技術(shù)聯(lián)用；口(4)智能附件即插即用，自動識別，儀器參數(shù)自動調(diào)整；6、分類(1)棱鏡和光柵光譜儀。(2)傅里葉變換紅外光譜儀。優(yōu)點(diǎn)：(1)多通道測量，使信噪比提高。(2)光通量高，提高了儀器的靈敏度。(3)波數(shù)值的精確度可達(dá)0.01厘米-1。(4)增加動鏡移動距離，可使分辨本領(lǐng)提高。(5)工作波段可從可見區(qū)延伸到毫米區(qū)，可以實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)紅外光譜的測定。7、應(yīng)用：應(yīng)用于染織工業(yè)、環(huán)境科學(xué)、生物學(xué)、材料科學(xué)、高分子化學(xué)、催化、煤結(jié)構(gòu)研究、石油工業(yè)、生物醫(yī)學(xué)、生物化學(xué)、藥學(xué)、無機(jī)和配位化學(xué)基礎(chǔ)研究、半導(dǎo)體材料、日用化工等研究領(lǐng)域。紅外光譜分析可用于研究分子的結(jié)構(gòu)和化學(xué)鍵，也可以作為表征和鑒別化學(xué)物種的方法。紅外光譜具有高度特征性，可以采用與標(biāo)準(zhǔn)化合物的紅外光譜對比的方法來做分析鑒定。已有幾種匯集成冊的標(biāo)準(zhǔn)紅外光譜集出版，可將這些圖譜貯存在計(jì)算機(jī)中，用以對比和檢索，進(jìn)行分析鑒定。利用化學(xué)鍵的特征波數(shù)來鑒別化合物的類型，并可用于定量測定。由于分子中鄰近基團(tuán)的相互作用，使同一基團(tuán)在不同分子中的特征波數(shù)有一定變化范圍。此外，在高聚物的構(gòu)型、構(gòu)象、力學(xué)性質(zhì)的研究，以及物理、天文、氣象、遙感、生物、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域，也廣泛應(yīng)用紅外光譜。(三)紫外分光光度計(jì)1、工作原理許多有機(jī)化合物在紫外區(qū)具有特征的吸收光譜，因此可用紫外分光光度法對有機(jī)物質(zhì)進(jìn)行定性鑒定，結(jié)構(gòu)分析及定量測定。紫外分光光度法定量測定的依據(jù)是比耳定律。首先確定化合物的紫外吸收光譜，確定最大吸收波長。在選定的波長下，作出化合物溶液的工作曲線，根據(jù)在相同條件下測得待測液的吸光度值來確定待測液中化合物的含量。紫外吸收光譜是分子價電子能級躍遷。它的波長范圍在100-800nm。其中100-200nm屬遠(yuǎn)紫外光區(qū)，200-400nm屬近紫外光區(qū)，400-800nm屬可見光區(qū)。能夠用于結(jié)構(gòu)鑒定和定量分析。物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量，相應(yīng)地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外可見分光光度法的定量分析基礎(chǔ)是朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律。即物質(zhì)在一定濃度的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比。數(shù)學(xué)表達(dá)式為A二kbc,其中k為摩爾吸光系數(shù)（其物理意義為：當(dāng)吸光物質(zhì)濃度為1摩爾/升，吸收池厚為1厘米，以一定波長原光通過時，所引起的吸光值A(chǔ)），b為吸收介質(zhì)的厚度（厘米），c為吸光物質(zhì)的濃度（摩爾/升）?？