雞腸炎沙門(mén)氏菌的分離鑒定與藥敏試驗(yàn)

雞腸炎沙門(mén)氏菌的分高鑒定與藥敏試驗(yàn)崔苗苗;佟彥林;李寧;蘇玉銘;魏澍;任玉峰;李欣南;李冰;周鐵忠【摘要】通過(guò)分離培養(yǎng)、染色鏡檢、特異性基因鑒定和動(dòng)物致病性試驗(yàn)，對(duì)遼寧某規(guī)?；B(yǎng)雞場(chǎng)疑似雞沙門(mén)氏菌病的病雞,采集肝臟和腸內(nèi)容等病料進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)和鑒定分型，同時(shí)對(duì)所鑒定的菌株通過(guò)藥物敏感試驗(yàn)篩選敏感藥物.病原學(xué)鑒定結(jié)果確定所分離的病原為腸炎沙門(mén)氏菌;藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明，該菌株對(duì)頭孢噻呋、恩諾沙星、氧氟沙星、沙拉沙星高度敏感，本試驗(yàn)結(jié)果為臨床上對(duì)雞沙門(mén)氏菌病的診斷和治療提供了一定的參考依據(jù).【期刊名稱(chēng)】《現(xiàn)代畜牧獸醫(yī)》【年(卷)，期】2018(000)011【總頁(yè)數(shù)】6頁(yè)(P14-19)【關(guān)鍵詞】雞;腸炎沙門(mén)氏菌;分離鑒定;藥敏試驗(yàn)【作者】崔苗苗;佟彥林;李寧;蘇玉銘;魏澍;任玉峰;李欣南;李冰;周鐵忠【作者單位】錦州醫(yī)科大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，遼寧錦州121001;錦州醫(yī)科大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，遼寧錦州121001;遼寧省動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)測(cè)預(yù)警中心，遼寧沈陽(yáng)110001;錦州醫(yī)科大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，遼寧錦州121001;遼寧省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，遼寧沈陽(yáng)110161;遼寧省大連市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，遼寧大連116037;遼寧省獸藥飼料畜產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心，遼寧沈陽(yáng)110015;錦州醫(yī)科大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，遼寧錦州121001;錦州醫(yī)科大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，遼寧錦州121001【正文語(yǔ)種】中文【中圖分類(lèi)】S858.27沙門(mén)氏菌是引起人類(lèi)和動(dòng)物腸炎的主要致病菌之一，根據(jù)O抗原和H抗原的不同，可將其大約分為2637個(gè)血清型［1］，沙門(mén)氏菌的各個(gè)血清型在自然界中引起人和動(dòng)物的感染能力有所不同，只有一小部分才會(huì)引起感染［2］。雞沙門(mén)氏菌引起雞的3種類(lèi)型疾病分別是雞白痢、禽傷寒和禽副傷寒，可通過(guò)種蛋垂直傳播，引起受精率和孵化率降低，雛雞生長(zhǎng)遲緩和下痢，成年雞卵巢炎而產(chǎn)蛋下降，或肝臟破裂出血而死亡，是養(yǎng)禽業(yè)最常發(fā)的傳染病之一，給養(yǎng)禽業(yè)帶來(lái)了巨大的損失。實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中，由于應(yīng)用大量抗生素和化學(xué)性抗菌藥物對(duì)本病進(jìn)行預(yù)防控制，造成了嚴(yán)重的細(xì)菌耐藥性和禽蛋肉產(chǎn)品中的藥物殘留，導(dǎo)致了本病的防治困難和食品安全問(wèn)題［3］。