布氏桿菌病精

布魯氏桿菌病的研究進展布魯氏桿菌?。˙rucellosis），又稱馬爾他熱或波狀熱，由布魯氏桿菌（Brucella）感染引發(fā)的一種人畜共患的自然疫源性傳染病。本病經(jīng)常引發(fā)動物流產(chǎn)，不孕等癥狀，故又稱之為傳染性流產(chǎn)病。本病流行廣泛，幾乎遍及世界各地。在我國多見于內(nèi)蒙古、東北、西北等牧區(qū)。本病不同程度的流行，給畜牧業(yè)和人類健康帶來了嚴重的危害。世界動物衛(wèi)生組織將布病收錄為多個動物共患疫病名錄中，我國農(nóng)業(yè)部將其列為二類疫病。本文從布氏桿菌病病原學(xué)、流行病學(xué)、發(fā)病機理、臨床癥狀、病理變化、診療、防止和治療等幾個方面對其研究進展進行綜述。1病原學(xué)布氏桿菌屬為短小革蘭氏陰性菌，兼性需氧，有莢膜，無鞭毛不能運動，不產(chǎn)生芽孢。根據(jù)宿主嗜性、病原性和生物學(xué)特性的不同可將其分為10個種：其中6個典型種，分別為馬爾他布氏桿菌（B.melitensis）、流產(chǎn)布氏桿菌（B.abortus）、豬布氏桿菌（B.suis）、犬布氏桿菌（B.canis）、沙林鼠布氏桿菌（B.Neotomae）、綿羊布氏桿菌（B.Ovis）；另外4個種是近幾年新分離到的，如從海洋動物中分離的鯨型布魯氏菌（B.ceti）和鰭型布魯氏菌（B.pinnipedialis）[1]；B.microti從田鼠中分離[2]，有報道稱從狐貍和土壤里也可分離到[2,3]；而B.inopinata則從人體內(nèi)分離[4]。近來，有報道稱從牛蛙體內(nèi)分離到了一種新的布魯氏桿菌，該種菌很有可能是一種新的種[5]。習(xí)慣上稱馬耳他布魯氏菌為羊布魯氏菌,流產(chǎn)布魯氏菌為牛布魯氏菌。各在世界范疇內(nèi),引發(fā)感染的布氏桿菌種屬重要是B.melitensis（綿羊和山羊）、Brucellaabortus（牛和水牛）和B.suis（豬）。該菌在自然界中抵抗力較強，在干燥土壤中可存活37ｄ，在陰處胎兒體中可活6個月，在病畜的臟器和分泌物中，普通能存活4個月左右，在食品中約能生存2個月，對低溫的抵抗力也強，低溫下可存活1個月左右。但是對熱和消毒劑抵抗力弱，巴氏滅菌10～15min死亡，高壓消毒瞬間即亡,0.1%升汞數(shù)分鐘、1%來蘇兒或2%福爾馬林或5%石灰乳15min死亡，日光直射需05～4h能殺死。2流行病學(xué)及流行狀況2.1傳染源普通是病畜及帶菌動物。受感染母畜流產(chǎn)的胎兒、羊水和胎衣，及陰道分泌物最含有傳染性。另首先乳腺組織、淋巴結(jié)、關(guān)節(jié)、睪丸、精液等也適宜布魯氏桿菌生長，有一定的傳染性。布魯氏菌重要是通過消化道、乳汁、生殖道和皮膚、粘膜、眼結(jié)膜、叮咬過病畜的吸血昆蟲等。2.2傳輸途徑傳輸途徑重要是通過消化道感染，即通過攝取被病原體污染的飼料與飲水而感染，另首先是接觸和吸人病原菌而感染?？赏ㄟ^皮膚感染，特別是皮膚有創(chuàng)傷更易感染，某些喂養(yǎng)者即由此被傳染。另外，通過黏膜、吸血昆蟲也能夠傳輸此病[6]。2.3易感動物現(xiàn)在已知有60多個馴養(yǎng)動物、野生動物是布魯氏菌的宿主。其中羊種布魯氏菌對綿羊、山羊、牛、鹿和人的致病性較強；牛種布魯氏菌對牛、水牛、牦牛以及馬和人的致病性較強；豬種布魯氏菌對豬、野兔、人等的致病性較強。