當(dāng)歸注射液對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性彌散性血管內(nèi)凝血血液動(dòng)力學(xué)的影響

當(dāng)歸注射液對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性彌散性血管內(nèi)凝血血液動(dòng)力學(xué)的影響【摘要】目的探討當(dāng)歸注射液(APS)對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性彌散性血管內(nèi)凝血血液動(dòng)力學(xué)的影響。方法頸靜脈注射Dextran500復(fù)制大鼠實(shí)驗(yàn)性DIC模型，采用腸系膜微循環(huán)觀察、器官微區(qū)血流和血液流變學(xué)測(cè)定方法，觀察APS對(duì)DIC大鼠微血管口徑、器官微區(qū)血流量、血黏度及血小板功能的影響。結(jié)果DIC時(shí)，微循環(huán)明顯障礙，表現(xiàn)為微血管收縮、微血流變慢和血細(xì)胞聚集，APS治療后，微血管明顯擴(kuò)張，其流態(tài)和血細(xì)胞聚集積分值明顯低于NS組；APS和NS組均能改善胃、腸、肝的微區(qū)血流量，但前者效果優(yōu)于NS；APS治療后，血黏度、血小板黏附率和聚集率明顯低于NS治療組，且紅細(xì)胞變形能力明顯增強(qiáng)。結(jié)論APS通過擴(kuò)張微血管、增加器官血流量、降低血粘度和抑制血小板聚集作用，干預(yù)DIC的轉(zhuǎn)歸。

【關(guān)鍵詞】當(dāng)歸注射液；彌散性血管內(nèi)凝血；微循環(huán)；血流量；血液流變學(xué)

Abstract：ObjectiveToexploretheeffectsofAngelicaparenteralInjection(APS)onhemodynamicsinratswithdisseminatedintravascularcoagulation(DIC).MethodsAmodelofDICwasmadeinratsbyDextran500injectionfromjugularvein,andeffectsofAPSonmicro-vessels,micro-areabloodflowvolumeoforgans,bloodviscosityandplateletaggregationwerestudiedinratsbyanobservationofmesentericmicrocirculation,determinationofhemorheologyandbloodflowmicrocirculationdisturbancewasmainlymicro-vesselscontraction,slowmicro-bloodflowandmicro-thrombusafterDextran500injection.TheresultshowedthatAPScoulddilatemicro-vesselobviouslyandreducemultiplescorevaluesofbloodflowandbloodcellaggregation,therewereobviousdifferencescomparedwithnormalsaline(NS)group().Themicro-areabloodflowvolumeofstomach,intestineandliverwasevidentlyincreasedinAPSandNSgroups,however,theformereffectwassuperiortoNSgroup().AftertreatmentwithAPS,thebloodviscosityandplateletaggregationwereobviouslylowerthanthoseofNSgroup,andmeantimethedeformityabilityofRBCwasobviouslyincreased().ConclusionAPScaninfluencetherecoveryofDICthroughdilatingmicro-vessel,increasingbloodflowvolumeoforgans,andreducingbloodviscosityandplateletaggregation.

Keywords：AngelicaparenteralInjection；DIC；Microcirculation；Bloodflowvolume；Hemorheology

當(dāng)歸有補(bǔ)血治淤、調(diào)經(jīng)止痛、潤(rùn)腸通便的功效，是臨床常用中藥之一。研究表明［1］，當(dāng)歸可減少氧自由基產(chǎn)生，增強(qiáng)SOD活性，保護(hù)受損的血管內(nèi)皮細(xì)胞，具有抗炎及雙向免疫調(diào)節(jié)的作用。為了進(jìn)一步了解當(dāng)歸對(duì)疾病的治療作用基礎(chǔ)，本研究從微循環(huán)、血液流變學(xué)、器官血流量等角度，探討當(dāng)歸對(duì)大鼠彌散性血管內(nèi)凝血(disseminatedintravascularcoagulation,DIC)血液動(dòng)力學(xué)的影響。

