性病的實驗室檢驗與質(zhì)量控制

性病的實驗室檢驗與質(zhì)量控制人民醫(yī)院檢驗科一、什么是性病性病——是一組傳染性疾病，通過性接觸而傳播的疾病。我國重點防治的八種性病梅毒、梅毒螺旋體淋病、淋球菌軟下疳、杜克雷嗜血桿菌性病性淋巴肉芽腫、衣原體生殖道沙眼衣原體感染、沙眼衣原體尖銳濕疣、乳頭瘤病毒生殖器皰疹、生殖器皰疹病毒艾滋病、HIV病毒性病實驗室在性病疫情監(jiān)測中的任務(wù)疾病準(zhǔn)確診斷*梅毒*淋病*沙眼衣原體感染淋球菌耐藥監(jiān)測實驗室檢測專項性病患病率調(diào)查實驗室質(zhì)量控制性病實驗室在性病防治中的作用臨床服務(wù)疫情監(jiān)測實驗室診斷效果評價科學(xué)研究主要常見性病實驗室檢測介紹梅毒淋病生殖道沙眼衣原體常用梅毒檢測方法病原學(xué)檢測血清學(xué)檢測病原學(xué)檢測原理：查找梅毒螺旋體方法：暗視野顯微鏡檢查、鍍銀染色法、直接熒光法、PCR暗視野顯微鏡檢查制片：標(biāo)本置于載玻片上，加一滴生理鹽水，蓋上蓋玻片，在暗視野顯微鏡上油鏡觀察。觀察：由于光線從聚光器的邊緣斜射到涂片上的梅毒螺旋體而發(fā)出光亮。梅毒螺旋體特征螺旋整齊折光性強(qiáng)運動緩慢而有規(guī)律，有三種運動方式：1.圍繞其長軸旋轉(zhuǎn)運動2.伸縮其螺旋間距離移動3.彎曲扭動如蛇形病原學(xué)檢查的臨床意義可以確診為梅毒及時治療、預(yù)后、盡早切斷傳染源注意：未找到梅毒螺旋體，不能排除患梅毒的可能性。梅毒血清學(xué)檢測一、非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗二、梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗1、原理：檢測人體感染梅毒螺旋體產(chǎn)生的抗類脂抗原的抗體2、方法：性病研究實驗室試驗（VDRL）不加熱血清反應(yīng)素試驗（USR）快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗（RPR）甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）RPR定性試驗?在紙卡圓圈中加入50μL待檢血清，涂滿整個圓圈?使用滴管和專用針頭（60滴/mL），加1滴抗原懸液?旋轉(zhuǎn)100rpm8min?立即判斷結(jié)果RPR

定量試驗待檢血清用等滲鹽水在紙卡圓圈中作6個稀釋度：原血清，1:2，1:4，1:8，1:16，1:32按定性試驗步驟操作，以出現(xiàn)陽性反應(yīng)的最高稀釋度報告結(jié)果

RPR定量試驗

中等至大的凝塊為陽性（圈4和7）有明確但很小的凝塊為弱陽性（圈2和3）顆粒均勻分布（圈1,5,8-10）或稍粗糙（圈6）為陰性非梅毒螺旋體抗原血清試驗的優(yōu)缺點：優(yōu)點：*敏感性特異性好

*不需要昂貴設(shè)備，簡單易行*適用于大量人群的血清篩查*有效治療后血清滴度可下降并陰轉(zhuǎn)，故可作療效觀察、判愈、復(fù)發(fā)。*20分鐘可獲得實驗結(jié)果。*試劑與方法均已標(biāo)化，各實驗室間結(jié)果可比較。*試驗可被內(nèi)部質(zhì)控和外部質(zhì)控監(jiān)控進(jìn)行。缺點：*敏感性和特異性低于螺旋體抗原試驗，BFP反應(yīng)和前帶現(xiàn)象非梅毒抗原血清試驗的敏感性和特異性

敏感性特異性試驗一期二期潛伏晚期VDRL78%(74-87)100%96%(88-100)71%(34-94)98%(96-99)USR80%(72-88)100%95%(88-100)73%98%(93-99)RPR86%(77-99)100%98%(95-100)99%TRUST85%(77-86)100%98%(95-100)99%(98-99)未經(jīng)治療的各期梅毒的敏感性非梅毒螺旋體抗原血清試驗臨床意義簡單、快速硬下疳出現(xiàn)1周-2周可呈陽性適用于大量人群的篩查療效觀察、復(fù)發(fā)或再感染判斷非梅毒螺旋體抗原血清試驗臨床意義早期梅毒（一期、二期）經(jīng)足量規(guī)則抗梅毒治療后3個月，VDRL試驗抗體滴度下降2個稀釋度，6個月下降4個稀釋度。一期梅毒1年后轉(zhuǎn)為陰性二期梅毒2年后轉(zhuǎn)為陰性。晚期梅毒治療后血清滴度下降緩慢，2年后約50%病人血清反應(yīng)仍為陽性。生物學(xué)假陽性滴度常<1:8分為急性（6個月內(nèi)消失）慢性（持續(xù)6個月以上）生物學(xué)假陽性急性反應(yīng)見于：發(fā)熱性疾病如肺炎、上呼吸道感染、瘧疾、心內(nèi)膜炎、傳染性單核細(xì)胞增多癥等；疫苗接種；妊娠。慢性反應(yīng)見于自身免疫學(xué)疾病如SLE；抗磷脂綜合征；瘤型麻風(fēng)；吸毒者；老年人。

生物學(xué)假陽性前帶現(xiàn)象發(fā)生率<2％當(dāng)抗體滴度高，原倍血清只是弱陽性甚或陰性，如將血清稀釋后再做，則見高滴度反應(yīng)梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗原理：用梅毒螺旋體抗原檢測特異性抗梅毒螺旋體抗體方法：

梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(TPPA)梅毒螺旋體血球凝集試驗(TPHA)梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）熒光螺旋體抗體吸收試驗（FTA-ABS）梅毒IgM抗體檢測（IgM）梅毒螺旋體蛋白印跡試驗（WB）梅毒螺旋體抗原血清試驗TPPA梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗臨床意義作為非梅毒螺旋體抗原血清試驗(如RPR等)初篩陽性標(biāo)本的確證試驗。梅毒患者經(jīng)過抗梅治療后，TPPA等梅毒螺旋體抗體試驗試驗仍可陽性，故TPPA等試驗陽性不能作為療效觀察的指標(biāo)。TPPA等陽性不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染，應(yīng)結(jié)合非梅毒螺旋體抗原血清試驗結(jié)果進(jìn)行診斷。梅毒血清學(xué)試驗結(jié)果的臨床意義總匯

意義：

TRUSTTPPA__排除梅毒一期梅毒的早期++現(xiàn)癥梅毒(梅毒孕婦所生的嬰兒除外)+-生物學(xué)假陽性-+