衡陽顯齒蛇葡萄的發(fā)生與發(fā)展

衡陽顯齒蛇葡萄的發(fā)生與發(fā)展

澤溝是青蝦科的一種野生藤本植物。這是典型的茶類。由顯齒蛇葡萄的嫩葉經(jīng)過殺青、揉捻、烘干而成的類茶飲料稱為藤茶,亦稱“茅巖莓茶”、“甘露茶”等。顯齒蛇葡萄全株藥用,味甘、淡,性涼,具有清熱解毒、祛風(fēng)濕、強(qiáng)筋骨等功效。用于治療感冒發(fā)熱、咽喉腫痛、黃疸型肝炎、皰癤等癥。顯齒蛇葡萄主要分布于廣西、廣東、云南、貴州、湖南、湖北、江西、福建等省區(qū)。集中或散生在海拔為400～1300m山坡的混交林中。野生貯量大,據(jù)不全完統(tǒng)計(jì),湖南省年產(chǎn)野生顯齒蛇葡萄共450～500t,其中衡陽地區(qū)包括衡南、衡東、衡山、常寧等地年產(chǎn)約150t,郴州約20t,湘西約100t,懷化約60t,此外還有零星分布。人們對其分布和生長規(guī)律比較了解,為可以直接利用的野生植物資源。藤茶在衡陽市衡東、衡南等地已有一千多年飲用歷史,經(jīng)過近幾年的發(fā)展,已成為衡陽市特色產(chǎn)業(yè),對發(fā)展衡陽市農(nóng)村經(jīng)濟(jì)具有十分重要的意義。隨著藤茶內(nèi)生理活性物質(zhì)的不斷提取及其藥理作用的不斷深入研究,越來越顯現(xiàn)出藤茶具有廣闊的開發(fā)利用空間,如何利用衡陽市的區(qū)域及資源優(yōu)勢,引入現(xiàn)代科研成果,積極轉(zhuǎn)化為生產(chǎn),實(shí)施規(guī)?；?、產(chǎn)業(yè)化、工業(yè)化生產(chǎn),加大對藤茶開發(fā)研究的力度和深度,對發(fā)展湖南省農(nóng)村經(jīng)濟(jì)有著十分深遠(yuǎn)的意義。1藤茶中總黃酮類化合物相關(guān)營養(yǎng)成分的組成結(jié)構(gòu)及組成測定為了很好地開發(fā)顯齒蛇葡萄,很多學(xué)者對顯齒蛇葡萄的化學(xué)成分進(jìn)行祥盡的研究,據(jù)張友勝等報道,從顯齒蛇葡萄中分離了5種化合物單體,從現(xiàn)階段的研究成果來看,已從其中分離出了數(shù)十種化合物,且各種營養(yǎng)成分基本清楚。在對其所含黃酮類成分的研究中,周天達(dá)等從顯齒蛇葡萄的幼嫩莖葉混合物中首次分離得到一種雙氫黃酮醇的成分,鑒定為3,3′,4′,5,5′,7-六羥基-2,3-雙氫黃酮醇,即雙氫楊梅素。之后,覃潔萍等對此進(jìn)行了鑒定。何桂霞測定其總黃酮含量為43.4%～44.0%,RSD1.56%;雙氫楊梅素含量為37.4%～38.5%,RSD1.85%～2.65%;楊梅素含量為1.72%～1.78%,RSD2.86%～3.21%;何桂霞對瑤族藤茶Ampelopsiscantoiensis藥用成分進(jìn)行研究,表明其為3,5,7,3′,4′,5′-六羥基黃酮,即楊梅樹皮素。何桂霞還采用薄層掃描法測定了藤茶中二氫楊梅素和楊梅素的含量,建立了藤茶的藥用品質(zhì)質(zhì)控方法,并還以二氫楊梅素為指標(biāo),采用分光光度法對藤茶中總黃酮類成分的含量進(jìn)行了測定,為該藥材及其制劑的質(zhì)量控制提供了標(biāo)準(zhǔn)。袁阿興等從顯齒蛇葡萄的地上部分又分得4個化合物:龍延香醇(ambrein)、β-谷甾醇(β-sitosterol),楊梅素(myricetin)和楊梅苷(myricetrin)。王定勇等還從顯齒葡萄的乙酸乙酯提取物中分離得到9種化合物,經(jīng)波譜分析、化學(xué)分析及與已知的化合物對照,分別鑒定為:棕櫚酸、β-谷甾醇、大黃素、沒食子酸甲酯、槲皮素、槲皮素3?0?a??3-0-a^-葡萄糖花旗松素、洋芹菜素和蛇葡萄素,9個化合物均為首次從該植物中分離得到。王定勇從顯齒蛇葡萄的正丁醇提取物中分離得到一種新化合物4′-羥基-3′-甲氧基異黃烷-7-O-á-L-吡喃鼠李糖甙,從顯齒蛇葡萄的乙醇提取物中分離得到4′-羥基-3′-甲氧基異黃烷-7-O-á-L-鼠李糖(1→6)-β-D葡萄糖甙。