為了預(yù)防新耐藥菌株的產(chǎn)生，更有效地治療雞腸炎沙門(mén)氏菌病，本試驗(yàn)對(duì)遼寧某規(guī)模雞場(chǎng)進(jìn)行了雞沙門(mén)氏菌鑒定分型和敏感藥物篩選，為雞沙門(mén)氏菌病的診斷和防治提供了參考依據(jù)。1材料與方法1.1材料1.1.1病料的采集于2017年9月，遼寧省錦州市某規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)，飼養(yǎng)的6000只AA肉雞，有一棟約2000只12日齡左右肉雞雛疑似雞沙門(mén)氏菌感染發(fā)病，選擇具有典型雞沙門(mén)氏菌臨床癥狀的病死雞100只，無(wú)菌取其肝臟、脾臟和腸道，冷藏送到實(shí)驗(yàn)室用于分離細(xì)菌。1.1.2試驗(yàn)動(dòng)物選擇某雞白痢凈化種雞場(chǎng)孵化的AA雄性肉雛雞，5日齡12只；經(jīng)過(guò)雞白痢抗體檢測(cè)為陰性，經(jīng)過(guò)支原體、ND、AI、雞球蟲(chóng)病等其他病原檢測(cè)也均為陰性，作為分離菌株致病性試驗(yàn)的試驗(yàn)動(dòng)物。1.1.3試驗(yàn)試劑營(yíng)養(yǎng)瓊脂、SS培養(yǎng)基購(gòu)于青島海博生物技術(shù)有限公司，Gillgreen核酸電泳染料、dNTPMix、DL2000購(gòu)于北京百泰克有限公司；細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒、膠回收試劑盒購(gòu)于北京索萊寶科技有限公司；APINaCl0.85%培養(yǎng)基和ID32E鑒定條均購(gòu)自BIOMERIEUX公司；引物由南京思普金生物科技公司設(shè)計(jì)。1.2試驗(yàn)方法1.2.1細(xì)菌分離培養(yǎng)和形態(tài)觀察無(wú)菌條件下，將100份病料劃線于SS鑒別培養(yǎng)基，37°C,培養(yǎng)18-24h,挑取單個(gè)菌落，革蘭氏染色鏡檢，觀察細(xì)菌形態(tài)、顏色，反復(fù)此過(guò)程直至獲得純培養(yǎng)。1.2.2生化鑒定將上述獲得的單菌落，在營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上劃線36±1C培養(yǎng)24h。將待檢細(xì)菌單個(gè)菌落，懸浮于3mL懸浮培養(yǎng)基，制備0.5麥?zhǔn)蠞舛鹊木鷳乙海褂米詣?dòng)加樣器將菌懸液滴入試紙條反應(yīng)杯中，每個(gè)反應(yīng)杯中滴入55pL,菌液和試劑滴加完畢后，37C培養(yǎng)24h，用細(xì)菌鑒定儀判讀。結(jié)果參考臨床微生物學(xué)診斷與圖譜[4]1.2.3基因鑒定分型特異性引物的設(shè)計(jì)鑒定雞腸炎沙門(mén)氏菌的特異性引物設(shè)計(jì)參照SHPark等[5]根據(jù)SefAgene，設(shè)計(jì)S.Enteritidis引物序列為：STEF:5’-AACAACGGCTCCGGTAATGAGATTG-3’STER:5’-ATGACAAACTCTTGATTCTGAAGATCG-3’基因組DNA將分離純化后的細(xì)菌，挑取單個(gè)菌落接種于的TSB液體培養(yǎng)基中，37C,220r/min震蕩4~5h，肉眼觀察待菌液渾濁時(shí)，無(wú)菌挑取菌液進(jìn)行涂片、染色、鏡檢，證實(shí)為純培養(yǎng)物，然后將純菌液按照《細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒》(Solarbio)說(shuō)明和步驟方法，提取細(xì)菌的基因組。PCR擴(kuò)增以提取的基因組DNA為模板與合成的特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR反應(yīng)體系為30pL:菌液DNA模板3pL、2xTapMasterMix15pL、上、下游引物各1pL、ddH2O10pL。