谟幸恍┖衝電子的基團(tuán)，它們本身沒有生色功能（不能吸收＞200nm的光），但當(dāng)它們與生色團(tuán)相連時，就會發(fā)生n-n共軛作用，增強(qiáng)生色團(tuán)的生色能力（吸收波長向長波方向移動，且吸收強(qiáng)度增加），這樣的基團(tuán)稱為助色團(tuán)常見的助色基團(tuán)有一OH、一OR、一NH2、一NHR、一某等?？?、分光光度計(jì)的類型（1）、單波長單光束分光光度計(jì)儀器結(jié)構(gòu)簡單，價格便宜，適于在給定波長處測量吸光度或透光度，一般不能作全波段光譜掃描，要求光源和檢測器具有很高的穩(wěn)定性。（2）、單波長雙光束分光光度計(jì)能夠自動記錄，快速全波段掃描?？上庠床环€(wěn)定、檢測器靈敏度變化等因素的影響，特別適合于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)雜，價格較高。（3）、雙波長分光光度計(jì)將不同波長的兩束單色光（1、2）快速交替通過同一吸收池而后到達(dá)檢測器。產(chǎn)生交流信號。不需要需參比池?？煞治龌鞚針悠?，分析準(zhǔn)確度高，可進(jìn)行雙組份同時測定，且可測得導(dǎo)數(shù)光譜。2、使用范圍凡具有芳香環(huán)或共軛雙鍵結(jié)構(gòu)的有機(jī)化合物，根據(jù)在特定吸收波長處所測得的吸收度，可用于藥品的鑒別、純度檢查及含量測定。3、特點(diǎn)可見-紫外分光光度計(jì)。其應(yīng)用波長范圍為200?400nm的紫外光區(qū)、400?850nm的可見光區(qū)。主要由輻射源(光源)、色散系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、吸收池、數(shù)據(jù)處理機(jī)、自動記錄器及顯示器等部件組成。4、應(yīng)用(1)檢定物質(zhì)：根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收，特別是最大吸收波長雖a某和摩爾吸收系數(shù)是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很廣泛的應(yīng)用。在國內(nèi)外的藥典中，已將眾多的藥物紫外吸收光譜的最大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中，為藥物分析提供了很好的手段。(2)與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照：將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì)，則兩者的光譜圖應(yīng)完全一致。如果沒有標(biāo)樣，也可以和現(xiàn)成的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對照進(jìn)行比較。這種方法要求儀器準(zhǔn)確，精密度高，且測定條件要相同。(3)比較最大吸收波長吸收系數(shù)的一致性(4)純度檢驗(yàn)(5)推測化合物的分子結(jié)構(gòu)(6)氫鍵強(qiáng)度的測定：實(shí)驗(yàn)證明，不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強(qiáng)度也不同，這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強(qiáng)度，以確定選擇哪一種溶劑。