專題一基因工程的基本操作程序1

復(fù)習(xí)提問：1、基因工程是指按照人們的愿望，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過和等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，因此又叫做DNA重組技術(shù)。2、基因工程中的限制酶：來源、作用和結(jié)果。3、基因工程中的針線：種類、來源、作用。4、基因工程中的運(yùn)載體：種類、特點(diǎn)。體外DNA重組轉(zhuǎn)基因DNA分子水平上ATCATGGCTT

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ADNA連接酶CGCTT

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AGAATTDNA聚合酶基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞4、目的基因的檢測與鑒定第一步：目的基因的獲取1、目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因2、方法：1)、人工合成2)、從基因文庫中獲取3)、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增(基因比較小，序列已知)基因文庫基因組文庫部分基因文庫－－如：cDNA文庫聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)mRNARNA－DNA雜合雙鏈單鏈DNA雙鏈DNA反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因的過程逆轉(zhuǎn)錄酶DNA聚合酶人工合成目的基因目的基因的mRNA雜交雙鏈(單鏈RNA/單鏈DNA)單鏈DNA反轉(zhuǎn)錄酶DNA聚合酶雙鏈DNA(目的基因)DNA合成儀人工合成目的基因根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA法：蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列基因的脫氧核苷酸序列推測推測目的基因化學(xué)合成基因文庫

基因組文庫部分基因文庫（如:cDNA文庫）基因文庫？將含有某種生物不同基因的許多DNA片斷，導(dǎo)入到受體菌的群體中，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為基因文庫從基因文庫中獲取目的基因從基因文庫中獲取目的基因依據(jù)：1、基因的核苷酸序列2、基因的功能3、基因在染色體上的位置4、基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物—mRNA5、基因的表達(dá)(翻譯)產(chǎn)物—蛋白質(zhì)受體菌的整個(gè)群體包含了這種生物的全部基因基因組文庫的構(gòu)建模式圖基因組文庫與部分基因文庫的關(guān)系cDNA文庫的構(gòu)建模式圖雜交雙鏈(單鏈RNA/單鏈DNA)單鏈DNA反轉(zhuǎn)錄酶雙鏈DNA(cDNA)某種生物的mRNA某種酶DNA聚合酶與載體連接后導(dǎo)入受體菌貯存，組成cDNA文庫原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)啟動子終止子內(nèi)含子外顯子

啟動子終止子真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)非編碼序列轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄mRNA翻譯多肽鏈初始mRNA剪接成熟mRNA翻譯多肽鏈出核孔原核、真核基因表達(dá)比較啟動子

.VS.起始密碼/終止子

.VS./終止密碼存在分子：作用：DN