不同生姜提取物對雄性小鼠生殖毒性的研究課件

不同生姜提取物對雄性小鼠生殖毒性的研究答辯人：沈雪指導(dǎo)老師：盧靜

軍需科技學(xué)院食品質(zhì)量與平安系研究內(nèi)容研究背景研究目的研究方法試驗(yàn)結(jié)果結(jié)論研究背景國外已有人用生姜甲醇提取物體外作用于人的精液，分析生姜對雄性生殖系統(tǒng)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)生姜對人的精液參數(shù)產(chǎn)生了毒性作用

研究目的體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)生姜對人的精液參數(shù)產(chǎn)生毒性作用，體外實(shí)驗(yàn)所獲得的結(jié)果可能與人體或動物的整體試驗(yàn)結(jié)果存在一定的差異，把結(jié)果外推到人體體內(nèi)實(shí)驗(yàn)可能有一些問題，因此有必要進(jìn)行整體動物實(shí)驗(yàn)。初步探討采用整體動物實(shí)驗(yàn)，生姜提取物對雄性生殖系統(tǒng)的影響，為生姜新產(chǎn)品的開發(fā)提供毒理學(xué)依據(jù)。

研究方法小鼠生殖臟器系數(shù)測定小鼠睪丸染色體畸變試驗(yàn)

小鼠精子畸形試驗(yàn)

試驗(yàn)方法20g姜粉生姜提取物50℃水浴3h

生姜醇提物生姜水提物每次加200mL水200mL乙醇煮煎3次

過濾濃縮

動物分組陰性對照組〔NCG〕環(huán)磷酰胺注射組〔CP〕生姜水提物灌胃組〔AEG〕生姜水提物灌胃和環(huán)磷酰胺注射組〔AEG+CP〕生姜醇提物灌胃組〔EEG〕生姜醇提物灌胃和環(huán)磷酰胺注射組〔EEG+CP〕動物分組動物處理方法給予受試物前隔夜禁食16小時，不禁水。按照體重給予受試物，環(huán)磷酰胺0.1ml/10g體重腹腔注射，生姜提取物和生理鹽水均以0.1ml/10g體重灌胃。連續(xù)處理五天

生殖臟器系數(shù)測定計(jì)算公式：睪丸〔附睪/精囊〕臟器系數(shù)〔%〕=×100

小鼠睪丸染色體畸變試驗(yàn)適用于檢測環(huán)境有害物質(zhì)對整體哺乳動物睪丸生殖細(xì)胞染色體的損傷，是目前常用的一種較好的檢測外源性化合物生殖毒性的方法。

小鼠睪丸染色體畸變試驗(yàn)操作：

小鼠處死→雙側(cè)睪丸→磷酸鹽緩沖液〔1mL〕→剪碎→離心管定容離心10min→KCl溶液恒溫20min→離心10min→固定液10min→離心10min→固定20min→混勻→滴片→染色

小鼠精子畸形試驗(yàn)優(yōu)點(diǎn)：敏感性高、簡明、快速、終點(diǎn)明確精子收集：小鼠處死→雙側(cè)附睪→磷酸鹽緩沖生理鹽水〔1ml〕→剪碎→再加1～2ml稀釋→靜止3～5分鐘→精子懸液制片：涂片→枯燥→無水甲醇固定〔5分鐘〕→染色〔2%伊紅10～20分〕→洗片→觀察試驗(yàn)結(jié)果

顯微鏡下觀察1生殖臟器系數(shù)的測定2小鼠睪丸染色體畸變試驗(yàn)3小鼠精子畸形試驗(yàn)4

顯微鏡下觀察睪丸染色體

顯微鏡下觀察精子生殖臟器系數(shù)的測定組別睪丸臟器系數(shù)附睪臟器系數(shù)精囊臟器系數(shù)NCG0.463±0.04950.245±0.0560.659±0.226*CP0.337±0.1360.180±0.290.368±0.102AEG0.418±0.0770.207±0.0230.509±0.085EEG0.452±0.1310.230±0.0470.562±0.153*AEG+CP0.393±0.2080.222±0.0420.686±0.1187*EEG+CP0.493±0.0200.368±0.0420.522±0.081*表示與cp組比較P<0.05小鼠睪丸染色體畸變試驗(yàn)組別動物數(shù)（只）鏡檢細(xì)胞數(shù)（個）染色體畸變率（%）NCG55003.80±1.48*CP550011.0±3.54AEG55004.40±2.80*EEG55004.20±1.30*AEG+CP55007.40±1.52*EEG+CP55007.60±2.07**表示與cp組比較P<0.05小鼠精子畸形試驗(yàn)結(jié)論生姜提取物

1不能對小鼠的生殖臟器系數(shù)產(chǎn)生不利影響2不能誘發(fā)小鼠睪丸染色體畸變3不能誘發(fā)小鼠精子畸形結(jié)論生姜提取物

1改善了環(huán)磷酰胺作用下生殖臟器系數(shù)降低的狀況2對環(huán)磷酰胺誘發(fā)的小鼠