醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗：實驗二 細(xì)菌的人工培養(yǎng)與消毒滅菌

醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗ExperimentofMedicalMicrobiology實驗二細(xì)菌的人工培養(yǎng)與消毒滅菌Artificialcultureofbacteria,Disinfectionandsterilization【目的要求】1.了解細(xì)菌人工培養(yǎng)的方法和過程。2.熟悉常用的消毒滅菌方法、儀器設(shè)備、使用注意事項等。3.掌握細(xì)菌在各種培養(yǎng)基的生長現(xiàn)象,細(xì)菌菌落的概念,熟悉細(xì)菌菌落的特點。4.熟悉細(xì)菌生化反應(yīng)的原理和結(jié)果?！緦嶒瀮?nèi)容】一、錄像1．細(xì)菌的人工培養(yǎng)（P212）2．消毒滅菌二、細(xì)菌培養(yǎng)物觀察(示教)（P237）1．液體培養(yǎng)物觀察2．固體培養(yǎng)基觀察三、細(xì)菌的生化反應(yīng)(示教)（P248）二、細(xì)菌培養(yǎng)物觀察(示教)1．細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象（1）葡萄球菌——混濁生長（2）枯草桿菌——表面生長（3）乙型鏈球菌——沉淀生長混濁生長表面生長沉淀生長(右)注意：觀察時請不要搖動試管2.細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上的生長現(xiàn)象(1)在瓊脂斜面的生長現(xiàn)象菌苔菌落:單個細(xì)菌在瓊脂平板上生長繁殖后形成的細(xì)菌集群。特點：（1）肉眼可見；（2）遺傳背景相同（純細(xì)菌）；（3）不同細(xì)菌形成的菌落其形態(tài)不同（助于鑒別細(xì)菌）。（4）計數(shù)活的細(xì)菌（菌落形成單位，colonyformingunit,CFU/ml)（2）在瓊脂平板的生長現(xiàn)象Nature2008:454;595-599.Science2007:318(5850);652-655進(jìn)展:生物膜葡萄球菌、枯草桿菌、乙型溶血性鏈球菌菌落特征觀察：注意：不要打開平板菌落觀察：菌種大小形態(tài)表面邊緣透明度顏色溶血環(huán)(血平板)凹凸光滑或粗糙干濕葡萄球菌枯草桿菌溶血性鏈球菌菌落觀察結(jié)果記錄：葡萄球菌、枯草桿菌、乙型溶血性鏈球菌的菌落特征三、細(xì)菌的生化反應(yīng)(示教)1.單糖發(fā)酵試驗_+⊕產(chǎn)鹼桿菌葡萄球菌大腸桿菌

2.硫化氫試驗醋酸鉛培養(yǎng)基，接種針穿刺接種結(jié)果：變形桿菌+大腸桿菌-3.靛基質(zhì)試驗(吲哚試驗)加5~10滴靛基質(zhì)試劑（柯氏試劑)輕輕搖動后，靜置觀察。方法:

結(jié)果判斷：若培養(yǎng)基表面出現(xiàn)玫瑰紅色液體為陽性，記錄為（+）；如培養(yǎng)基表面呈黃色為陰性，記錄為（–）。結(jié)果：大腸桿菌+，產(chǎn)氣桿菌-【實驗報告內(nèi)容】記錄觀察結(jié)果：1.細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中