五磨飲子對(duì)大鼠胃潰瘍模型的影響

五磨飲子對(duì)大鼠胃潰瘍模型的影響

五磨飲子是治療臨床上常用的祛肝理氣的有效藥物。關(guān)于其功能機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究很少。本實(shí)驗(yàn)繼“五磨飲子調(diào)節(jié)大鼠胃運(yùn)動(dòng)的實(shí)驗(yàn)研究”之后,通過(guò)檢測(cè)大鼠胃消化液分泌以及潰瘍指數(shù)、潰瘍發(fā)生率等指標(biāo)來(lái)探討其作用機(jī)理,為其臨床應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。1材料和方法1.1動(dòng)物分組與處理Wistar大鼠36只,均為雄性,體重170～220g,由天津藥研院動(dòng)物室提供,普通飼料適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后,按體重大小排列,隨機(jī)分為生理鹽水(下簡(jiǎn)稱(chēng)NS)組、中藥組、西藥組,每組12只。1.2特效藥1.2.1中藥五磨飲子藥材購(gòu)自天津中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院,煎煮成1.94g/ml藥液,不加任何添加劑,置5℃冰箱備用。1.2.2津國(guó)政府臨床專(zhuān)科提供藥物思密達(dá),益普生制藥公司,許可證號(hào):X940267;阿拉伯膠,由天津醫(yī)科大學(xué)藥理教研室提供。臨用前用生理鹽水、五磨飲子,思密達(dá)分別配成4%的阿拉伯膠生理鹽水溶液(簡(jiǎn)稱(chēng)NS溶液)4%的阿拉伯膠中藥溶液(簡(jiǎn)稱(chēng)中藥溶液)、18%的阿拉伯膠思密達(dá)溶液(簡(jiǎn)稱(chēng)西藥溶液)。1.3測(cè)量指標(biāo)和方法1.3.1損傷寬度計(jì)算損傷指數(shù):按Guth等的標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算,即依照黏膜損傷的長(zhǎng)徑計(jì)算,損傷≤1mm(包括糜爛點(diǎn))為1分,大于1而小于或等于2mm為2分,依此類(lèi)推,損傷寬度>2mm者,損傷指數(shù)加倍。潰瘍發(fā)生率:以病理觀察結(jié)果為準(zhǔn)來(lái)計(jì)算。1.3.2胃腸內(nèi)總酸度測(cè)定胃液分泌總量:處死大鼠后,按常規(guī)方法收集胃液,用3000r/min離心機(jī)離心20min,記錄上清液即為胃液分泌總量。胃內(nèi)總酸度:用酸堿滴定法。胃蛋白酶活性:采用Mett毛細(xì)玻管法。1.4胃蛋白酶活性測(cè)定按照Shay方法造模:各組動(dòng)物于收集胃液前48h禁食(不禁水),乙醚輕度麻醉后,將動(dòng)物固定在手術(shù)臺(tái)上,開(kāi)腹取出胃,用縫合線結(jié)扎幽門(mén)、十二指腸的接合部。分組給予上述溶液5ml/kg灌胃后關(guān)腹,縫合肌肉和皮膚,再把動(dòng)物放回籠中,禁食禁水16h,用頸椎離斷法全部處死動(dòng)物,在賁門(mén)與食道連接處迅速結(jié)扎,剪下全胃,立即放入5%福爾馬林溶液固定10min后取出,沿胃大彎側(cè)剪一小口,收集全部胃內(nèi)容物于試管中,用3000r/min離心機(jī)離心20min,記錄上清液即為胃液分泌總量,用吸管吸取1ml胃液加入2滴酚酞,用0.01mol/LNaOH滴定,計(jì)算16h的總酸度(mEq/16h)。按Mett毛細(xì)玻管法檢測(cè)胃蛋白酶活性。