PCR反應(yīng)條件：94C預(yù)變性2min;94C變性30s,60°C退火20s,72°C延伸20s,共30個(gè)循環(huán)；72°C最后延伸10min。將PCR產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，目的條帶進(jìn)行膠回收并送至生物公司測(cè)序，測(cè)序結(jié)果在Genbank中進(jìn)行序列比對(duì)。1.2.4致病性試驗(yàn)選取5日齡雄性肉雞12只，隨機(jī)平均分為2組，對(duì)照組灌胃滅菌PBS溶液1mL/只和試驗(yàn)組灌胃3.2x108CFU/mL重懸菌液1mL/只，灌胃后隔離飼喂，以防交叉感染，每隔4h觀察1次，連續(xù)觀察72h，并記錄試驗(yàn)動(dòng)物的發(fā)病以及死亡情況。將死亡的試驗(yàn)雞剖檢，無(wú)菌采取肝臟、脾臟等病料，接種SS培養(yǎng)基，培養(yǎng)18-24h后，使用革蘭氏染色，油鏡下觀察，從發(fā)病和死亡的試驗(yàn)雞體內(nèi)分離回收細(xì)菌。1.2.5藥敏試驗(yàn)將分離已鑒定的菌株進(jìn)行14種抗菌藥物的藥敏檢驗(yàn)，用凍干型細(xì)菌定量藥敏檢測(cè)盒進(jìn)行抗菌藥物的敏感性檢測(cè)，參照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute,CLSI)(2012)判定標(biāo)準(zhǔn)［6］,并對(duì)所檢測(cè)樣品進(jìn)行結(jié)果判定和分析［7-8］。2結(jié)果與分析2.1細(xì)菌分離培養(yǎng)結(jié)果100份病料接種的SS培養(yǎng)基，有73個(gè)SS培養(yǎng)基上可看到呈露珠樣的細(xì)小、無(wú)色透明或中心略帶黑色光澤、圓整、濕潤(rùn)并光滑，菌落的直徑大約有2-3mm。使用革蘭氏染色法染色后鏡檢結(jié)果為：革蘭氏陰性、短桿菌、粉紅色、兩端稍圓，符合沙門(mén)氏菌的菌落及鏡檢特征。圖1雞沙門(mén)氏菌的生長(zhǎng)狀態(tài)與形態(tài)結(jié)構(gòu)Fig.1GrowthstateandmorphologicalstructureofSalmonella2.2細(xì)菌生化試驗(yàn)結(jié)果經(jīng)生化試驗(yàn)得到結(jié)果見(jiàn)表1。將此生化結(jié)果通過(guò)與臨床微生物學(xué)診斷與圖譜［4］比對(duì)發(fā)現(xiàn)符合沙門(mén)氏菌生化特征。2.3PCR鑒定結(jié)果PCR產(chǎn)物擴(kuò)增電泳后，在約310bp處出現(xiàn)目的片段，與腸炎沙門(mén)氏菌基因大小一致；陰性對(duì)照無(wú)條帶出現(xiàn)。圖2PCR結(jié)果Fig.2PCRresults表1分離菌的生化結(jié)果Table1Biochemicalresultsofisolates生化項(xiàng)目結(jié)果生化項(xiàng)目結(jié)果生化項(xiàng)目結(jié)果吲哚甲基紅VP枸櫞酸鹽利用（西蒙氏）葡萄糖產(chǎn)氣（37°C）麥芽糖甘露糖蔗糖H2S（TSI）尿素酶動(dòng)力-+-++++-+/--+苯丙氨酸脫氨酶賴氨酸脫羧酶鳥(niǎo)氨酸脫羧酶精氨酸雙水解酶明膠液化（22C）KCN抵抗力丙二酸鹽利用水楊苷側(cè)金盞花醇衛(wèi)矛醇間肌醇-+++-V+/---+/-VD-山梨醇L-阿拉伯糖棉籽糖L-鼠李糖D-木糖海藻糖七葉苷水解粘液酸鹽氧化酶ONPG++-+++-+-V2.4致病性試驗(yàn)結(jié)果接種分離菌的試驗(yàn)雞于感染后12h，羽毛污穢、精神沉郁、食欲下降、喜臥不愿意走動(dòng)；感染后24h，試驗(yàn)雞拉白色或淡黃色稀糞，嚴(yán)重者肛門(mén)被糞便糊死；感染后36h，試驗(yàn)雞全部死亡，死亡率達(dá)到100%。死亡后，剖檢可見(jiàn)肝臟土黃色，有淤血斑點(diǎn)，脾臟腫大。在SS培養(yǎng)基上形成露珠樣無(wú)色透明、較小的菌落；鏡下觀察為陰性小桿菌，兩端稍圓，粉紅色；符合沙門(mén)氏菌生長(zhǎng)情況和形態(tài)要求。