第1章 藥物毒理學基礎(chǔ)2

藥物毒理學基礎(chǔ)第2節(jié)藥物毒性作用及其機制藥物可對機體的結(jié)構(gòu)及功能產(chǎn)生毒性作用其機制的研究具有重要意義預測毒性強弱設計低毒藥物建立拮毒措施藥物毒性作用強度與終毒物(ultimatetoxicant)有作用部位的濃度及作用時間有關(guān)終毒物:與機體靶分子發(fā)生作用并影響其結(jié)構(gòu)功能變化的化學物質(zhì),包括原形藥,代謝物一．從給藥部位到靶組織藥物到達與靶作用細胞功能紊亂,損傷修復紊亂毒性作用ABC1234步驟途徑第一期:潛在期一、從給藥部位到靶組織終毒物：與內(nèi)源性靶分子起作用，并導致結(jié)構(gòu)或功能改變的毒性作用化學物質(zhì)；原型藥物，藥物代謝產(chǎn)物或藥物在生物轉(zhuǎn)化中產(chǎn)生的活性氧。二．終毒物與靶分子的反應二．終毒物與靶分子的反應反應類型1非共價結(jié)合2共價結(jié)合3去氫反應4電子轉(zhuǎn)移5酶反應靶分子屬性1反應性2易感性3關(guān)鍵功能結(jié)果功能紊亂結(jié)構(gòu)破壞終毒物靶分子第二期:繼發(fā)階段(一)毒性反應的類型1非共價結(jié)合:由于非極性相互作用,結(jié)果可逆2共價結(jié)合:具有非離子和陽離子的藥物可與機體大分子形成共價鍵,結(jié)果不可逆3去氫反應4電子轉(zhuǎn)移5酶反應1、非共價鍵結(jié)合·氫鍵和離子鍵形成·終毒物和膜受體、細胞內(nèi)受體、離子通道和某些酶相互作用·士的寧與甘氨酸（抑制性）受體結(jié)合(阻斷），佛波酯與蛋白激酶C結(jié)合·因為鍵能相對低，通常是可逆的(一)毒性反應的類型

2、共價鍵結(jié)合：·從根本上改變生物大分子；·具有不可逆性；3、氫的吸引：4R-SHR-S-S-R血紅蛋白Fe2+血紅蛋白Fe3+5、酶反應：蛇毒：含有損毀生物分子的水解酶(一)毒性反應的類型

·靶分子通常是大分子：核酸和蛋白質(zhì)；也可以是小分子：膜脂質(zhì)；一般不是高能化合物：ATP和輔酶A靶分子是：酶：甲硫咪唑與甲狀腺過氧化物酶受體：嗎啡與阿片受體離子通道：河豚毒素與鈉離子通道DNA:黃曲霉素與DNA。（二）靶分子屬性

特征反應性易感性關(guān)鍵功能靶與毒性是否有關(guān)能與靶結(jié)合并影響其功能在靶位達一定濃度在機制上與所發(fā)生的毒性與靶點變化有關(guān)(二)靶細胞屬性1、靶分子功能障礙嗎啡阿片受體激活佛波酯蛋白激酶C激活阿托品膽堿能M受體阻斷筒劍毒膽堿能N受體阻斷士的寧甘氨酸受體阻斷河豚毒素鈉離子通道阻斷長春堿微管蛋白防礙聚合松胞菌素肌動蛋白解聚（三）靶分子的毒物效應

2、靶分子結(jié)構(gòu)破壞：?與DNA分子形成加成物

黃曲霉素與DNA:造成復制時核苷酸錯配。阿霉素與DNA：嵌入DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)。?通過交叉聯(lián)結(jié)等使靶分子結(jié)構(gòu)破壞：氮芥

3、新抗原形成?氟烷：肝炎樣綜合征；?藥物蛋白加成物

藥源性狼瘡藥源性粒細胞缺乏三．細胞功能失調(diào)導致的毒性靶分子的作用細胞調(diào)節(jié)細胞維持基因表達失調(diào)細胞活動失調(diào)內(nèi)部維持損傷外部維持損傷不適當?shù)募毎至?腫瘤,致畸凋亡:組織退化,致畸蛋白合成:過氧化物酶增加不適當?shù)纳窠?jīng)系統(tǒng):驚厥,感覺異常心血管系統(tǒng):心律失常呼吸系統(tǒng):喘氣損傷ATP合成Ca++調(diào)節(jié)膜功能出血出血血栓(一)毒性源細胞調(diào)節(jié)紊亂

