第二章 微生物的純化和顯微鏡(14級期末總結(jié)用)

第二章

微生物的純培養(yǎng)和顯微技術(shù)MicrobialPureCultureTechniquesandMicroscopy在研究中所使用的微生物培養(yǎng)群體：培養(yǎng)物(culture)：在一定的條件下培養(yǎng)、繁殖得到的微生物群體。混合培養(yǎng)物(mixedculture)：含有多種微生物的培養(yǎng)物。純培養(yǎng)物(pureculture)：只有一種微生物的培養(yǎng)物。通常情況下只有純培養(yǎng)物才能提供可以重復(fù)的結(jié)果純培養(yǎng)技術(shù)是進(jìn)行微生物學(xué)研究的基礎(chǔ)！純培養(yǎng)技術(shù)—把特定的（目標(biāo)）微生物從自然混雜存在的狀態(tài)中分離、純化出來，以便被研究和利用。顯微技術(shù)—包括顯微鏡的正確使用、顯微標(biāo)本的制作、觀察、測定、分析及記錄等內(nèi)容。Outline第一節(jié)微生物的分離和純培養(yǎng)一、無菌技術(shù)五、選擇培養(yǎng)分離二、用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)六、二元培養(yǎng)物三、用液體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)七、微生物的保藏四、單細(xì)胞（單孢子）分離第二節(jié)顯微鏡和顯微技術(shù)一、顯微鏡的種類及原理二、顯微觀察樣本的制備第一節(jié)微生物的分離和純培養(yǎng)

從混雜的群體中分離特定的某一種微生物，是研究和利用微生物的第一步。一、無菌技術(shù)(aseptictechnique,steriletechnique)

用于分離、培養(yǎng)微生物的器具事先不含任何微生物；在轉(zhuǎn)接、培養(yǎng)微生物時(shí)防止其它微生物的污染；培養(yǎng)微生物本身不污染操作環(huán)境。無菌技術(shù)：在分離、轉(zhuǎn)接及培養(yǎng)純培養(yǎng)物時(shí)防止其被其他微生物污染，其自身也不污染操作環(huán)境的技術(shù)。1.微生物培養(yǎng)的常用器具及其滅菌常用器具：

試管（testtube）三角燒瓶（flask）培養(yǎng)皿（平皿）（Petridish）

滅菌：滅菌（sterilization）—完全去除或殺死器物表面和內(nèi)部的一切微生物。消毒（disinfection）—消滅或減少病原微生物，而不是消滅所有的微生物。滅菌方法

◆熱力滅菌（Heatsterilization）

——干熱滅菌（Dryheat）

——濕熱滅菌（Moistheat）

◆過濾滅菌（Filtration）

◆化學(xué)滅菌(Chemicalagents)

◆輻射滅菌（Radiation）1.微生物培養(yǎng)的常用器具及其滅菌培養(yǎng)基(culturemedium):

培養(yǎng)微生物的營養(yǎng)物質(zhì)。固體培養(yǎng)基：是用瓊脂或其他凝膠物質(zhì)固化的培養(yǎng)基。最常用的分離、培養(yǎng)微生物的固體培養(yǎng)基是瓊脂固體培養(yǎng)基平板。由Koch建立，已有100年的歷史。培養(yǎng)平板（cultureplate,

簡稱平板）：盛有固體培養(yǎng)基的平皿。培養(yǎng)斜面（cultureslant,簡稱斜面)：倒入試管并擺放成斜面得固體培養(yǎng)基，當(dāng)培養(yǎng)基凝固后通常稱作“斜面”。二、用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)（平板分離法）菌落（colony）：

單個(gè)（或聚集在一起的一團(tuán)）微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞生長群體。當(dāng)固體培養(yǎng)基表面眾多菌落連成一片菌苔（lawn）二、用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)固體培養(yǎng)基分離法（見教材圖2-4、2-5、2-6）

固體分離法(shaketubemethod)二、用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)稀釋倒平板法涂布平板法平板劃線法稀釋搖管法固體培養(yǎng)基分離液體培養(yǎng)基分離單細(xì)胞（孢子）分離獲得微生物純培養(yǎng)的方法稀釋法顯微操作富集培養(yǎng)：造成有利于某種菌生長的環(huán)境選擇培養(yǎng)分離用選擇平板直接分離：抑制使大多數(shù)微生物不能生長，或具區(qū)別特征的直觀結(jié)果七、菌種保藏性狀穩(wěn)定的菌種是微生物學(xué)工作最重要的基本要求，否則生產(chǎn)或科研都無法正常進(jìn)行。影響微生物菌種穩(wěn)定性的因素：a）變異b）污染c）死亡（一）菌種的衰退與復(fù)壯1）從衰退的菌種群體中把少數(shù)個(gè)體再找出來，重新獲得具有原有典型性狀的菌種。2）有意識地利用微生物會發(fā)生自發(fā)突變的特性，在日常的菌種維護(hù)工作中不斷篩選“正變”個(gè)體。菌種