通過(guò)以上各項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果，證明所分離的細(xì)菌為雞源沙門(mén)氏菌。2.5藥敏試驗(yàn)結(jié)果將分離已獲得的73株細(xì)菌進(jìn)行14種抗菌藥物的藥敏檢驗(yàn)，結(jié)果顯示，該分離菌對(duì)氨芐西林、磺胺異嗯唑等耐藥性較強(qiáng)，而對(duì)頭孢噻呋、恩諾沙星等藥物的耐藥性較弱，具體如表2所示。表2腸炎沙門(mén)氏菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果Table2ResultsofdrugsusceptibilitytestofS.Enteritidis藥敏紙片耐藥（株）高敏（株）中敏（株）耐藥率（%）氨芐西林阿莫西林/克拉維酸頭孢噻呋慶大霉素大觀霉素四環(huán)素多西環(huán)素恩諾沙星氧氟沙星磺胺異嗯唑復(fù)方新諾明氟苯尼考多粘菌素E沙拉沙星731421110168347013151250767752269600343580524555955631935754581210019.182.7415.0713.7021.9210.964.115.4895.8917.8120.5516.446.853討論3.1關(guān)于沙門(mén)氏菌血清分型據(jù)報(bào)道雞源沙門(mén)氏菌血清型有腸炎、鼠傷寒、嬰兒、印第安納、雞白痢、肯塔基、德?tīng)柋啊愤d、鴨、火雞、明斯特、胥伐成格隆等，雖然血清型種類(lèi)繁多、菌株復(fù)雜，分布具有很強(qiáng)的區(qū)域特點(diǎn)，但以腸炎沙門(mén)氏菌、鼠傷寒沙門(mén)氏菌、印第安納沙門(mén)氏菌和德?tīng)柋吧抽T(mén)氏菌等為主，優(yōu)勢(shì)血清型為腸炎、嬰兒、鼠傷寒、印第安納和雞白痢。遼寧省常發(fā)腸炎沙門(mén)氏菌、杜伊斯堡沙門(mén)氏菌、鵝沙門(mén)氏菌，本次鑒定腸炎沙門(mén)氏菌血清型在我國(guó)北京、上海、河北、山東地區(qū)均有報(bào)道［9-11］，沙門(mén)氏菌的血清型分布也具有明顯的地域性特點(diǎn)，腸炎沙門(mén)氏菌在北美地區(qū)的美國(guó)、加拿大，在歐洲的丹麥、荷蘭也有報(bào)道［12］。沙門(mén)氏菌血清型鑒定方法有傳統(tǒng)玻片凝集法、Luminex-xMAP法、免疫分析檢測(cè)技術(shù)、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增、基因芯片技術(shù)(genechip)、沙門(mén)氏菌的新型檢測(cè)技術(shù)(如生物傳感器檢測(cè)技術(shù)、納米技術(shù)等)。傳統(tǒng)的血清學(xué)鑒定方法操作簡(jiǎn)便，但血清價(jià)格昂貴，鑒定過(guò)程步驟多，耗費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)，要求試驗(yàn)人員有豐富的經(jīng)驗(yàn)，即便如此，操作人員的主觀判斷仍有可能造成誤差。鑒于沙門(mén)氏菌血清型在流行病學(xué)研究中的重要性和傳統(tǒng)血清型鑒定方法的不足，研究人員開(kāi)展了多種方法的研究以彌補(bǔ)傳統(tǒng)血清鑒定方法的不足。本研究是應(yīng)用的是基于沙門(mén)氏菌fliC特異性基因建立的PCR法對(duì)沙門(mén)氏菌血清型進(jìn)行鑒定分型，與其他研究者建立的方法相比，不僅具有反應(yīng)快速、高效、靈敏和成本低的優(yōu)點(diǎn)，且理論上可以鑒定589種沙門(mén)氏菌血清型；只要有普通PCR儀的實(shí)驗(yàn)室就可以開(kāi)展沙門(mén)氏菌血清型的分型鑒定，能滿足一般實(shí)驗(yàn)室的要求。3.2關(guān)于沙門(mén)氏菌的致病機(jī)制和致病性研究表明沙門(mén)氏菌的致病機(jī)制取決于其本身的毒力和宿主的結(jié)構(gòu)，菌株的毒力由毒力因子決定，很多沙門(mén)氏菌的毒力因子最近才確定，如毒力島的毒力因子，由于毒力質(zhì)粒、毒素、菌毛、鞭毛早已發(fā)現(xiàn)及研究了幾十年，所以被稱(chēng)為傳統(tǒng)（典型）毒力因子。