幼齡動物雖可帶菌但不發(fā)病，老齡動物易感性相對較低，成年動物特別是處在妊娠期的動物易感性最高，其中初產(chǎn)動物最易感。2.4流行特點但凡與病畜、染菌畜產(chǎn)品接觸多者發(fā)病率高，多發(fā)于產(chǎn)仔季節(jié)。與否發(fā)病與性別無關(guān)，沒有差別，重要取決于接觸機會。青壯年感染率要高于其它年紀組，一年四季各月都有發(fā)病，北方羊群布病流產(chǎn)高峰在2-4月，人間疫情發(fā)生在4-5月，牧區(qū)感染率要明顯高于農(nóng)區(qū)。2.5人類布魯氏菌病的流行病學(xué)已知4種布魯氏菌對人類有致病性(重要有波狀熱布魯氏菌、流產(chǎn)布魯氏菌和豬霍亂布魯氏菌，但偶然也有犬布魯氏菌)。這些種類當中，波狀熱布魯氏菌被認為是能引發(fā)人類最嚴重疾病的一種，豬霍亂布魯氏菌、流產(chǎn)布魯氏菌和犬布魯氏菌隨著次序致病嚴重程度依次削弱。即使報告的病例數(shù)量被很大程度上低估，但人類的布魯氏菌病每年都能在全世界范疇發(fā)現(xiàn)。即使人類布魯氏菌病幾乎沒有致死性，但它能使人嚴重的衰弱或致殘[7]。3發(fā)病機理布魯氏菌為胞內(nèi)寄生菌,病菌重要感染途徑是消化道，有時也通過眼結(jié)膜、生殖道和皮膚感染。進入體內(nèi)的病原菌隨淋巴液達成淋巴結(jié),被吞噬細胞吞噬。如吞噬細胞未能將菌殺滅,則細菌在胞內(nèi)生長繁殖,形成局部原發(fā)病灶,此過程稱為淋巴源性遷徙階段,相稱于潛伏期。細菌在吞噬細胞內(nèi)大量繁殖造成吞噬細胞破裂,隨之大量細菌進人淋巴液和血液循環(huán)系統(tǒng)形成菌血癥(此時患畜體溫升高),在血液里細菌又被血流中的吞噬細胞吞噬,并隨血流帶至全身,在肝、脾、淋巴結(jié)、骨髓等處的單核一吞噬細胞系內(nèi)繁殖,形成多發(fā)性病灶。當病灶內(nèi)釋放出來的細菌,超出了吞噬細胞的吞噬能力時則細菌在血液循環(huán)系統(tǒng)中生長、繁殖,臨床體現(xiàn)為敗血癥。在機體內(nèi)多個因素的作用下,部分細菌被破壞死亡,釋放出內(nèi)毒素及其它成分,臨床上出現(xiàn)菌血癥、敗血癥或毒血癥的體現(xiàn)。如機體免疫功效正常,通過細胞免疫及體液免疫可去除病菌而獲痊愈。如免疫功效低下,或感染菌數(shù)量大、毒力強,則部分細菌逃脫免疫,又可被吞噬細胞吞噬帶入各組織器官形成新的感染灶,此過程為多發(fā)性病灶階段。通過一段時間后,感染灶內(nèi)細菌生長繁殖再次入血,造成疾病復(fù)發(fā)并造成廣泛性的組織病理損傷,如此重復(fù)，便成為慢性感染[8]。布氏桿菌對妊娠的子宮內(nèi)膜、胎盤和胎兒有特殊的親和性。流產(chǎn)布氏桿菌可在妊娠子宮的胎盤滋養(yǎng)層上皮細胞大量繁殖，引發(fā)胎盤炎，使胎兒胎盤與母體胎盤松離，造成母畜流產(chǎn)?？乖ㄎ伙@示，流產(chǎn)布氏桿菌抗原存在于胎兒肺臟巨噬細胞、肝臟枯細胞、肝細胞、膽管上皮細胞、脾臟網(wǎng)狀細胞以及胎兒其它組織的巨噬細胞內(nèi)，并引發(fā)胎兒的肺炎和其它組織器官的單核－巨噬細胞與淋巴細胞增生為特性的慢性炎癥過程[9]。4臨床癥狀1、牛感染布病的臨床癥狀潛伏期2周至6個月，母牛最明顯的臨診癥狀是流產(chǎn)，最常見于妊娠第6-8個月，母牛若再次流產(chǎn)，普通比第一次流產(chǎn)時間要遲。