張友勝等對顯齒蛇葡萄基本成分進(jìn)行了研究,結(jié)果表明:顯齒蛇葡萄粗蛋白含量為13.94%;溶性蛋白質(zhì)含量為0.55%;氨基酸總量為2.53%,其中,包括人體必需的8種氨基酸總量為0.4539%,非必需的9種氨基酸總量為1.8009%;總多酚18.5%;通過水浸提取總黃酮38.965%,其中二氫楊梅素單體含量達(dá)30.598%。張友勝等并從顯齒蛇葡萄中分離出五羥基黃酮-3-蕓香糖苷(即蘆丁)沒食子酰?a??D-a^-D葡萄糖,沒食子酸乙酯,沒食子酸。此外,他還針對春、夏季節(jié)不同的顯齒蛇葡萄揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行了分析,初步鑒定出春季樣揮發(fā)油26種成分,夏季樣17種成分。應(yīng)用色譜峰面積歸一法測定各成分相對百分率,春季樣和夏季樣揮發(fā)油化學(xué)成分相差較大,但主要成分均為葉綠醇、正十六酸、雪松醇等。2雙氫楊梅素a.非隨著黃酮類化合物的生理活性作用研究的深入,對藤茶中含有的黃酮類化合物的生理效應(yīng)也作了深入研究,顯齒蛇葡萄總多酚18.5%、通過水浸提取總黃酮38.965%、其中二氫楊梅素單體含量達(dá)30.598%,二氫楊梅素在藤茶中具有如此高的含量,因此其藥理效應(yīng)就成影響藤茶藥理效應(yīng)的主要因素。二氫楊梅素(3,5,7,3′,4′,5′,六羥基2,3雙氫黃酮醇(ampelopsin/dihydromyricetin)又名雙氫楊梅樹皮素、福建茶素、白蘞素、蛇葡萄素等,是黃酮類化合物的重要一員。該化合物首次由Kotake和Kubota于1940年從葡萄科蛇葡萄屬植物福建茶即楝葉玉葡萄A.Meliaefolia的葉中分離得到,命名為蛇葡萄素。二氫楊梅素大量存在于葡萄科蛇葡萄屬植物中,如顯齒蛇葡萄、粵蛇葡萄、羽葉蛇葡萄、蛇葡萄、東北蛇葡萄、光葉蛇葡萄等,尤其是在蛇葡萄屬植物中更是大量存在,顯齒蛇葡萄植物的幼嫩莖葉中含量達(dá)27%～28%,最高部位可達(dá)40%以上;粵蛇葡萄中幼嫩莖葉中含量可達(dá)25%以上。二氫楊梅素作為黃酮類成分中的重要一員,在天然植物中單體含量如此之高,實(shí)屬罕見。前人對藤茶中的二氫楊梅素及總黃酮進(jìn)行了臨床應(yīng)用及藥理試驗(yàn),藤茶有如下一些藥理功能。2.1藤茶湯提物的抗炎作用林建峰證實(shí)顯齒蛇葡萄其對小鼠巴豆油性耳廓水腫、大鼠角叉菜膠性、甲醛性足跖腫脹及腹腔毛細(xì)血管通透性、急性、亞急性炎癥的滲出過程均有抑制作用;對小鼠醛酸性扭體反應(yīng)和熱水反應(yīng)顯示有一定的鎮(zhèn)痛作用,能提高小鼠的痛閾水平。鐘正賢等在給小鼠做了一系列的實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明:二氫楊梅素大小劑量組(1.0g·kg-1,0.5g·kg-1)和陽性對照藥氯化胺(1.0g·kg-1)的酚紅排泌量,與對照組比較均有明顯升高,證實(shí)二氫楊梅素有明顯祛痰作用;同時,二氫楊梅素能明顯延長咳嗽潛伏期和減少咳嗽次數(shù),其中大劑量組(1.0g·kg-1)的止咳作用強(qiáng)度與對照組咳必清相當(dāng)。索朗等采用足腫脹、耳廓腫脹、腹腔毛細(xì)血管通透性、碳粒廓清、小鼠扭體等實(shí)驗(yàn)方法,對藤茶水提物的抗炎鎮(zhèn)痛作用進(jìn)行了研究,結(jié)果表明:藤茶水提物在所用試劑量范圍內(nèi)[2、4、8g/(kg.d)-1]具有較明顯的抗炎作用,但各劑量組對醋酸致小鼠扭體次數(shù),對小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能均無明顯影響。