(7)絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定(8)反應(yīng)動力學(xué)研究（9）在有機(jī)分析中的應(yīng)用（四）自動旋光儀1、基本原理可見光是一種波長為380nm?780nm的電磁波，由于發(fā)光體發(fā)光的統(tǒng)計(jì)性質(zhì)，電磁波的電矢量的振動方向可以取垂直于光傳播方向上的任意方位，通常叫做自然光。利用某些器件（例如偏振器）可以使振動方向固定在垂直于光波傳播方向的某一方位上，形成所謂平面偏振光，平面偏振光通過某種物質(zhì)時，偏振光的振動方向會轉(zhuǎn)過一個角度，這種物質(zhì)叫做旋光物質(zhì)，偏振光所轉(zhuǎn)過的角度叫旋光度。如果平面偏振光通過某種純的旋光物質(zhì)，旋光度的大小與下述三個因素有關(guān)：旋光度與平面偏振光所經(jīng)過的旋光物質(zhì)的長度L有關(guān)，這樣在溫度為士℃時，長度為L,具有比旋度為[a]t入的旋光物質(zhì)對波長為人的平面偏振光的旋光度at入由下式表示：at入=[a]t入L2、旋光儀的基本構(gòu)造1.光源2.毛玻璃3.聚光鏡4.濾色鏡5.起偏鏡6.半波片7.試管8.檢偏鏡9.物、目鏡組10.調(diào)焦手輪11.讀數(shù)放大鏡12.度盤及游標(biāo)13.度盤轉(zhuǎn)動手輪3、應(yīng)用圓盤旋光儀系用來測定含有旋光性的有機(jī)物質(zhì)，如糖溶液、松節(jié)油、樟腦等。通過旋度的測定，可以分析被測物質(zhì)的濃度、含量及純度等。具體用于：檢驗(yàn)含糖量和測定食品調(diào)味呂之淀粉含量醫(yī)院臨床：測定尿中含糖量及蛋白質(zhì)制糖工業(yè)：檢驗(yàn)生產(chǎn)過程中糖溶液濃定藥物香料：測定藥物香料油這旋光度4、使用方法(1)安放儀器(2)接通電源(3)接通電源后，打開電源開關(guān)(見儀器左側(cè))，等待5min使鈉燈發(fā)光穩(wěn)定。(4)打開光源開關(guān)(見儀器左側(cè))，此時鈉燈在直流供電下點(diǎn)燃。(5)準(zhǔn)備試管。(6)按“測量”鍵(見儀器正面)，這時液晶屏應(yīng)有數(shù)字顯示。(7)清零(8)測試：除去空白溶劑，注入待測樣品(裝有試樣的試管，須注意7中所述幾點(diǎn))將試管放入試樣室的試樣槽中，儀器的伺服系統(tǒng)動作，液晶屏顯示所測的旋光度值，此時指示燈“1”(見儀器正面)點(diǎn)亮。(9)復(fù)測：按“復(fù)測”鍵(見儀器正面)一次，指示燈“2”點(diǎn)亮，表示儀器顯示第二次測量結(jié)果，再次按“復(fù)測”鍵，指示燈“3”點(diǎn)亮，表示儀器顯示第三次測量結(jié)果。按“hift/123”鍵(見儀器正面)，可切換顯示各次測量的旋光度值。按“平均”鍵(見儀器正面)，顯示平均值，指示燈“AV”點(diǎn)亮?？?10)溫度校正：測試前或測試后，測定試樣溶液的溫度，按1.2中所述將測得的結(jié)果進(jìn)行溫度校正計(jì)算。(11)測深色樣品：當(dāng)被測樣品透過率接近1％時儀器的示數(shù)重復(fù)性將有所降低，此系正?，F(xiàn)象。(12”5232接口：儀器可以用附給的連線同電腦聯(lián)接(參數(shù)：波特率9600；數(shù)據(jù)位8位；停止位1位；字節(jié)總長18)。(13)糖度測試：儀器開機(jī)后的默認(rèn)狀態(tài)為測量旋光度，指示燈“Z”不點(diǎn)亮。