維生素類藥物的分析

AnalysisofVitamines第十章

維生素類

藥物的分析藥物分析教研室概述一.定義：

維生素是維持人體正常代謝功能所必須的一類微量的生物活性物質(zhì)，主要用于機(jī)體的能量轉(zhuǎn)移和代謝調(diào)節(jié)。二.特點(diǎn)：1.維生素均以維生素原的形式存在于食物中。2.機(jī)體自身不能合成或合成量不足，必須通過食物獲得。3.維生素的作用是參與機(jī)體代謝調(diào)節(jié)。4.人體維生素的需要量很小，但一旦缺乏就會引發(fā)相應(yīng)的維生素缺乏癥。三、分類VA的分析VC的分析VE的分析VB1的分析VD的分析VitaminsContents第一節(jié)VitA的分析概述維生素A包括有維生素A1(視黃醇)、去氫維生素A（維生素A2），和去水維生素A（維生素A3）。通常所說的維生素A指的是維生素A1912345678Retinol(VitA醇)VA

醋酸酯VA

棕櫚酸酯一、結(jié)構(gòu)分析與性質(zhì)

USPBPCh.pVA及醋酸酯、棕櫚酸酯混合物的食用油溶液維生素A醋酸酯、丙酸酯和棕櫚酸酯混合物的植物油溶液維生素A醋酸酯。收載了維生素A膠丸、AD膠丸和AD滴劑一、主要性質(zhì)紫外吸收不穩(wěn)定性存在多種立體異構(gòu)體氧化反應(yīng)酸性條件下反應(yīng)二、鑒別試驗VitASbCl3CHCl3(無水、無醇)藍(lán)色紫紅色1.三氯化銻反應(yīng)(Carr-Price反應(yīng))注意：反應(yīng)需在無水無醇條件下進(jìn)行。水可使SbCl3水解成SbOCl。乙醇可與正碳離子作用使正電荷消失。溶劑：飽和無水三氯化銻的無醇氯仿溶液。2.紫外分光光度法VitAVitA3（1）維生素A：5個共軛雙鍵，其無水乙醇液在326nm波長處有最大吸收。（2）去水維生素A(A3)：6個共軛雙鍵，其最大吸收波長向紅移，在340nm-390nm波長間出現(xiàn)3個最大吸收峰。（348、367、389）三、含量測定一、②維生素A的異構(gòu)體名稱順反異構(gòu)λmax（nm）相對效價新維生素Aa2-順32875%新維生素Ab4-順31924%新維生素Ac2,4-二順31115%異維生素Aa6-順32321%異維生素Ab2,6-二順32424%③氧化產(chǎn)物：環(huán)氧化物、醛、酸④中間體、副產(chǎn)物⑤裂解產(chǎn)物⑥原料為鯨魚時，提取可能含有鯨醇。鯨醇為維生素A的二聚體，無生物活性。⑦不相關(guān)物質(zhì)：抗氧劑、稀釋用油等。AnmVitAsampleimpurities2.三點(diǎn)校正法的基本原理雜質(zhì)的吸收在310~340nm波長范圍內(nèi)呈一條直線，且隨波長的增大吸收度減??；物質(zhì)對光的吸收具有加和性。3.波長的選擇第一法——等波長差法λ2λ1λ3nmAVitA樣品維生素A純品雜質(zhì)328340316A1A2A3Aλ1Aλ2Aλ3X1X2X3A328(校正)=3.52(2A328-A316-A340)測定VitA醋酸酯圖1：維生素A等波長差校正法圖解（1）方法（適用于維生素A醋酸酯）取樣品適量，精密稱定，加環(huán)己烷制成每ml含有9-15個單位的溶液，測定吸收峰的波長，看最大吸收波長是否在326-329nm之間，如不在這個范圍，就選用第二法。如果吸收峰的波長在326-329nm之間，就分別在規(guī)定的波長下進(jìn)行測定，計算各波長下的吸光度與波長328nm處的吸光度的比值，將這個比值與規(guī)定值進(jìn)行比較。（2）數(shù)據(jù)處理波長（nm）300316328340360吸光度A1A2A3A4A5計算比值A(chǔ)1/A3A2/A31.000A4/A3A5/A3規(guī)定值0.5550.9071.0000.8110.299每個差值【-0.02，+0.02】，就不需要計算A328的校正值，直接用A328進(jìn)行下一步計算。每個差值<-0.02，>+0.02，需要計算A328的校正值。數(shù)據(jù)處理第二法——等吸收比法（6/7A法、皂化法）Aλ2λ1λ3nm310325334A1A2A3Aλ2Aλ1Aλ3FLDMEVitA醇維生素A樣品維生素A純品雜質(zhì)第二法—等吸收比法（6/7A法、皂化法）VitA醇測定維生素A醇幾何校正法圖解Aλ2λ1λ3nm310325334A1A2A3Aλ2Aλ1Aλ3FLDME維生素A樣品維生素A純品雜質(zhì)(二)三氯化銻比色法λmax618nm-620nm1.原理：2.方法：取維生素A對照品，制成系列濃度的三氯甲烷溶液，加入一定量的三氯化銻氯仿溶液，在5-10s內(nèi)，于620nm波長處測定吸光度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。按同法測定供試品溶液的吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算含量。缺點(diǎn)呈色不穩(wěn)定（5~10s內(nèi)）水分有干擾溫度影響大（+1℃）三氯化銻有腐蝕性優(yōu)點(diǎn)：簡單、快遞3.討論第二節(jié)維生素E的分析概述