流產(chǎn)前數(shù)日除體現(xiàn)分娩預(yù)兆，如陰唇，乳房腫大，薦部與脅部下陷，乳汁呈初乳性質(zhì)等外，尚有生殖道的發(fā)炎臨診癥狀，即陰道黏膜發(fā)生栗粒大紅色結(jié)節(jié)，由陰道流出灰白色或灰色黏性分泌液。流產(chǎn)時，胎水多清朗，但有時渾濁尚有膿性絮片。常見胎衣滯留，特別是妊娠晚期流產(chǎn)者。流產(chǎn)后常繼續(xù)排出污灰色或棕紅色分泌液，有時有惡臭，1-2周后消失。早期流產(chǎn)的胎兒，普通在產(chǎn)前已經(jīng)死亡；發(fā)育比較完全的胎兒，產(chǎn)出時可能存活但衰弱，很快很可能死亡。公牛有時可見陰莖潮紅腫脹，更常見的是睪丸炎和附睪炎，急性病例則睪丸腫脹疼痛，還可能有中度發(fā)熱與食欲不振，此后疼痛逐步減退。約3周后，普通睪丸和附睪腫大，觸之堅硬。臨診上還常見關(guān)節(jié)炎，甚至能夠見于未曾流產(chǎn)的牛只，關(guān)節(jié)腫脹疼痛，有時持續(xù)躺臥，最常見于膝關(guān)節(jié)和腕關(guān)節(jié)患病。腱鞘炎比較少見，滑液囊炎特別是膝滑液囊炎則較常見。有時有乳房炎的輕微臨診癥狀。如流產(chǎn)胎衣不滯留，則病?？焖倏祻?fù)，又能受孕，但可能再度流產(chǎn)；如胎衣未能及時排出，則可能發(fā)生慢性子宮炎，引發(fā)長久不育。在新感染的牛群中，大多數(shù)母牛都將流產(chǎn)一次。如在牛群中不停加入新牛，則疫情可能長久持續(xù)，如果牛群不更新，流產(chǎn)過1-2次的母牛能夠正產(chǎn)，疫情似是靜止，在加以喂養(yǎng)管理得以改善，病牛也可能有半數(shù)自愈。但這種牛群絕非健康牛群，一旦新易感牛只增多，還可引發(fā)大批流產(chǎn)。2、綿羊及山羊感染布病的臨床癥狀常不體現(xiàn)臨診癥狀，而首先被注意到的臨診癥狀也是流產(chǎn)。發(fā)生在妊娠后第3個或4個月，流產(chǎn)前，食欲減退，口渴，委頓，陰道流出黃色黏液等。有的山羊流產(chǎn)2-3次，有的則不發(fā)生，但有報道山羊群中流產(chǎn)占40%-90%。其它臨診癥狀可能尚有乳房炎，支氣管炎以及關(guān)節(jié)炎，滑液囊炎引發(fā)的跛行。公羊睪丸炎，乳山羊的乳房炎常較早出現(xiàn)，乳汁有結(jié)塊，乳量可能減少，乳腺組織有結(jié)節(jié)性變硬。綿羊布魯菌可引發(fā)綿羊附睪炎。3、豬感染布病的臨床癥狀最明顯的臨診癥狀也是流產(chǎn)，多發(fā)生在妊娠第4-12周，有的在妊娠第2-3周，有的靠近妊娠期滿即早產(chǎn)，早期流產(chǎn)因母豬常將胎兒連同胎衣吃掉而不易發(fā)現(xiàn)，但流產(chǎn)的前兆臨診癥狀常體現(xiàn)沉郁，陰唇和乳房腫脹，有時陰道流出黏性或黏膿性分泌液，流產(chǎn)后胎衣滯留狀況少見，子宮分泌液普通在8d內(nèi)消失，少數(shù)狀況因胎衣滯留，引發(fā)子宮炎和不育。公豬常見睪丸炎和附睪炎，有時開始體現(xiàn)全身發(fā)熱，局部疼痛，不肯配種。皮下膿腫，關(guān)節(jié)炎，腱鞘炎等較少見，如錐骨中有病理變化時，還可能發(fā)生后肢麻痹。4、馬感染布病的臨床癥狀患馬多為隱性。