如需測量糖度，可按“糖度/旋光度”鍵(見儀器正面)，指示燈“Z”點(diǎn)亮?？?14)測定濃度或含量(15)測定比旋度純度(16)測定國際糖分度：根據(jù)國際糖度標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定用26克純糖制成100毫升溶液，用200毫米試管，在20℃下用鈉光測定，其旋光度為＋34.626，其糖度為100糖分度。5、特點(diǎn)用白熾燈加濾光片代替鈉光燈，光源的平均使用壽命超過2000小時；儀器開機(jī)不需要預(yù)熱即可使用?？蓽y試樣品的旋光度、比旋度、糖度，可自動重復(fù)測6次，并計(jì)算平均值和均方根。試樣槽采用隔熱設(shè)計(jì)，減少了儀器溫升對樣品測試的影響，有溫度顯示功能，方便用戶?？蓽y深色樣品。(五)氣相色譜儀氣相色譜法是二十世紀(jì)五十年代出現(xiàn)的一項(xiàng)重大科學(xué)技術(shù)成就。這是一種新的分離、分析技術(shù)，它在工業(yè)、農(nóng)業(yè)、國防、建設(shè)、科學(xué)研究中都得到了廣泛應(yīng)用。氣相色譜法是用氣體作為流動相的色譜法。作為流動相的氣體叫載氣，它對樣品和固定相呈惰性，專門用來載送樣品。氣相色譜分離的過程可以簡單地概括為載氣載送樣品經(jīng)過色譜柱中的固定相，使樣品中的各組分分離，然后再分別檢測。氣相色譜可分為氣固色譜和氣液色譜。氣固色譜的“氣”字指流動相是氣體，“固”字指固定相是固體物質(zhì)。例如活性炭、硅膠等。氣液色譜的“氣”字指流動相是氣體，“液”字指固定相是液體。一種對混合氣體中各組分進(jìn)行分析檢測的儀器。樣品由載氣帶入，通過對欲檢測混合物中組分有不同保留性能的色譜柱，使各組分分離，依次導(dǎo)入檢測器，以得到各組分的檢測信號。按照導(dǎo)入檢測器的先后次序，經(jīng)過對比，可以區(qū)別出是什么組分，根據(jù)峰高度或峰面積可以計(jì)算出各組分含量。1、儀器組成氣相色譜儀由載氣源、進(jìn)樣部分、色譜柱、柱溫箱、檢測器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。進(jìn)樣部分、色譜柱和檢測器的溫度均在控制狀態(tài)。2、對儀器的一般要求(1)載氣源氣體氦、氮和氫可用作氣相色譜法的流動相，可根據(jù)供試品的性質(zhì)和檢測器種類選擇載氣，除另有規(guī)定外，常用載氣為氮?dú)狻?2)進(jìn)樣部分進(jìn)樣方式一般可采用溶液直接進(jìn)樣或頂空進(jìn)樣。采用溶液直接進(jìn)樣時，進(jìn)樣口溫度應(yīng)高于柱溫30?50℃。頂空進(jìn)樣適用于固體和液體供試品中揮發(fā)性組分的分離和測定。(3)色譜柱根據(jù)需要選擇。新填充柱和毛細(xì)管柱在使用前需老化以除去殘留溶劑及低分子量的聚合物，色譜柱如長期未用，使用前應(yīng)老化處理，使基線穩(wěn)定。(4)柱溫箱柱溫箱溫度的波動會影響色譜分析結(jié)果的重現(xiàn)性，因此柱溫箱控溫精度應(yīng)在±1℃，且溫度波動小于每小時0.1℃。(5)檢測器適合氣相色譜法的檢測器有火焰離子化檢測器(FID)、熱導(dǎo)檢測器(TCD)、氮磷檢測器(NPD)、火焰光度檢測器(FPD)、電子捕獲檢測器(ECD)、質(zhì)譜檢測器(MS)等。火焰離子化檢測器對碳?xì)浠衔镯憫?yīng)良好，適合檢測大多數(shù)的藥物；氮磷檢測器對含氮、磷元素的化合物靈敏度高；火焰光度檢測器對含磷、硫元素的化合物靈敏度高；電子捕獲檢測器適于含鹵素的化合物；質(zhì)譜檢測器還能給出供試品某個成分相應(yīng)的結(jié)構(gòu)信息，可用于結(jié)構(gòu)確證。除另有規(guī)定外，火焰離子化檢測器一般用氫氣作為燃?xì)猓諝庾鳛橹細(xì)?。