到目前為止只發(fā)現(xiàn)8種血清型含有毒力質(zhì)粒。沙門(mén)氏菌既能產(chǎn)生內(nèi)毒素也能產(chǎn)生外毒素，內(nèi)毒素是沙門(mén)氏菌細(xì)胞壁的脂多糖成分，可以導(dǎo)致體內(nèi)和體外多樣化反應(yīng)。夕卜毒素分為2種類(lèi)型，包括細(xì)胞毒素（神經(jīng)毒素）和腸毒素，目前關(guān)于沙門(mén)氏菌外毒素的作用方式了解非常有限。沙門(mén)氏菌入侵的最佳起始部位是濾泡上皮細(xì)胞，其次是在腸道上的派伊爾氏結(jié)上細(xì)胞，其位于腸道黏膜表面，所以其主要侵襲部位在腸道。關(guān)于沙門(mén)氏菌的致病性研究一直選擇健康SPF級(jí)小白鼠作為試驗(yàn)動(dòng)物［13-14］,而本次試驗(yàn)首次選擇雛雞做為靶動(dòng)物進(jìn)行沙門(mén)氏菌的致病性研究，更能科學(xué)直接地驗(yàn)證其致病性。張珍（2017）［15］研究表明雞源沙門(mén)氏菌對(duì)小鼠有較強(qiáng)的致病性，致死率達(dá)到60%~80%；本試驗(yàn)選擇某雞白痢凈化種雞場(chǎng)孵化的，經(jīng)過(guò)雞白痢抗體檢測(cè)為陰性，經(jīng)過(guò)支原體、ND、AI、雞球蟲(chóng)病等其他病原檢測(cè)也均為陰性的雄性雛雞，作為分離菌株致病性試驗(yàn)動(dòng)物，攻菌后36h致死率達(dá)到100%，證明雞腸炎沙門(mén)氏菌遼寧流行菌株具有很強(qiáng)的致病性。3.3關(guān)于沙門(mén)氏菌的耐藥性現(xiàn)狀在遼寧錦州地區(qū)分離得到的腸炎沙門(mén)氏菌的藥敏結(jié)果與其他文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果稍有不同，可能是由于血清型不同、細(xì)菌本身突變以及地區(qū)用藥的習(xí)性有關(guān)。劉新靜［16］2012-2014年在對(duì)從河北省幾個(gè)地區(qū)的養(yǎng)殖場(chǎng)分離出的142株雞沙門(mén)氏菌對(duì)15種藥物產(chǎn)生各種程度的耐藥，對(duì)磺胺異嗯唑耐藥率為81.69%，四環(huán)素則為40.41%。王德寧［17］將來(lái)自哈爾濱疑似沙門(mén)氏菌感染的雞場(chǎng)分離到的44株菌株，進(jìn)行了耐藥的分析試驗(yàn)，結(jié)果顯示，氨芐西林對(duì)沙門(mén)氏菌具有最高的耐藥率，達(dá)到95.5%。韋婷［18］于2012-2013年期間檢測(cè)了四川地區(qū)市場(chǎng)雞肉中沙門(mén)氏菌的含量，結(jié)果其平均檢出率為28.0%；并對(duì)其做了耐藥性分析，數(shù)據(jù)顯示對(duì)3種以上抗生素耐藥的菌株達(dá)72.13%，最耐藥的抗生素為萘啶酸。關(guān)茹飛等［19］對(duì)烏魯木齊周邊雞場(chǎng)的沙門(mén)氏菌進(jìn)行耐藥性檢測(cè)，檢測(cè)到的80株雞源沙門(mén)氏菌對(duì)環(huán)丙沙星和恩諾沙星的耐藥最為嚴(yán)峻。周榮云等［20］在揚(yáng)州地區(qū)采集病料分離得到的21株鼠傷寒沙門(mén)氏菌，藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明對(duì)鏈霉素耐藥占42.86%，對(duì)復(fù)方新諾明占47.62%，10株分離株出現(xiàn)了多重耐藥現(xiàn)象。建議臨床上合理選擇并應(yīng)用抗微生物類(lèi)藥物，采取聯(lián)合用藥或者輪換用藥；降低細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生與發(fā)展，迫切需要開(kāi)發(fā)抗感染中藥提取物以避免耐藥性產(chǎn)生和提高療效。