1材料和方法1材料

Wistar雄性大鼠，中國(guó)醫(yī)科院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育中心提供；當(dāng)歸注射液(AngelicaparenteralInjection,APS)，北京市第四制藥廠生產(chǎn)(批號(hào)001236)；戊巴比妥鈉，北京化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，(批號(hào)20000919)；肝素鈉，北京奧博星生物技術(shù)責(zé)任有限公司生產(chǎn)，(批號(hào)001218)。生物信號(hào)采集系統(tǒng)，浙江醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器廠生產(chǎn)；微循環(huán)顯微電視錄像設(shè)備，徐州光學(xué)儀器廠生產(chǎn)；3-9D型微循環(huán)、血流變、紅細(xì)胞變形、血小板聚集綜合儀，成都麥賽科貿(mào)公司生產(chǎn)；ZCZ-50型自動(dòng)抽注機(jī)，浙江醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器廠生產(chǎn)；MLD-1型多功能激光多普勒血流儀，南開大學(xué)醫(yī)學(xué)物理研究所生產(chǎn)。2分組與治療

Wistar雄性大鼠32只，體重250～300g，大鼠隨機(jī)分為正常組、DIC模型組、APS組、NS組。大鼠DIC模型復(fù)制成功后40min進(jìn)行治療，APS組經(jīng)自動(dòng)抽注機(jī)從頸靜脈以ml/min的速度推注APS稀釋液，NS組以生理鹽水替代ASP進(jìn)行同樣治療。3大鼠實(shí)驗(yàn)性DIC模型的復(fù)制

大鼠肌肉注射戊巴比妥鈉(50mg/kg)全身麻醉，靜脈注射肝素鈉(700U/kg)全身抗凝。分離頸動(dòng)脈和頸靜脈并進(jìn)行插管，穩(wěn)定30min后，用10%高分子右旋糖酐以10ml/kg經(jīng)頸靜脈注射，3min注完，復(fù)制大鼠實(shí)驗(yàn)性DIC模型［2］。4腸系膜微循環(huán)觀察

常規(guī)方法制備回腸下段腸系膜標(biāo)本［3］，以改良Krebs液恒溫灌流℃，15～20滴/min，冷光源加光導(dǎo)纖維做透射光源，通過顯微電視觀察，錄相記錄分析。分別于DIC前20mim、DIC后30mim及治療后20mim時(shí)，觀察腸系膜微血管的一級(jí)細(xì)動(dòng)脈、一級(jí)細(xì)靜脈以及回腸下段腸系膜淋巴管的口徑和流態(tài)變化。腸系膜微血管口徑以百分?jǐn)?shù)表述；微血流流態(tài)、血細(xì)胞聚集積分值以半定量記分法表述［4］。5器官微區(qū)血流量測(cè)定實(shí)驗(yàn)大鼠腹部切口，在正中線作長(zhǎng)4cm縱切口，打開腹腔，暴露小腸、胃、肝等器官，分別于DIC前10mim，DIC后20mim及治療30mim后，利用激光多普勒血流儀對(duì)不同器官的固定部位進(jìn)行血流量(BFR)和流速(BFV)測(cè)定。6血液流變學(xué)測(cè)定

DIC治療后50min，右側(cè)頸動(dòng)脈放血5ml，肝素抗凝后檢測(cè)全血黏度、血漿黏度、血小板黏附、聚集功能，通過儀器自帶的流變分析軟件計(jì)算紅細(xì)胞聚集指數(shù)和紅細(xì)胞變形指數(shù)。7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示，用計(jì)算機(jī)統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行分析。

2結(jié)果

腸系膜微血管、微淋巴管口徑的變化

DIC時(shí)，A1，V1，ML出現(xiàn)收縮，經(jīng)APS治療后，管徑擴(kuò)張。結(jié)果見表1。表1APS對(duì)DIC大鼠腸系膜微血管、微淋巴管口徑的影響