通過以上藥理實(shí)驗(yàn)證實(shí):藤茶具有較明顯的抗炎作用,它能顯著抑制角叉菜膠致小鼠足腫脹,顯著抑制巴豆油所致小鼠耳廓脹,抑制醋酸引起的小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的增高。除對藤茶進(jìn)行研究外,很多學(xué)者針對復(fù)方藤茶進(jìn)行了祛痰試驗(yàn),表明該藥具有較好的祛痰作用。鎮(zhèn)痛作用試驗(yàn)提示復(fù)方藤茶40g/kg組或20g/kg組對醋酸所致的腹險刺激疼痛具有較好的療效,效果稍遜于羅通定。對熱板致痛的痛閾提高率比較,只有復(fù)方藤茶40g/kg組與生理鹽求組比有顯著差異,復(fù)方藤茶20g/kg組雖然可提高痛閾,但復(fù)方藤茶是生藥,含鎮(zhèn)痛物質(zhì)較少,羅通定則是鎮(zhèn)痛的純生物堿。藤茶民間多用于清熱解毒,鎮(zhèn)咳化痰、祛鳳濕、壯筋骨,現(xiàn)代藥理試驗(yàn)證明藤茶能較好地鎮(zhèn)痛。藤茶水煎劑有明顯發(fā)汗作用,防感藤茶乙醇提取液能顯著降低致熱后家兔體溫,促進(jìn)汗液和唾液的分泌,增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能和溶血素抗體的形成。水煎劑口服最大耐受量為18g/kg,腹腔注射LD50為(9.65±1.38)g/kg。從廣西瑤藤茶中提取的雙氫楊梅樹皮素以1.0、0.5g/kg劑量給小鼠灌服,能顯著增強(qiáng)呼吸道酚紅排出量和減少氫氧化胺實(shí)驗(yàn)性咳嗽次數(shù),提示其有祛痰止咳作用,作用強(qiáng)度與陽性對照藥安妥明相似。2.2采用二氫蝦素合成甲酯為了尋找理想的天然殺菌藥物,很多學(xué)者進(jìn)行了顯齒蛇葡萄殺菌作用研究。MatsumotoT、TaharaS在進(jìn)行植物次生代謝物抑制真菌篩選實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),從Salixsochalinensis中提取的二氫楊梅素對Cladosporiumherbarum真菌具極強(qiáng)的抑制作用,但若將二氫楊梅素合成為甲酯,則其甲酯的抑菌能力為其抑菌能力的4倍。熊大勝等用顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉提取物進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,其對金黃葡萄球菌、枯草桿菌均有很強(qiáng)的抑制作用,對黑曲霉、黃曲霉、青霉及交鏈霉均有不同程度的抑制效果。對黑曲霉、黃曲霉最低抑菌濃度分別為0.7%、1.1%,對金黃葡萄球菌、枯草桿菌最低抑菌濃度均小于0.07%。林芹等進(jìn)行了復(fù)方藤茶的抗菌試驗(yàn),用對倍稀釋法觀察了復(fù)方藤茶煎劑的抑菌試驗(yàn),證明對8種常見致病菌有較好的抑菌作用,特別是對金黃色葡葡球菌、白色葡萄球菌、奈氏菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌和綠膿桿菌都有較好的抗菌效果。楊書珍等進(jìn)行了二氫楊梅素對幾種食品常見菌的抑制效果的研究表明:二氫楊梅樹皮素(DMY)對牛奶酸敗菌和青霉菌具有明顯的抑制作用,且抑菌效果優(yōu)于常見的防腐劑苯甲酸,而對酵母菌的抑制效果不顯著。因此,DMY可作為食品添加劑應(yīng)用于乳制品及易染霉菌食品的保藏。2.3雙氫楊梅枝條素對腸平滑和主動脈條的收縮為了加大顯齒蛇葡萄開發(fā)利用研究力度,有些學(xué)者進(jìn)行了顯齒蛇葡萄抗高血壓研究。周天達(dá)等、劉建新等證實(shí)了二氫楊梅素能拮抗去甲腎上腺素(NE)和高K+所致的兔胸主動脈條收縮,顯示雙氫楊梅樹皮素對腸平滑肌和主動脈條的α受體具阻斷作用。周天達(dá)等進(jìn)一步證實(shí),二氫楊梅素對NE所引起的依賴內(nèi)Ca2+釋放的收縮有明顯的抑制作用,對NE依賴細(xì)胞外Ca2+性收縮僅在較高濃度時才顯示抑制作用,提示雙氫楊梅樹皮素對電壓依賴性鈣通道(PDC)有選擇性阻滯作用,有望開發(fā)為抗高血壓藥。