也有一定數(shù)量的患馬有明顯的化膿損害，特別是在頭部和頸部，骨膿腫、關(guān)節(jié)炎及腱鞘滑膜炎則少見。前期臨診癥狀常有發(fā)熱、委頓和發(fā)炎部位疼痛，可持續(xù)數(shù)日以至數(shù)月，其膿腫可被吸取，但經(jīng)?？梢娖茲?，尚有纖維凝塊的黃色黏性滲出液；晚期病例則形成瘺管。也可引發(fā)母馬流產(chǎn)，有報道從馬和驢流產(chǎn)的胎兒中分離出流產(chǎn)布魯菌。5、駱駝感染布病的臨床癥狀雙峰駝患病可不出現(xiàn)臨診癥狀，但有散發(fā)性流產(chǎn)，單峰駝的布魯菌病也曾有報道。6、犬感染布病的臨床癥狀犬感染流產(chǎn)布魯菌、馬耳他布魯菌、豬布魯菌的并不少見，但多為隱性感染，少數(shù)體現(xiàn)發(fā)熱性全身臨診癥狀，個別尚有流產(chǎn)以及睪丸炎和附睪炎。由犬布魯菌引發(fā)的臨診癥狀為：妊娠40-45d發(fā)生流產(chǎn)，流產(chǎn)后陰道長久排出分泌液，淋巴結(jié)腫大，長久菌血癥；公犬可能正常，也可能有附睪炎、前列腺炎、睪丸萎縮以及淋巴結(jié)病理變化和菌血癥，也可能造成不育。7、鹿感染布病的臨床癥狀豬布魯菌、牛布魯菌、羊布魯菌均可引發(fā)鹿的布魯菌病。重要臨診癥狀為孕鹿流產(chǎn)，胎衣滯留，公鹿發(fā)生睪丸炎和附睪炎，尚有關(guān)節(jié)炎，黏液囊炎，淋巴結(jié)和乳腺腫大等臨診癥狀。8、貂感染布病的臨床癥狀普通無顯性臨診癥狀，但在產(chǎn)仔期?？諔?。孕貂常發(fā)生流產(chǎn)或死胎，新生仔貂生后衰弱，病死率較高。9、狐感染布病的臨床癥狀多呈隱性感染，母狐重要臨診癥狀是流產(chǎn)、死胎和產(chǎn)后不孕，患狐食欲減退，有的病例出現(xiàn)化膿性結(jié)膜炎。10、禽感染布病的臨床癥狀雞、鴨等家禽普通體現(xiàn)腹瀉和虛脫，有時產(chǎn)卵量下降，間或有麻痹等臨診癥狀。5病理變化1、牛感染布病的病理變化胎衣呈黃色膠凍樣浸潤，有些部位覆有纖維蛋白絮片和膿液，有的增厚，有出血點，絨毛葉部分或全部貧血呈蒼黃色，或覆有灰色或黃綠色纖維蛋白或膿液絮片或覆有脂肪狀滲出物。胎兒胃特別是真胃中有淡黃色或白色黏液絮狀物，腸胃和膀胱的漿膜下可能見有點狀或線狀出血。漿膜腔有微紅色液體，腔壁上可能覆有纖維蛋白凝塊。皮下呈出血性漿液性浸潤，淋巴結(jié)，脾臟和肝臟有不同程度腫脹，有的散在炎性壞死灶。臍帶常呈漿液性浸潤、肥厚。胎兒和新生犢?？赡苡蟹窝撞≡?。公牛生殖器官精囊內(nèi)可能有出血點和壞死灶，睪丸和附睪可能有炎性壞死灶和化膿灶。2、綿羊、山羊和鹿感染布病的病理變化剖檢病理變化與牛大致相似。3、豬感染布病的病理變化病理變化也與牛相似。如胎兒在流產(chǎn)前早就死亡，可見其干尸化。胎衣絨毛膜充血，有時水腫或雜有出血小點，還可能覆蓋一層灰黃色滲出物。睪丸和附睪在實質(zhì)中有豌豆大或更大的壞死或化膿灶，其中可能已有鈣鹽沉積。有時精囊發(fā)炎或關(guān)節(jié)炎、化膿性腱鞘炎或滑液囊炎。4、狐感染布病的病理變化內(nèi)臟器官無特性性變化，有的出現(xiàn)脾腫大，肝腎充血，淋巴結(jié)腫大，有時伴有出血。5、貂感染布病的病理變化脾腫大，呈櫻桃紅色，淋巴結(jié)腫大，切面多汁。