在使用火焰離子化檢測器時，檢測器溫度一般應(yīng)高于柱溫，并不得低于150℃，以免水汽凝結(jié)，通常為250?350℃。口(6)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)目前多用計(jì)算機(jī)工作站。＜BR＞藥典規(guī)定，各品種項(xiàng)下規(guī)定的色譜條件，除載氣、檢測器、固定液品種及特殊指定的色譜柱材料不得改變外，其余如色譜柱內(nèi)徑、長度、載體牌號、粒度、固定液涂布濃度、載氣流速、柱溫、進(jìn)樣量、檢測器的靈敏度等，均可適當(dāng)改變，以適應(yīng)具體品種并符合系統(tǒng)適用性試驗(yàn)的要求。一般色譜圖約于30min內(nèi)記錄完畢。3、特點(diǎn)(1)大屏幕液晶中文顯示，同時顯示各路控溫參數(shù)及載氣流量或檢測器參數(shù)，各種數(shù)據(jù)一目了然。(2)數(shù)字流量顯示，采用電子質(zhì)量流量計(jì)，從屏幕精確顯示載氣流量。(3)TCD斷氣自動保護(hù)，儀器斷氣或漏氣時，微機(jī)系統(tǒng)自動斷開橋電流，保護(hù)鎢絲不被損壞。(4)先進(jìn)的氣路流程，儀器采用一次進(jìn)樣，三檢測器技術(shù)，分離效果更好，靈敏度更高。(5)自動功能：開機(jī)后，儀器自動檢測運(yùn)行狀態(tài)，如有問題自動顯示故障部位及故障類型，并對儀器自我保護(hù)。(6)專用色譜工作站和色譜數(shù)據(jù)處理器(7)色譜柱(進(jìn)口擔(dān)體)和三個凈化器4、操作規(guī)程(1)開機(jī)前準(zhǔn)備：根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，選擇合適的色譜柱；氣路連接應(yīng)正確無誤，并打開載氣檢漏；信號線接所對應(yīng)的信號輸入端口。(2)開機(jī)：打開所需載氣氣源開關(guān)，穩(wěn)壓閥調(diào)至0.3?0.5Mpa,看柱前壓力表有壓力顯示，方可開主機(jī)電源，調(diào)節(jié)氣體流量至實(shí)驗(yàn)要求；在主機(jī)控制面板上設(shè)定檢測器溫度、汽化室溫度、柱箱溫度，按《輸入》鍵，升溫；打開氫氣發(fā)生器和純凈空氣泵的閥門，氫氣壓力調(diào)至0.3?0.4Mpa，空氣壓力調(diào)至0.3?0.5Mpa，在主機(jī)氣體流量控制面板上調(diào)節(jié)氣體流量至實(shí)驗(yàn)要求；當(dāng)檢測器溫度大于100℃時，按《點(diǎn)火》按鈕點(diǎn)火，并檢查點(diǎn)火是否成功，點(diǎn)火成功后，待基線走穩(wěn)，即可進(jìn)樣；(3)關(guān)機(jī)：關(guān)閉FID的氫氣和空氣氣源，將柱溫降至50℃以下，關(guān)閉主機(jī)電源，關(guān)閉載氣氣源。關(guān)閉氣源時應(yīng)先關(guān)閉鋼瓶總壓力閥，待壓力指針回零后，關(guān)閉穩(wěn)壓表開關(guān)，方可離開。(4)注意事項(xiàng)：氣體鋼瓶總壓力表不得低于2Mpa；必須嚴(yán)格檢漏；嚴(yán)禁無載氣氣壓時打開電源。5、氣相色譜法的優(yōu)點(diǎn)和局限性(1)、優(yōu)點(diǎn)1)分離效能高。對物理化學(xué)性能很接近的復(fù)雜混合物質(zhì)都能很好地分離，進(jìn)行定性、定量檢測。有時在一次分析時可同時解決幾十甚至上百個組份的分離測定。2)靈敏度高。能檢測出ppm級甚至ppb級的雜質(zhì)含量。口3)分析速度快。