2.4降脂乳劑的作用有學(xué)者進(jìn)行了顯齒蛇葡萄消脂作用研究。鐘正賢等采用喂高脂乳劑小鼠高血脂癥模型實(shí)驗(yàn)證實(shí),模型組血清TC、TG值明顯升高,HDLC值下降。與模型組比較,二氫楊梅素大小劑量組均能抑制高脂乳劑引起的血脂升高,具降脂作用,其作用強(qiáng)度與對照藥安妥明相似。鐘正賢等進(jìn)行了廣西藤茶總黃酮降血糖的實(shí)驗(yàn),觀察了GXTF對多種動物模型血糖水平的影響,結(jié)果表明:GXTF對四氧嘧啶所致糖尿病小鼠有較好的治療作用,對腎上腺素、葡萄糖引起的高血糖小鼠也有明顯的降血糖作用,但對正常小鼠血糖無明顯影響;急性毒性試驗(yàn)表明,其最大灌胃量為26.0g/kg,說明GXTF對多種動物模型具有較好的降血糖作用,且副作用很小。2.5抗麻黃毒素作用針對黃酮的生理特性,有些學(xué)者進(jìn)行了顯齒蛇葡萄保肝護(hù)肝作用研究。OshimaY等從AmpelopsisbrevipedumnculataVar.hancei的根中分離了二氫楊梅素F和G(AmpelopsinsF、G),其表現(xiàn)出明顯的抗四氯化碳和半乳糖胺所導(dǎo)致的肝損傷,之后又證實(shí)了ampelopsinE和反式ampelopsinE表現(xiàn)出抗肝炎毒素作用。鄭作文等進(jìn)行了廣西藤茶中雙氫楊梅樹皮素對小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用的研究,結(jié)果表明:雙氫楊梅樹皮素有效地抑制四氯化碳和D-半乳糖所致小鼠急性肝損傷的血清ALT和AST的升高,與空白對照組比較有顯著性差異。說明雙氫楊梅樹皮素能有效地保護(hù)小鼠急性化學(xué)性肝損傷。二氫楊梅素保肝護(hù)肝機(jī)理已基本明確。主要是其可抑制肝性M細(xì)胞膠原纖維的形成,從而達(dá)到治療肝病的目的。在老鼠肝細(xì)胞組織培養(yǎng)中,肝細(xì)胞移植后很容易產(chǎn)生膠原纖維,但二氫楊梅素則可抑制膠原纖維的形成,已形成的膠原纖維則被分散成小微塊。鐘正賢等進(jìn)行了廣西藤茶中雙氫楊梅樹皮素及總黃酮保肝作用的實(shí)驗(yàn)研究,結(jié)果表明:雙氫楊梅樹皮素能明顯降低四氯化碳、D-半乳糖胺和異硫氰酸萘酯致小鼠急性肝損傷模型血清中ALT、AST活性和T-BIL含量,減輕肝組織的變性和壞死;并提高單核巨噬細(xì)胞吞噬功能和溶血素含量。說明雙氫楊梅樹皮素具有保肝降酶退黃,提高免疫功能作用。2.6藤茶中aps對小鼠免疫調(diào)節(jié)的影響為了判斷顯齒蛇葡萄是否具有增強(qiáng)免疫作用,周月嬋等進(jìn)行了藤茶安全性毒理學(xué)評價及其免疫調(diào)節(jié)作用實(shí)驗(yàn)研究,結(jié)果表明:安全性評價試驗(yàn)中,受試藤茶對小鼠的急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)結(jié)果屬無毒級、三項(xiàng)遺傳毒性試驗(yàn)結(jié)果為陰性、90d喂養(yǎng)試驗(yàn)表明受試藤茶對大鼠各項(xiàng)觀察指標(biāo)未產(chǎn)生毒副作用;免疫調(diào)節(jié)試驗(yàn)中,與對照組比較,受試物組小鼠的DTH腫脹度明顯增加,抗體細(xì)胞生成數(shù)顯著增多,吞噬指數(shù)明顯增加,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn),差異具有顯著性,說明藤茶具有增強(qiáng)小鼠免疫功能的作用,可以安全飲用。曾春暉等進(jìn)行了藤茶中APS對小鼠淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)的影響研究,結(jié)果表明:APS中,大劑量組與陽性對照組比較有顯著性差異,增強(qiáng)率分別為15.2%、26.8%、59.6%。