組織學(xué)檢查可見肝脾發(fā)生布魯菌性肉芽腫，淋巴結(jié)內(nèi)見有網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞增生。6診療布魯氏菌病是由布魯氏菌引發(fā)的人獸共患傳染病，在家畜中，牛、羊、豬最常發(fā)病，且可傳染給人和其它家畜。布魯氏菌病的診療對于人和家畜的健康以及畜牧業(yè)的發(fā)展含有重要意義。其中流行病學(xué)調(diào)查和臨床檢查有助于布魯氏菌病的初步診療，但只有實驗室診療才干確診。6.1流行病學(xué)調(diào)查掌握易感動物和患病動物的流行病學(xué)資料，對于布魯氏菌病的診療含有重要意義。其流行病學(xué)調(diào)查的內(nèi)容重要有：多個家畜歷年流產(chǎn)、空懷數(shù)；歷年布魯氏菌檢出狀況；不同種，不同齡，雌、雄性家畜布病化驗陽性率比較；疫史追溯，布病從何時、何地、何種病畜傳入以及疫情的變動趨勢等。6.2臨床檢查家畜患有布魯氏菌病體現(xiàn)出許多臨診癥狀，如母畜不孕，流產(chǎn)，胎衣滯留，發(fā)生胎盤炎、子宮內(nèi)膜炎；胎兒自溶，水腫，出血，體腔積液；公畜不育，體現(xiàn)睪丸炎等。結(jié)合流行病學(xué)資料有助于對布魯氏菌病進行初步診療。6.3病原學(xué)診療1、布魯氏菌的分離培養(yǎng)細菌的分離培養(yǎng)是病原學(xué)診療的傳統(tǒng)辦法。普通采用流產(chǎn)胎兒的胃內(nèi)容物、肺、肝和脾以及流產(chǎn)胎盤和羊水進行布魯氏菌的分離培養(yǎng)。該菌對營養(yǎng)條件規(guī)定較高，普通培養(yǎng)基上較難生長，必需添加血清或馬鈴薯浸液等成分，生長繁殖緩慢，初代分離需1~2周，長者達20~30d，布魯氏菌牛種和綿羊附睪中的某些生物型初次分離時還需要5%~10%CO2。菌落生長形態(tài)呈圓形、稍隆起，邊沿整潔、光滑濕潤、大小為0.5~1.0mm，在血瓊脂上生長為白色，且不溶血，在馬鈴薯瓊脂斜面上，長出水溶性微棕色菌苔。2、布魯氏菌的染色與鏡檢培養(yǎng)菌落經(jīng)涂片鏡檢觀察，布魯氏菌為小球桿狀或短桿狀，多呈散在分布，偶見成對、短鏈狀或串狀排列。邊沿稍圓或直，無芽孢及鞭毛，但在條件不利時含有形成莢膜的能力。革蘭氏染色為紅色；姬姆薩染色呈紫色；改Ziehl-Neelsen氏法染色顯紅色，背景為藍色；改良Koster氏法染色顯紅色，背景為藍色；柯茲洛夫斯基法染色顯紅色，其它細菌呈現(xiàn)綠色。6.4血清學(xué)診療1、凝集實驗（1）全乳環(huán)狀實驗全乳環(huán)狀實驗（MRT）重要用于乳樣的布病篩查，操作簡樸快速適合現(xiàn)場應(yīng)用，但大規(guī)模監(jiān)測時可靠性差，且對羊種布魯氏菌敏感性低。在檢測牛初乳、干奶期靠近的奶牛、發(fā)情旺盛期奶牛、乳房炎患牛、免疫疫苗后不到４個月的牛乳樣時，均可能出現(xiàn)假陽性成果[11]。（2）虎紅平板凝集實驗虎紅平板凝集實驗RBPT抗原是將布魯氏菌菌株（抗原性良好）經(jīng)培養(yǎng)、滅活、離心后收集菌體用虎紅染料染色后于乳酸緩沖液中制成，與被檢血清在干凈的玻璃板上進行凝集反映，若出現(xiàn)沙粒狀凝集者則判為陽性。