1基因表達失調(diào)轉(zhuǎn)錄失調(diào)信號轉(zhuǎn)導失調(diào)信號產(chǎn)生失調(diào)2細胞活動失調(diào)電興奮細胞失調(diào)其它細胞活動失調(diào)1、基因表達失調(diào)：（1）轉(zhuǎn)錄失調(diào)：轉(zhuǎn)錄:DNA→mRNA轉(zhuǎn)錄因子外源藥物/毒物配基活化在極量或發(fā)育的關(guān)鍵時期引起配基活化轉(zhuǎn)錄因子介導的毒性。（一）毒物源性細胞調(diào)節(jié)紊亂（2）信號轉(zhuǎn)導失調(diào)：干擾細胞內(nèi)信號傳導系統(tǒng)例：藥物毒性作用引起的凋亡烷化劑引起胸腺細胞凋亡肝毒物引起肝細胞凋亡

垂體：促甲狀腺激素TSH下丘腦：促甲狀腺激素釋放激素TRH甲狀腺：甲狀腺激素負反饋負反饋氨基連三唑、乙烯硫脲、苯巴比妥降低刺激刺激甲狀腺腫、甲狀腺腫瘤刺激負反饋負反饋（3）信號產(chǎn)生失調(diào)2、細胞活動失調(diào)：藥物在中毒劑量時，能通過干擾信號傳導的任何步驟影響細胞活動。1）電興奮細胞活動失調(diào)神經(jīng)細胞、骨骼肌、心肌、平滑?、偕窠?jīng)遞質(zhì)水平改變

酰肼：降低GABA合成→引起驚厥利血平：去甲腎上腺素、5-羥色胺和多巴胺遞質(zhì)耗竭有機磷：乙酰膽堿酶抑制→乙酰膽堿堆積→激活膽堿受體?可卡因和三環(huán)類抗抑郁藥的外周毒性嚴重的粘膜潰瘍和心肌梗死抑制去甲腎上腺素攝取血管a受體過度興奮?苯丙胺的毒性反應心肌梗死抑制去甲腎上腺素攝取、增強去甲腎上腺素釋放血管a受體過度興奮②藥物-神經(jīng)遞質(zhì)受體相互作用GABA受體激動巴比妥類鎮(zhèn)靜、麻醉、中樞抑制③藥物-信號傳導相互作用電壓門控Na通道利多卡因/普魯卡因局部麻醉抑制心動過緩④藥物-信號終端相互作用鈉-鉀ATP酶洋地黃細胞內(nèi)鈉離子鈉-鈣共轉(zhuǎn)運體介導細胞內(nèi)鈣離子2）非電興奮細胞活動失調(diào)：腺體細胞外分泌細胞：?有機磷農(nóng)藥中毒→M受體→流淚、多汗、支氣管分泌增加。?阿托品：阻斷上述癥狀，出現(xiàn)相反作用，如高溫。內(nèi)分泌細胞：b胰島細胞磺酰脲類b胰島細胞膜鉀離子通道二氮嗪抑制激活細胞膜去極化/超極化鈣離子通道激活/激活受阻胰島素分泌/低血糖胰島素分泌減少+—由磺胺類藥物的低血糖副作用研發(fā)?藥物的副作用；?胰島素瘤的治療1、細胞內(nèi)維持改變-毒性細胞死亡機制（1）ATP合成改變氟乙酸鹽：氰化物：（2）細胞內(nèi)鈣持續(xù)上升鈣超載是許多組織器官的病變基礎(chǔ)，如心肌細胞鈣超載是調(diào)亡的前提。（二）細胞維持的毒性表現(xiàn)

