實(shí)驗(yàn)九-動物組織中DNA的提取與鑒定_第1頁
實(shí)驗(yàn)九-動物組織中DNA的提取與鑒定_第2頁
實(shí)驗(yàn)九-動物組織中DNA的提取與鑒定_第3頁
實(shí)驗(yàn)九-動物組織中DNA的提取與鑒定_第4頁
實(shí)驗(yàn)九-動物組織中DNA的提取與鑒定_第5頁
已閱讀5頁，還剩6頁未讀， 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

實(shí)驗(yàn)九動物組織中DNA的提取與鑒定

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆誅NA的提取方法。二、實(shí)驗(yàn)原理

DNA+RNAPrPr+DNPRNPDNP在1mol/LNaCl中溶解度最大

RNP在0.15mol/LNaCl中溶解度最大可分離DNP和RNP二苯胺

二苯胺法鑒定DNA酸解脫氧核糖

嘌呤ω-羥基-γ酮基戊醛

藍(lán)色的化合物SDSDNAPrDNP氯仿-異戊醇除去蛋白質(zhì)

95%的乙醇

沉淀幾個試劑的作用檸檬酸鹽、EDTA

防止DNA酶對DNA的降解（可螯合除去DNA酶活性所需的Mg2+，抑制DNA酶的活性）SDS氯仿-異戊醇除去變性蛋白質(zhì)使蛋白質(zhì)變性

三、操作

1、制備勻漿：

稱取新鮮動物肝臟5g，置于研缽中，剪碎，加2倍組織重的冷0.15mol/L

NaCl–0.015mol/L檸檬酸鈉溶液(10mL)，研磨成漿狀，得勻漿液。

（一）DNA的提取

2、抽提DNP粗制品

將勻漿液（除去組織碎片）轉(zhuǎn)移至離心管中，4000r/min離心10min，棄去上清夜，收集沉淀(內(nèi)含DNP)。向沉淀中加兩倍體積(10mL)的冷0.15mol/L

NaCl–0.015

mol/L檸檬酸鈉溶液，攪勻，如前離心，重復(fù)洗滌2~3次。所得沉淀為DNP粗制品，移至燒杯中。

3、DNA與蛋白質(zhì)分離

向沉淀中加入冷0.15

mol/LNaCl-0.1

mol/L

EDTA-Na2溶液，使總體積達(dá)到8mL，在緩慢攪拌的同時滴加5%SDS溶液2mL，使SDS最終濃度達(dá)1%，邊加邊攪拌，使DNA與蛋白質(zhì)分離。再加入5mol/LNaCl溶液2.5mL，使Na

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論