該辦法操作簡易、檢測快速，成本低廉，但精確性易受溫度和凝集時間的影響，且抗原的原則化也可影響其敏感性[12]，有時會因牛種布魯氏菌S19弱毒疫苗免疫和交叉反映造成假陽性成果，偶然會因前帶現(xiàn)象出現(xiàn)假陰性成果[13]，故RBPT適于動物布病的普查，現(xiàn)在，在國際貿(mào)易中仍用于牛、羊、豬布病檢測，在我國也用于人布病監(jiān)測的初篩。（3）試管凝集實驗試管凝集實驗SAT能夠定量，因而在鑒定反映強度上比虎紅平板凝集實驗更精確。該實驗操作環(huán)節(jié)繁瑣，需37℃條件下孵育過夜，較費時，不適于現(xiàn)場檢疫和基層采用，家畜感染（自然感染或人工免疫）布病一定時間后，機體中先后產(chǎn)生IgM與IgG兩種抗體，而SAT檢測IgM敏感性較高，因此可用于布病期診療，且對人畜布病疫苗免疫后血清抗體也能檢測[14]，但不適合綿羊種布病的診療。單獨應(yīng)用會造成誤診和漏診，由于不是全部感染動物所處的抗體水平都含有診療意義。同RBPT同樣，SAT2、補體結(jié)合實驗補體結(jié)合實驗（CFT）是世界動物衛(wèi)生組織（OIE）公認的布病確診性實驗。相比SAT和RBPT，特異性和敏感性較高[15]，含有較高的臨床診療價值，對于慢性布魯氏菌病，RBPT檢測為陰性，而CFT檢測為陽性，且在檢測成年牛（未經(jīng)免疫或犢牛時予以免疫的）時非常精確[16]。重要應(yīng)用于牛、羊、綿羊附睪種布氏桿菌病的診療，但不適合豬個體布病的診療，由于豚鼠補體會受到豬補體的干擾，使實驗敏感性減少38%~40%。發(fā)生溶血的樣品，也不能用CFT檢測，另外，實驗參加反映成分多，需設(shè)立多組對照，成果鑒定重要通過肉眼觀察溶液顏色的深淺鑒定出溶血程度，因此結(jié)論主觀性強，易產(chǎn)生誤差。并且實驗規(guī)定條件高，操作復(fù)雜，基層檢疫難以采用。3、酶聯(lián)免疫吸附實驗酶聯(lián)免疫吸附實驗ELISA分為間接ELISA（i-ELISA）和競爭ELISA（C-ELISA），可用于血清及乳汁樣本布病的檢測，i-ELISA是以光滑型布魯氏菌菌體脂多糖（S-LPS）作包被抗原，重要檢測IgGs或IgG亞型，i-ELISA敏感性高，優(yōu)于上述其它血清學(xué)辦法[17]，但在實際應(yīng)用中仍存在血清交叉問題，難以分辨人工免疫和自然感染。C-ELISA辦法，即在ELISA微孔上包被光滑型布魯氏菌菌體脂多（S-LPS），加入O型多糖（OPS）表位之一的特異單克隆抗體，再加入稀釋被檢血清，洗滌，加入酶標抗鼠IgG辣根過氧化物酶的復(fù)合物。該辦法較敏感，無假陰性成果出現(xiàn)，且能較好的分辨人工免疫和自然感染。敏感性與i-ELISA相稱，但不不大于緩沖平板凝集實驗（BPAT）。在檢測未免疫動物和假陽性樣品時，特異性高于或等于i-ELISA，為此，，C-ELISA被OIE列為診療和去除牛布魯氏菌病的推薦辦法。上述常規(guī)血清學(xué)辦法均是基于抗體對布魯氏菌脂多糖O鏈抗原的檢測，而布魯氏菌脂多糖O鏈抗原能夠和結(jié)腸炎耶爾森氏菌（O：9）、大腸桿菌（O：157）等陰性菌抗原以及小牛胸腺DNA發(fā)生交叉反映，故都有假陽性成果產(chǎn)生[18]。研究表明：若將抗原血清混合液的pH值減少到3~4，可大大減少非特異性凝集，而不影響感染血清的凝集。6.5分子生物學(xué)診療1、多重PCR其特異性、敏感性、重復(fù)性和穩(wěn)定性均優(yōu)于細菌分離和血清學(xué)診療辦法，特別是能分辨多個和部分生物型，這對布病的篩查和確診有重要意義[19]。