沙門(mén)氏菌產(chǎn)生耐藥性是因?yàn)榧?xì)菌本身能改變抗微生物藥的作用靶位，阻礙了抗微生物藥被識(shí)別[21]，動(dòng)物機(jī)體對(duì)抗微生物藥的轉(zhuǎn)化利用率降低，治療效果不顯著，有些抗微生物藥甚至以原液直接通過(guò)糞便、尿液、唾液等方式排出體外，進(jìn)而破壞了生態(tài)系統(tǒng)的平衡[22-25]，世界衛(wèi)生組織將沙門(mén)氏菌列入嚴(yán)重危害的食品傳播性病原體，迫在眉睫解決這個(gè)問(wèn)題成為重中之重[26]。參考文獻(xiàn)【相關(guān)文獻(xiàn)】Issenhuth-JeanjeanS,RoggentinP,MikoleitM,GuibourdencheM,etal.Supplement2008-2010（no.48）totheWhite-Kauffmann-LeMinorscheme[J].ResMicrobiol,2014,165:526-530.JacksonBR,GriffinPM,ColeD,etal.Outbreak-associatedSalmonellaentericaserotypesandfoodcommodities,UnitedStates,1998-2008[J].EmergInfectDis,2013,19:1239-1244.劉艷紅，李穎，呂淑霞.沙門(mén)氏菌和大腸桿菌耐藥性的研究進(jìn)展[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2016，（10上）：88-90.陳東科，孫長(zhǎng)貴.臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)與圖譜[M].天津：天津科學(xué)技術(shù)出版社，2014.ParkSH,RickeSC.DevelopmentofmultiplexPCRassayforsimultaneousdetectionofSalmonellagenus,SalmonellasubspeciesI,Salm.Enteritidis,Salm.HeidelbergandSalm.Typhimurium[J].JournalofAppliedMicrobiology,2015,118（1）:152.呂邵娃，劉玉婕，孟永海，等.細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生機(jī)制與控制措施[J].哈爾濱商業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，27（2）：148-150.蔡皓東.解開(kāi)超級(jí)細(xì)菌之謎[J].決策與信息，2010（10）：72.DzivaF,MuhairwaAP,BisgaardM.DiagnosticandtypingoptionsforinvestigatingdiseasesassociatedwithPasteurellamultocida[J].VeterinaryMicrobiology,2008,128(1/2):1-22.張純萍，寧宜寶，宋立，等.北京地區(qū)健康肉雞攜帶沙門(mén)氏菌狀況調(diào)查[J].中國(guó)獸藥雜志，2012,46(10):9-12.劉新靜.河北省雞沙門(mén)氏菌的分離鑒定及耐藥性分析[D].泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2015.[11]沈海燕，郭慧霞，許學(xué)斌，等.上海市零售禽肉制品和活禽中沙門(mén)氏菌血清型與耐藥性研究[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2014,41(11):263-266.[12]徐桂云，樊世杰.家禽沙門(mén)氏菌感染現(xiàn)狀及不同國(guó)家的防治策略[J].中國(guó)家禽，2012,34(9):7-12.[13]吳科敏.南寧市售鮮肉中四種食源菌的監(jiān)測(cè)及沙門(mén)氏菌致病性和耐藥性的研究[D].桂林：廣西大學(xué),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