USPBPCh.p右旋或外消旋ɑ-生育酚及其醋酸酯和琥珀酸酯外消旋ɑ-生育酚醋酸酯和ɑ-生育酚合成：消旋體天然：右旋ɑ-生育酚醋酸酯一、結(jié)構(gòu)分析與性質(zhì)1.結(jié)構(gòu)2.性質(zhì)水解性氧化性紫外吸收特性溶解性二、鑒別試驗1.硝酸反應(yīng)生育酚75℃【O】（橙紅色）生育紅2.三氯化鐵反應(yīng)方法：取本品約10mg,加乙醇制成氫氧化鉀試液2ml，煮沸5min，放冷，加水4ml與乙醚10ml振搖，靜置使分層，取乙醚液2ml,加2,2‘聯(lián)吡啶的乙醇溶液數(shù)滴和三氯化鐵的乙醇液數(shù)滴，應(yīng)顯血紅色。3.紫外分光光度法4.薄層色譜法薄層板：硅膠G板展開劑：環(huán)己烷-乙醚（4:1）顯色劑：硫酸（105℃）VitERf=0.7ɑ-生育酚和ɑ-生育醌的Rf值分別為0.5和0.9。三、雜質(zhì)檢查1.生育酚（1）原理（2）方法：取本品0.1g，加無水乙醇5ml溶解后，加二苯胺試液1滴，用硫酸鈰滴定液（0.01mol/l）滴定，消耗硫酸鈰滴定液（0.01mol/l）不得過1.0ml。第三節(jié)維生素C概述

維生素C又叫L-抗壞血酸，是一種水溶性維生素，能夠治療壞血病并且具有酸性，所以稱作抗壞血酸。維生素C是最不穩(wěn)定的一種維生素，由于它容易被氧化。微量的銅、鐵離子可加快破壞的速度。

植物及絕大多數(shù)動物均可在自身體內(nèi)合成維生素C，可是人因缺乏將L-古洛酸轉(zhuǎn)變?yōu)榫S生素C的酶類，不能合成維生素C。維生素C在人體內(nèi)的半衰期較長（大約16天），所以食用不含維生素C的食物3~4個月后才會出現(xiàn)壞血病。維生素C的主要功能是幫助人體完成氧化還原反應(yīng)，提高人體滅菌能力和解毒能力。一、結(jié)構(gòu)分析與性質(zhì)1.結(jié)構(gòu)2.性質(zhì)（1）旋光性：2個手型C原子有4個光學(xué)異構(gòu)體。比旋：+20.5-21.5度（2）水解性（3）酸性（4）還原性L-抗壞血酸(有生物活性)L-二酮古洛糖酸L-去氫抗壞血酸無生物活性（有生物活性）（5）糖類的性質(zhì)（6）紫外吸收特性二、鑒別試驗1.與AgNO3反應(yīng)2.與2,6-二氯靛酚反應(yīng)3.糖類的反應(yīng)4.紫外分光光度法維生素C在0.01mol/l鹽酸溶液中，在243nm波長處有唯一的最大吸收，利用此特征進(jìn)行鑒別。（BP）三、雜質(zhì)檢查鐵、銅離子的檢查由于微量鐵鹽和銅鹽的存在會加速維生素C的氧化和分解，所以在中國藥典質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中設(shè)立了鐵和銅的檢查項。利用的是原子吸收分光光度法。四、含量測定1.碘量法（1）原理：維生素C在醋酸酸性條件下，可被碘定量氧化。（2）實(shí)驗方法：取本品約0.2g，精密稱定，加新沸過的冷水100ml與稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液顯藍(lán)色，在30秒內(nèi)不褪。每1ml碘滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于8.806mg的維生素C。（3）討論新沸過的冷水：減少水中溶解的氧對測定的影響。稀醋酸：酸性介質(zhì)中維生素C受空氣中氧的氧化速度減慢。中