一般在幾分鐘或幾十分鐘內(nèi)可以完成一個樣品的測定。4)應(yīng)用范圍廣。氣相色譜法可以分析氣體、易揮發(fā)的液體和固體樣品。就有機(jī)物分析而言，應(yīng)用范圍最為廣泛，可以分析約20%的有機(jī)物，此外，某些無機(jī)物通過轉(zhuǎn)化也可以進(jìn)行分析。(2)、局限性1)在缺乏標(biāo)準(zhǔn)樣品的情況下定性比較困難。2)沸點(diǎn)太高、相對分子質(zhì)量太大或熱不穩(wěn)定的物質(zhì)都難以用氣相色譜法進(jìn)行測定。(六)氣質(zhì)聯(lián)用儀氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)技術(shù)的簡稱。是將氣相色譜儀器(GC)與質(zhì)譜儀(MS)通過適當(dāng)接口(interface)相結(jié)合，借助計(jì)算機(jī)技術(shù)，進(jìn)行聯(lián)用分析的技術(shù)。GC-MS是最成熟的兩譜聯(lián)用技術(shù)?？?、分類氣質(zhì)聯(lián)用儀的質(zhì)量分析器主要有四極桿、離子阱、磁質(zhì)譜、和飛行時間四種。2、應(yīng)用廣泛應(yīng)用于復(fù)雜組分的分離與鑒定中，其分辨率和靈敏度高，是生物樣品中藥物與代謝物定性定量的有效工具。質(zhì)譜儀的基本部件有：離子源、濾質(zhì)器、檢測器三部分組成，它們被安放在真空總管道內(nèi)。接口：由GC出來的樣品通過接口進(jìn)入到質(zhì)譜儀，接口是氣質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)的關(guān)鍵。（七）超導(dǎo)核磁共振儀根據(jù)量子力學(xué)原理，原子核與電子一樣，也具有自旋角動量，由于原子核攜帶電荷，當(dāng)原子核自旋時，會由自旋產(chǎn)生一個磁矩，這一磁矩的方向與原子核的自旋方向相同，大小與原子核的自旋角動量成正比。將原子核置于外加磁場中，若原子核磁矩與外加磁場方向不同，則原子核磁矩會繞外磁場方向旋轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)過程中轉(zhuǎn)動軸的擺動，稱為進(jìn)動。進(jìn)動具有能量也具有一定的頻率。1、核磁共振波譜的基本原理核磁共振是在外磁場作用下，電磁波與原子核相互作用的一種物理現(xiàn)象。在外磁場作用下，核磁矩不為零的原子核的自旋能級發(fā)生分裂，從而核在不同能級間躍遷可吸收一定頻率的電磁波發(fā)生核磁共振。由于核自旋能級分裂的大小與分子的化學(xué)結(jié)構(gòu)有關(guān)，即產(chǎn)生核磁共振時，吸收電磁波的頻率與分子的化學(xué)結(jié)構(gòu)有關(guān)，所以，通過分析核磁共振時所給出的信息，可推測分子的化學(xué)結(jié)構(gòu)。核磁共振條件：(1)、核有自旋(磁性核)(2)、外磁場，能級裂分(3)、照射頻率與外磁場的比值2、核磁共振波譜儀的基本組成(1)、磁鐵磁鐵產(chǎn)生一個外加磁場，可分為永久磁鐵、電磁鐵和超導(dǎo)磁鐵。永久磁鐵場強(qiáng)穩(wěn)定，耗電少，但溫度變化敏感，需長時間才達(dá)到穩(wěn)定。電磁鐵對溫度不敏感，能很快達(dá)到穩(wěn)定，但功耗大。超導(dǎo)磁鐵有很高的磁感應(yīng)強(qiáng)度。(2)、射頻振蕩器射頻振蕩器用于產(chǎn)生射頻輻射，此射頻的頻率與外磁場磁感應(yīng)強(qiáng)度相匹配。(3)、射頻信號接受器(檢測器)當(dāng)質(zhì)子的進(jìn)動頻率與輻射頻率相匹配時，發(fā)生能級躍遷，吸收能量，在感應(yīng)線圈中產(chǎn)生毫伏級信號。