說明APS對ConA誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞增殖有增強(qiáng)作用,具有明顯的免疫增強(qiáng)作用。鐘正賢等進(jìn)行了廣西藤茶總黃酮的長期毒性試驗(yàn),結(jié)果表明:廣西藤茶總黃酮大小劑量組動物的外觀行為、體重、臟器系數(shù)、血液學(xué)和生化學(xué)指標(biāo),與空白對照組比較,均無明顯差異;病理檢查未見與藥物毒性相關(guān)的明顯病變,停藥后也未見藥物延遲性毒性反應(yīng)。說明廣西藤茶總黃酮長期用藥對大鼠無明顯毒性,推論臨床擬用劑量應(yīng)是安全的。2.7氫楊樹乙醇急性毒性的毒劑效果為了證明顯齒蛇葡萄是否象茶葉一樣具有減輕乙醇中毒作用,HaseK等在進(jìn)行解除酒精中毒劑實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),二氫楊梅素作為解除酒精中毒劑效果最佳;之后,在進(jìn)行機(jī)理研究時發(fā)現(xiàn),二氫楊梅素減輕乙醇中毒的原理主要是保護(hù)肝,減輕乙醇對肝的損傷。劉建新等用顯齒蛇葡萄植物水煎劑進(jìn)行了解酒實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示隨其水煎劑濃度的加大,跌倒反應(yīng)百分率和步態(tài)不穩(wěn)百分率下降,證實(shí)其具緩解酒醉反應(yīng),促進(jìn)醒酒的作用,盡管劉建新用的不是二氫楊梅素單體,但顯齒蛇葡萄植物水煎劑的主要成分為二氫楊梅素,說明二氫楊梅素具有減輕乙醇中毒的作用。3dmy0.犯罪抑制了+tbhq的脂肪酸過氧化體系為了尋找天然抗氧化劑,張友勝等進(jìn)行了顯齒蛇葡萄中二氫楊梅樹皮素的抗氧化作用及其機(jī)制研究,結(jié)果表明:DMY對穩(wěn)定自由基DPPH的清除率高達(dá)73.3%～91.5%;DMY(0.01%～0.04%)可抑制亞油酸過氧化,其作用效果等同或優(yōu)于TBHQ。DMY在FeSO4依他酸引發(fā)的亞油酸過氧化體系中的抗氧化機(jī)制為絡(luò)合Fe2+,阻止由Fe2+引發(fā)的亞油酸過氧化。說明DMY有較好的抗氧化效果,有可能成為一個很好的天然抗氧化劑。林淑英等進(jìn)行了二氫楊梅素在豬油體系中的抗氧化作用研究,通過測定丙二醛吸光值和過氧化物值來評價抗氧化效果,抗壞血酸和檸檬酸可有效地提高二氫楊梅素的抗氧化性能。4復(fù)合性二氫楊梅素的提取工藝為了加快顯齒蛇葡萄開發(fā)利用進(jìn)程,覃潔萍等對廣西藤茶中黃酮類成分的提取工藝進(jìn)行了研究,采用新的水提取和溶劑分離的方法,經(jīng)化學(xué)和光譜鑒定確定結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明:提取產(chǎn)物經(jīng)確證為雙氫楊梅樹皮素(dihydromyricetin)和楊梅素(Myricetin),平均收率分別為19.6%和0.51%,該提取法經(jīng)濟(jì)、簡便,易于操作,并且提取率較高。王巖等采用正交試驗(yàn)法對藤茶蛇葡萄素的優(yōu)選提取工藝進(jìn)行了研究,選擇80%乙醇,用量為藤茶量的10倍,加熱回流2次,每次60min效果理想。張友勝采用“增溫溶解,保溫過柱,溫水解吸”的方法對顯齒蛇葡萄中的二氫楊梅素進(jìn)行提制研究。結(jié)果表明:該方法的適宜溫度為50～70℃,最好為60℃,該方法能很好地將70%左右的二氫楊梅素提純到80%;提純二氫楊梅素時,單位數(shù)量的D16大孔吸附樹脂處理料液的數(shù)量,主要取決于料液中二氫楊梅素的純度;同時過柱時上柱料液濃度、過柱速度以及解吸時水的流速對二氫楊梅素的提制均有影響