2、限制性片段長度多態(tài)性聚合酶鏈反映（PCR-RFLP）是以DNA指紋圖譜為基礎(chǔ)用于微生物分型鑒定的辦法[20]，其原理是用限制性內(nèi)切酶將細胞基因組DNA進行切割，然后在凝膠上電泳分離，以顯示不同種群基因組DNA的RFLP。3、擴增片段長度多態(tài)性(AFLP)分子遺傳標志技術(shù)是一種DNA分子標記技術(shù)，基因組經(jīng)酶切后連接特定的接頭，形成帶接頭的特異片段，以此為模板，通過接頭序列和PCR引物３′端的識別進行擴增，將AFLP技術(shù)的可靠性和PCR技術(shù)的快捷方便結(jié)合起來[21]，克服了普通PCR技術(shù)的缺點，不需要理解樣品基因組序列即可對其進行檢測，是檢測基因組變異較為抱負的一種辦法。7防控布魯菌病的防控工作要堅持“防止為主”的方針。采用以監(jiān)測、檢疫、撲殺陽性牲畜為主的綜合性防控方法。1、定時檢疫家畜對易感家畜進行凈化和監(jiān)測，特別是進出境的動物要嚴格按照政策執(zhí)行，檢測出來的陽性牲畜一律撲殺，并進行無害化解決。2、隔離或裁減病畜按照盡量減少病畜數(shù)量、合理控制流動、避免混養(yǎng)的原則，因地制宜地采用撲殺或隔離喂養(yǎng)的辦法解決病畜。3、建立健康畜群在經(jīng)濟狀況允許的地區(qū)，可對畜群實施先凈化后監(jiān)測的防控方法；在經(jīng)濟欠發(fā)達地區(qū)可采用哺育健康畜群方法，以減少經(jīng)濟損失4、切斷傳輸途徑家畜的流產(chǎn)胎兒、胎衣應(yīng)在指定地點深埋或焚燒；被污染的場地，應(yīng)立刻徹底消毒；來自疫區(qū)的皮毛應(yīng)在收購地點進行消毒、包裝后方可外運；人工授精應(yīng)選擇健康種公畜的精液；奶和奶制品應(yīng)加熱后食用；家畜糞便須經(jīng)生物熱發(fā)酵消毒。5、疫苗接種布魯氏菌病的免疫是以細胞免疫為主，特異的T細胞與布魯氏菌抗原反映，產(chǎn)生淋巴因子，提高巨噬細胞活性，從而消除細胞內(nèi)的細菌。慣用疫苗有牛流產(chǎn)布魯菌19號苗、豬布魯菌2號弱毒活苗、馬耳他布魯菌5號弱毒活苗。8公共衛(wèi)生人類感染本病多數(shù)與職業(yè)有關(guān)，多見于獸醫(yī)、牧工、皮革廠的工人、乳肉加工人員以及實驗室工作人員等。傳染源重要是患病動物，普通不由人傳染于人，因此人類布魯氏菌病的防止與消亡，有賴于動物布魯氏菌病的防止與消亡?；疾⊙?、牛、豬為其重要傳染源。狗對三種重要布魯氏菌經(jīng)常是隱性感染，可成為人的傳染源。重要通過接觸，食入，吸入感染。人與患病動物或病料接觸，經(jīng)消化道、皮膚、粘膜、生殖道感染。感染牛的布魯氏菌無自覺癥狀，但血液中存在抗體；感染豬的布魯氏菌，癥狀輕，關(guān)節(jié)炎、肌肉疼痛，疲勞，局部炎癥；感染羊的布魯氏菌，癥狀重，發(fā)生波浪熱，在發(fā)熱期體溫晚間升高，但神志蘇醒，清晨體溫下降（出汗）至靠近常溫，這時病人感覺癥狀加重肌肉、關(guān)節(jié)疼痛加劇，大量出汗，體重減輕，關(guān)節(jié)、肌肉疼，肝脾腫脹，男性可發(fā)生睪丸炎，女性可流產(chǎn)、神經(jīng)炎。由此可見，感染羊的布魯氏菌對公共衛(wèi)生的危害更為嚴重。