(4)、樣品管：外徑5mm的玻璃管，測量過程中旋轉(zhuǎn)，磁場作用均勻。(5)、樣品的制備試樣濃度：5-10%；需要純樣品15-30mg；口傅立葉變換核磁共振波譜儀需要純樣品1mg;口標(biāo)樣濃度(四甲基硅烷TMS)：1%;□氘代溶劑：氯仿，丙酮、苯、二甲基亞砜的氘代物3、主要用途是新型的全數(shù)字化儀器，其優(yōu)點(diǎn)是：(1)大大減少噪音，提高S/N;(2)抗外界干擾；(3)增加測試的動態(tài)范圍；(4)由于采用了數(shù)字鎖，所以從根本上改善了譜儀的穩(wěn)定性。4、應(yīng)用該譜儀的應(yīng)用面很廣，固體和液體都可做。(八)質(zhì)譜儀分離和檢測不同同位素的儀器。帶電粒子在電磁場中能夠偏轉(zhuǎn)的原理，按物質(zhì)原子、分子或分子碎片的質(zhì)量差異進(jìn)行分離和檢測物質(zhì)組成的一類儀器。質(zhì)譜儀以離子源、質(zhì)量分析器和離子檢測器為核心。1、分類按工作原理分為靜態(tài)儀器和動態(tài)儀器。2、質(zhì)譜分析基本原理質(zhì)譜分析法是通過對待測離子的質(zhì)量和強(qiáng)度的測定來進(jìn)行定量、定性分析及研究分子結(jié)構(gòu)的分析方法。離子的離子流強(qiáng)度或豐度相對于離子質(zhì)荷比變化的函數(shù)關(guān)系稱為質(zhì)譜，這一函數(shù)關(guān)系可用圖表示，進(jìn)行這一分析的儀器稱為質(zhì)譜儀，可以記錄離子相對強(qiáng)度相對于m/z的變化。在結(jié)構(gòu)分析中，質(zhì)譜法不僅給出了待測物的相對分子質(zhì)量，還能給出其碎片離子的質(zhì)量信息以及分子式。無論是有機(jī)物還是無機(jī)物，也無論是正電荷還是負(fù)電荷均可形成質(zhì)譜。分析對象為有機(jī)物的質(zhì)譜分析法稱為有機(jī)質(zhì)譜法，分析對象為無機(jī)物的質(zhì)譜分析法稱為無機(jī)質(zhì)譜法。3、質(zhì)譜儀基本構(gòu)造質(zhì)譜儀通常由四部分構(gòu)成，即進(jìn)樣系統(tǒng)、離子源、質(zhì)量分析器和檢測器。(1)、進(jìn)樣系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)是把待分析樣品導(dǎo)入離子源的裝置。質(zhì)譜儀的進(jìn)樣系統(tǒng)主要有直接進(jìn)樣、氣相色譜和液相色譜進(jìn)樣、加熱進(jìn)樣等。(2)、離子源離子源是質(zhì)譜儀的心臟，離子源的作用是提供能量，使被分析樣品原子或分子離子化為電荷粒子(正離子或負(fù)離子)的裝置，同時還兼有聚焦和給離子提供初始動能的作用。1)電子轟擊源主要應(yīng)用于氣體樣品。使用高能電子束從試樣分子中撞出一個電子而產(chǎn)生正離子，即M+eM+.+2e,由于電子能量超過電離電位，過剩的能量使分子離子進(jìn)一步裂解而產(chǎn)生各種碎片離子。2)化學(xué)電離是將反應(yīng)氣引入離子源，最常用的反應(yīng)氣是甲烷、異丁烷和氨氣。首先，反應(yīng)氣被電子轟擊電離形成反應(yīng)氣分子離子R?+,它進(jìn)一步與未被電離的反應(yīng)氣體分子反應(yīng)生成活潑的離子，這些離子再與樣品分子M反應(yīng)，使樣品的分子電離，而樣品分子與電子不直接作用。3)電噴霧電離是一種很軟的電離方法，通常不產(chǎn)生碎片離子或很少產(chǎn)生碎片離子。主要用于液體樣品電離，適合極性、熱