中藥類方法學研究中的中藥質量標準研究

中藥類方法學研究中的中藥質量標準研究

通常使用杏仁法，來自姜科植物陽春砂、綠殼砂和刺槐砂。l.waetsenjen，海南沙木魚刺l.w干燥成熟的水果。具有化濕開胃,溫脾止瀉,理氣安胎之功效。陽春砂主產(chǎn)于廣東、海南,廣東陽春產(chǎn)者素有道地藥材之稱;廣西、云南少部分地區(qū)亦產(chǎn)。綠殼砂主產(chǎn)于越南、緬甸、泰國,以越南產(chǎn)者奉為佳品。海南砂主產(chǎn)于海南。云南陽春砂仁是于1963年從原產(chǎn)地廣東陽春縣引入云南的,目前產(chǎn)量占全國總量的65.5%,與廣東陽春砂相比,其植株生長較高,果實較大,每室籽粒數(shù)較多等性狀特征。羅天誥等對云南陽春砂仁的質量與生態(tài)環(huán)境進行了研究;石汝明亦對云南砂仁的品質問題進行了調查研究,他們均認為其差異并非物種變異,而是生態(tài)環(huán)境所致,其質量與廣東原產(chǎn)區(qū)的陽春砂仁質量基本一致。楊兆起等利用顯微鑒別和理化鑒別相結合的方法對商品砂仁進行了質量對比研究。史關正等利用薄層層析法對砂仁藥材及其制劑進行了鑒別。但對不同品種、不同產(chǎn)地的砂仁藥材以及砂仁不同部位進行系統(tǒng)的質量標準研究尚未見報道,為此本文采用GC法測定砂仁藥材和不同部位的乙酸龍腦酯含量,同時采用《中國藥典》附錄方法分別測定了其總灰分、酸不溶性灰分以及水分含量,對不同來源的砂仁藥材進行綜合質量對比研究,報道如下。1實驗材料藥材為1997,1998年采收或市售,所有樣品經(jīng)本校中藥資源研究室徐鴻華教授鑒定,見表1~5。2對照品溶液的制備2.1總灰分、酸不溶性灰分測定照《中國藥典》1995年版(一部)附錄IXK灰分測定法進行。水分測定照《中國藥典》1995年版(一部)附錄IXH第二法(甲苯法)進行。2.2乙酸龍腦酯含量測定2.2.1對照品溶液制備取乙酸龍腦酯對照品,加甲醇制成每1ml含1.769mg的溶液,作為對照品溶液。2.2.2供試品溶液制備取砂仁藥材粉末150mg,精密稱定,置5ml容量瓶中,精密吸取甲醇5.00ml,加入容量瓶中,稱重,放置24h后,超聲處理5min,補回原重,搖勻,靜置,取上清液作供試品溶液。2.2.3色譜條件HP5890型氣相色譜儀,色譜柱:HP-INNOWAX(CrosslinkedPolyethyleneGlycol,30m×0.32mm,0.15μm);進樣口溫度250℃,檢測器(FID)溫度250℃,柱溫80℃,氣體流量(ml·min-1)N230,H230,空氣400,分流比50:1。2.2.4測定法分別精密吸取對照品溶液2μl和4μl、供試品溶液各2μl,注入氣相色譜儀,測定峰面積,外標二點法計算,即得。3結果3.1色譜特征按擬定的色譜條件測定,所得色譜圖如圖1,乙酸龍腦酯保留時間tR=5.939,分離度好,峰形對稱。3.2線性范圍2020g線性回歸方程Y=147519.5X+95730(Y為峰面積,X為進樣量,μg),r=1.0000,線性范圍0~10μg;供試品液制備后的藥渣照原法提取,進樣分析,結果氣相色譜圖中未見乙酸龍腦酯峰,見圖1D。3.3表1顯示了每個樣品中總養(yǎng)分、酸乙二醇提取物、水分和醋酸龍腦酸含量的測定結果4健康河道中乙酸龍腦酯含量檢測方法的確定4.1從表1~5來看,樣品的總灰分大部分在6%~10%,建議砂仁藥材總灰分控制在6%~10%范圍;實驗過程中觀察到當酸不溶性灰分大于3%時,其沉淀物中可見明顯砂粒,建議砂仁藥材的酸不溶性灰分不得超過3%。4.2所有測試樣品的水分含量均低于15%,符合《中國藥典》中砂仁項規(guī)定。4.3砂仁中富含揮發(fā)油,為其主要有效成分,而揮發(fā)油中又以乙酸龍腦酯含量為多,《中國藥典》砂仁質量標準中僅規(guī)定其揮發(fā)油含量大于3%,而研究表明不同品種、不同產(chǎn)地的砂仁揮發(fā)油中的乙酸龍腦酯含量差異甚大,為更準確地評價砂仁藥材的質量,有必要制定砂仁藥材中乙酸龍腦酯的含量標準。本文研究建立氣相色譜測定砂仁藥材中乙酸龍腦酯含量的方法,其供試品液制備簡便,方法靈敏、可靠,便于推廣。同時利用該法對不同品種、不同產(chǎn)地以及不同部位的砂仁藥材進行測定,為砂仁藥材中乙酸龍腦酯含量標準的制定提供參考。4.4從表1看出,廣東省不同縣市所產(chǎn)的陽春砂中乙酸龍腦酯含量無明顯差異;云南產(chǎn)陽春砂與廣東陽春砂中乙酸龍腦酯含量并無差異,這也進一步說明云南陽春砂與地道陽春砂中乙酸龍腦酯含量并無差異,其外觀的差異僅為生態(tài)環(huán)境所致;表1還說明目前市售的陽春砂質量較好,與各地采收的樣品基本一致,甚至更好。4.5表1、表2、表3比較,綠殼砂與海南砂中乙酸龍腦酯含量無明顯差異,而陽春砂中乙酸龍腦酯含量則明顯高于綠殼砂和海南砂,與傳統(tǒng)認為陽春砂的療效優(yōu)于綠殼砂和海南砂一致。4.6表4說明砂仁中乙酸龍腦酯主要集中在種子部位,而其果皮中的含量甚微。與傳統(tǒng)認為凈砂仁(種子)的療效優(yōu)于砂仁一致,即砂仁的有效部位在種子。4.7凈砂仁為砂仁去除果皮后所剩種子,其價格應高于砂仁,但出乎我們預料的是許多市面上的凈砂仁價格還低于砂仁,為此我們采集到幾個市售凈砂仁樣品進行分析,結果見表5,很明顯除1個樣品基本符合要求外,其余3個樣品中的乙酸龍腦酯含量甚微,酸不溶性灰分明顯偏高,灰分中可見泥砂粒。究其原因,凈砂仁由于去除了果皮,品種之間難以鑒別,且易于摻雜;或者是由于去除了果皮,其成分更易揮發(fā)。今后應加強凈砂仁的質量管理。4.8砂仁中揮發(fā)油、乙酸龍腦酯的含量與采收期有關,云南陽春砂中的2批樣品中乙酸龍腦酯含量較低,采收時這2批樣品均未成熟,果皮呈青色,提示應加強砂仁采收期與療效和