職業(yè)人群應(yīng)從控制傳染源、切斷傳輸途徑、保護易動人群等方面加強對本病的防止，具體方法涉及:對家畜采用“裁減病畜，病畜、健康畜分群圈養(yǎng)，疫苗免疫”等防治方法，加強動物檢疫。并加強動物制品作業(yè)場合的消毒方法，如紫外燈照射、噴消毒劑。對畜產(chǎn)品加工工具進行消毒解決，涉及紫外燈照射、煮沸消毒、消毒劑浸泡等。大力進行衛(wèi)生宣傳，加強人、畜糞便管理。保護水源，避免被病畜、病人的排泄物污染。進行這方面知識的宣傳，凡從事畜牧業(yè)的獸醫(yī)、喂養(yǎng)員、擠奶員、毛肉類和乳制品加工銷售人員、野生動物園的喂養(yǎng)人員，接觸畜牧流產(chǎn)物、排泄物等，要做好個人防護，如戴N95口罩、橡膠手套、穿工作服等。特別在解決羊只流產(chǎn)物過程中一定要做好個人防護。同時把流產(chǎn)羊只的排泄物深埋消毒解決。在工作完畢后，個人防護用品要統(tǒng)一收集，按上述第3條進行消毒解決。也可對從事這方面職業(yè)的人員進行免疫接種。M104菌苗，現(xiàn)有19

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13A菌苗。對從業(yè)人員定時進行體檢，爭取早診療，早治療?；颊呖捎们嗝顾?，鏈霉素共同治療，療程42天，由于是布氏桿菌是胞內(nèi)寄生，有的能治愈，有的不能治愈。參考文獻[1]DawsonCE,StubberfieldEJ,PerrettLL,etal.PhenotypicandmolecularcharacterisationofBrucellaisolatesfrommarinemammals[J].BMCMicrobiol,,8:224.[2]ScholzHC,HubalekZ,SedlacekI,etal.Brucellamicrotisp.nov.,isolatedfromthecommonvoleMicrotusarvalis[J].IntJSystEvolMicrobiol,,58(2):375-382.[3]ScholzHC,HoferE,VergnaudG,etal.IsolationofBrucellamicrotifrommandibularlymphnodesofredfoxes,Vulpesvulpes,inlowerAustria[J].VectorBorneZoonoticDis,,9(2):153-156.[4]ScholzHC,NocklerK,GollnerC,etal.Brucellainopinatasp.Novisolatedfromabreastimplantinfection[J].IntJSystEvolMicrobiol,,60(4):801-808.[5]O'CallaghanD,WhatmoreAM.Brucellagenomicsasweenterthemulti-genomeera[J].BriefFunctGenomics,,10(6):334-341.[6]樸范澤主編.家畜傳染病學(xué)[M],中國科學(xué)文化出版社,:ll0.[7]楊東東.淺談人用布魯氏菌疫苗[J],當代畜牧獸醫(yī),(12):81-82.[8]劉建鵬,楊增岐,馬杰,等.布魯菌病的綜合防控方法[J].動物醫(yī)學(xué)進展,,30(10):121-124.[9]白媛媛，姚江華，白穎,等２