2、細胞外維持改變藥物可以干預提供其他細胞、組織和整個器官支持的細胞。

肝毒性藥對肝臟本身和機體的損害作用。四．修復或錯誤修復四．修復或錯誤修復?分子層面：蛋白、脂質(zhì)、DNA?細胞組織層面：調(diào)亡和增生毒性發(fā)展的第四步：不適當?shù)男迯停ㄒ唬┓肿有迯?蛋白修復：蛋白二硫鍵化合物可以被還原逆轉(zhuǎn)；?脂質(zhì)修復：磷脂酶A2水解過氧化脂肪酸為脂正常酸肪

?DNA修復：（1）直接修復（2）切除修復（3）重組修復。不多見,外周神經(jīng)損傷的一種方式外周神經(jīng)損傷,巨噬細胞吞噬碎片,激活雪旺氏細胞增生,分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子(二)細胞修復（二）、細胞修復細胞不能修復：成熟神經(jīng)元和中樞神經(jīng)軸突能修復：外周神經(jīng)軸突和其他細胞修復：巨噬細胞清除死亡細胞；余下的活細胞分裂取代丟失細胞。（三）、組織修復1、凋亡：損害細胞的主動清除。2、增生：組織的再生（1）有絲分裂補充缺失的細胞；（2）細胞外成型片的取代。蛋白質(zhì)、粘多糖、糖蛋白和蛋白多糖