腸系膜微循環(huán)積分值的變化

DIC時(shí)微血流異常，呈粒緩流和停流，血細(xì)胞重度聚集，其積分值明顯增高；經(jīng)APS治療后，積分值下降。結(jié)果見表2。表2APS對(duì)DIC大鼠腸系膜微循環(huán)積分值的影響

器官微區(qū)血流量、流速的變化

DIC時(shí)的器官微區(qū)血流量、流速明顯低于實(shí)驗(yàn)前水平；經(jīng)APS治療后，流速、流量明顯增加。結(jié)果見表3。表3APS對(duì)DIC大鼠器官微區(qū)血流量的影響

APS對(duì)紅細(xì)胞變形性的影響

APS治療后，紅細(xì)胞變形指數(shù)升高，而聚集指數(shù)降低。結(jié)果見表4。表4APS對(duì)DIC大鼠紅細(xì)胞變形指數(shù)、紅細(xì)胞聚集指數(shù)的影響

全血黏度、血漿黏度的變化APS治療后，全血黏度、血漿黏度和全血還原黏度明顯降低。結(jié)果見表5。表5APS對(duì)DIC大鼠血粘度的影響

血小板黏附和聚集率的變化

APS治療后，血小板黏附率、聚集率明顯降低。見表6。表6APS對(duì)DIC大鼠血小板黏附率和聚集率的影響

組別血小板最大

3討論

DIC是臨床上常見病理過程，常常因?yàn)槲⒀h(huán)障礙導(dǎo)致機(jī)體機(jī)能代謝障礙。研究表明［5］，微循環(huán)障礙和細(xì)胞線粒體功能損害時(shí)，組織細(xì)胞存在著氧攝取和氧利用障礙，特別是危重患者常出現(xiàn)“釋放依賴性氧消耗”，由此導(dǎo)致無(wú)氧代謝，發(fā)生組織細(xì)胞乳酸中毒。因此，如何更有效地改善DIC時(shí)的微循環(huán)障礙及糾正血液動(dòng)力學(xué)異常具有重要意義。腸系膜微循環(huán)觀察可見，DIC時(shí)微循環(huán)障礙主要表現(xiàn)為微血管和微淋巴管的收縮、微血流變慢及血細(xì)胞的重度聚集，當(dāng)歸注射液治療可明顯改善其微循環(huán)異常，使器官的血流量和血流速度增加。微循環(huán)是物質(zhì)交換的場(chǎng)所，同時(shí)也是信息、能量傳遞的通路，其正常與否直接關(guān)系著組織細(xì)胞的功能。結(jié)果表明，當(dāng)歸注射液具有擴(kuò)張血管和淋巴管的作用，這有利于有效循環(huán)血量的恢復(fù)和器官血液灌流量的增加，并在實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)得到證實(shí)。

血液流變學(xué)主要研究血液、血管、血液組份的流變性質(zhì)及其變化規(guī)律，其異常是造成微循環(huán)障礙的基礎(chǔ)。研究表明［6，7］，血液流變性異?？蓪?dǎo)致組織細(xì)胞包括內(nèi)皮細(xì)胞的損害，加重微循環(huán)障礙，因此，如何有效地糾正微循環(huán)障礙時(shí)的血液流變學(xué)異常，在DIC治療中起著重要作用。結(jié)果表明，當(dāng)歸注射液可明顯降低DIC時(shí)的血粘度增高，抑制血小板黏附和聚集，增強(qiáng)紅細(xì)胞的變形性。這些作用有利于血流速度的加快，緩解微循環(huán)障礙時(shí)組織細(xì)胞的缺血缺氧狀態(tài)，當(dāng)歸注射液能否通過增加白細(xì)胞游動(dòng)性，解除微血管內(nèi)白細(xì)胞嵌塞狀態(tài)，以達(dá)到疏通微血管、改善灌流狀態(tài)，有待研究。本研究結(jié)果表明，當(dāng)歸注射液可通過改善血液流變學(xué)特性，有效改善微循環(huán)障礙，增強(qiáng)器官血液灌流量，可作為活血化淤中藥，用于微循環(huán)障礙相關(guān)性疾病的治療。

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