3、組織損傷的副作用：3、組織損傷的副作用：（1）炎癥：微循環(huán)改變和炎癥細胞聚集是炎癥的標志。炎癥時的活性化學物質(zhì)和溶酶體酶，都是炎癥細胞的毀壞性產(chǎn)物。但同時損傷鄰近的健康組織。（2）改變蛋白合成：急性期蛋白（3）無顯著特點的反應：發(fā)熱、嗜睡、休克樣狀態(tài)、可的松釋放。（四）、修復不全導致的毒性分子修復機制無效；分子損傷不可逆細胞損傷細胞壞死細胞凋亡細胞增殖細胞外基質(zhì)增殖損傷終止纖維化修復不全的嚴重結(jié)果有組織壞死、纖維化和化學致癌。1、組織壞死2、纖維癥是一種以異常組分在細胞外過度沉積為特征的病理狀態(tài)。修復不全是纖維癥的主要因素。細胞損傷激發(fā)大量細胞增生和細胞外基質(zhì)生成。細胞外基質(zhì)生成如果沒有終止，就發(fā)展為纖維癥。藥物纖維癥肝纖維癥/肝硬變：長期飲酒和肝毒物；?肺纖維癥：博萊霉素、胺碘酮；?心臟纖維癥：阿霉素；?多臟器纖維癥：離子化射線；加成形成氧化修飾螺旋斷裂毒物DNA損害有無嚴重后果無明顯后果3、致癌（1）DNA修復失敗DNA修復失敗可遺傳的改變，即突變蛋白表達及功能改變有無增殖周期G0期→G1期→S期→G2期→M期3、致癌（2）調(diào)亡失?。喊┣凹毎虼嬖谕蛔兊募毎日＜毎哂懈叩恼{(diào)亡活性。調(diào)亡DNA修復失敗P53蛋白增加失敗腫瘤非遺傳毒性致癌物細胞存活細胞死亡腫瘤細胞轉(zhuǎn)化腫瘤DNA自然損傷DNA復制突變致癌蛋白活化抑癌蛋白失活腫瘤細胞克隆增殖修復修復靜默遺傳毒性致癌物細胞存活細胞死亡腫瘤細胞轉(zhuǎn)化腫瘤DNA損傷DNA復制突變致癌蛋白活化抑癌蛋白失活細胞克隆增殖修復修復靜默第3節(jié)新藥的注冊（一）新藥的定義新藥未曾在中國境內(nèi)上市銷售的藥品（藥品管理法實施條例）已上市藥品改變劑型、改變給藥途徑的，按照新藥管理（藥品注冊管理辦法）新藥管理范疇國內(nèi)外均未曾上市的創(chuàng)新藥(NCEs、首次作為藥用的物質(zhì))；國外已上市但未曾在我國境內(nèi)上市的藥品(即仿制藥品)；新復方制劑和已上市藥品改變劑型的、改變給藥途徑者一、新藥定義和注冊分類（二）新藥的分類1.新藥分類的定義新藥管理的品種范疇差別很大，創(chuàng)新藥和已上市藥品改變劑型相比，差別很大。若都按照同一模式進行研究和審批，顯然不合適.為保證新藥質(zhì)量，同時提高新藥研制的投入和產(chǎn)出的效率，我國采用對新藥進行分類審批管理的辦法。分類審批管理。即先對新藥進行分類（三大類），再對各類新藥申請注冊所提交資料分門別類作出規(guī)定中藥、天然藥物注冊：10類化學藥品注冊：6類，屬新藥范圍5類生物制品注冊：15類，屬新生物制品14類2.中藥、天然藥物注冊分類(1)未在國內(nèi)上市銷售的從中藥、天然藥物中提取的有效成分及其制劑(2)未在國內(nèi)上市銷售的來源于植物、動物、礦物等藥用植物制成的制劑(3)中藥材的代用品(4)未在國內(nèi)上市銷售的中藥材新的藥用部位制成的制劑(5)未在國內(nèi)上市銷售的從中藥、天然藥物中提取的有效部位制成的制劑(6)未在國內(nèi)上市銷售的由中藥、天然藥物制成的復方制劑(7)未在國內(nèi)上市銷售的由中藥、天然藥物制成的注射劑(8)改變國內(nèi)已上市銷售藥品給藥途徑的制劑(9)改變國內(nèi)已上市銷售藥品劑型的制劑(10)改變國內(nèi)已上市銷售藥品工藝的制劑3.新化學藥品注冊分類(1)未在國內(nèi)上市銷售的藥品①通過合成或者半合成的方法制得的原料藥及其制劑②天然物質(zhì)中提取或者通過發(fā)酵提取的新的有效單體及其制劑③用拆分或者合成等方法制得的已知藥物中的光學異構(gòu)體及其制劑④由已上市銷售的多組分藥物制備為較少組分的藥物⑤新的復方制劑(2)改變給藥途徑且尚未在國內(nèi)外上市銷售的藥品(3)已在國外上市銷售但尚未在國內(nèi)上市銷售的藥品①已在國外上市銷售的原料藥及其制劑②已在國外上市銷售的復方制劑③改變給藥途徑并已在國外上市銷售的制劑(4)改變已上市銷售鹽類藥物的酸根、堿基(或者金屬元素)，但不改變其藥理作用的原料藥及其制劑(5)改變國內(nèi)已上市銷售藥品的劑型，但不改變給藥途徑的制劑4.治療用新生物制品注冊分類(1)未在國內(nèi)上市銷售的生物制品(2)單克隆抗體(3)基因治療、體細胞治療及其制品(4)變態(tài)反應原制品(5)由人的、動物的組織或者體液提取的，或者通過發(fā)酵制備的具有生物活性的多組分制品(6)由已上市銷售的生物制品組成新的復方制品(7)已在國外上市銷售但尚未在國內(nèi)上市銷售的生物制品(8)含未經(jīng)批準菌種制備的微生態(tài)制品(9)與已上市銷售制品結(jié)構(gòu)不完全相同且國內(nèi)外均未上市銷售的制品(包括氨基酸位點突變、缺失，因表達系統(tǒng)不同而產(chǎn)生、消除或者改變翻譯后修飾，對產(chǎn)物進行化學修飾等)(10)與已上市銷售制品制備方法不同的制品(如采用不同表達系統(tǒng)、宿主細胞等)(11)首次采用DNA重組技術(shù)制備的制品(如以重組技術(shù)替代合成技術(shù)、生物組織提取或者發(fā)酵技術(shù)等)(12)國內(nèi)外尚未上市銷售的由非注射途徑改為注射途徑給藥，或者由局部用藥改為全身給藥的制品(13)改變已上市銷售制品的劑型但不改變給藥途徑的生物制品(14)改變給藥途徑的生物制品(不包括第12項)（一）臨床前研究內(nèi)容1．文獻研究：藥品名稱和命名依據(jù)，立題目的與依據(jù)2．藥學研究：原料藥工藝研究，制劑