收集完胃內(nèi)容物后,從所剪小口處沿胃大彎側(cè)剪開(kāi),用NS沖洗干凈,平鋪于手術(shù)臺(tái)上,由專(zhuān)人在外科顯微鏡下按Guth等的標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算損傷指數(shù),計(jì)算完后,用5%福爾馬林溶液固定,再由專(zhuān)人取損傷程度重的部分做病理切片,送交病理室,計(jì)算潰瘍個(gè)數(shù)、潰瘍發(fā)生率、損傷發(fā)生率及潰瘍深度。1.5數(shù)值模型的檢驗(yàn)NS組、中藥組、西藥組各組間潰瘍個(gè)數(shù)用四格表的確切概率法檢驗(yàn),潰瘍深度用Ridit法檢驗(yàn),潰瘍發(fā)生率、損傷發(fā)生率用u檢驗(yàn),其余各指標(biāo)用t檢驗(yàn)。2結(jié)果2.1胃穿孔死亡原因在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,NS組死亡2只,打開(kāi)腹腔后發(fā)現(xiàn)2只都是由于胃穿孔致死;中藥組死亡2只,是由于灌胃時(shí)誤入氣管所致;西藥組死亡2只,死因不明。2.2思密達(dá)對(duì)胃蛋白酶活性的影響見(jiàn)表1。結(jié)果顯示:中藥組、西藥組與NS組比較,胃液分泌量有非常顯著性差異(P<0.01),說(shuō)明五磨飲子與思密達(dá)均可明顯促進(jìn)胃液分泌;中藥組與NS組比較,胃酸值、胃蛋白酶活性有非常顯著性差異(P<0.01),西藥組與NS組比較,胃酸值、胃蛋白酶活性沒(méi)有差異(P>0.05)。說(shuō)明五磨飲子可明顯提高胃酸、抑制胃蛋白酶活性,思密達(dá)不影響胃酸和胃蛋白酶活性。2.3磨飲子、思密達(dá)對(duì)大鼠損傷、則敗了作用見(jiàn)表2～3及圖1～3。結(jié)果顯示:中藥組與NS組比較,損傷發(fā)生率有非常顯著性差異(P<0.01)。西藥組與NS組比較,損傷發(fā)生率有顯著性差異(P<0.05),說(shuō)明五磨飲子、思密達(dá)均可降低Shay大鼠的損傷發(fā)生率;中藥組、西藥組與NS組,中藥組與西藥組比較,損傷指數(shù)均有非常顯著性差異(P<0.01)。說(shuō)明五磨飲子、思密達(dá)均可以明顯對(duì)抗幽門(mén)結(jié)扎性胃潰瘍作用,二者均有保護(hù)胃黏膜作用,且五磨飲子保護(hù)胃黏膜作用較思密達(dá)為優(yōu)。結(jié)果顯示:中藥組與NS組相比,潰瘍發(fā)生率有非常顯著性差異(P<0.01)。西藥組與NS組相比,潰瘍發(fā)生率有顯著性差異(P<0.05)。說(shuō)明五磨飲子、思密達(dá)均能抑制潰瘍發(fā)生,降低潰瘍發(fā)生率。中藥組與NS組相比,潰瘍深度有顯著性差異(P<0.05),西藥組與NS組相比,潰瘍深度沒(méi)有顯著性差異(P>0.05)。說(shuō)明五磨飲子能明顯抑制潰瘍發(fā)生,效果較思密達(dá)為優(yōu)。3磨飲子的作用機(jī)理五磨飲子源出《醫(yī)方考·卷六》,由沉香、木香、烏藥、枳實(shí)、檳榔組成。原方主治氣厥,后世醫(yī)家發(fā)展為治脹除滿。我們前期工作表明:五磨飲子能增強(qiáng)在體大鼠胃運(yùn)動(dòng)振幅但不影響胃運(yùn)動(dòng)頻率,新斯的明可促進(jìn)五磨飲子興奮胃運(yùn)動(dòng)作用,阿托品可完全阻斷五磨飲子促進(jìn)胃運(yùn)動(dòng)的作用,推測(cè)其作用機(jī)理可能是興奮迷走神經(jīng),使胃平滑肌M受體興奮,從而使局部乙酰膽堿濃度增高所致。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:五磨飲子具有促進(jìn)大鼠胃液分泌,抑制胃蛋白酶活性,保護(hù)胃黏膜等作用。作用機(jī)理可能與興奮迷走神經(jīng),增加胃黏膜血流量有關(guān)。3.1消化液的氧化本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:五磨飲子可明顯促進(jìn)胃液、胃酸分泌。作用機(jī)理可能是:興奮迷走神經(jīng),釋放乙酰膽堿(Ach),直接刺激腺體細(xì)胞分泌消化液,壁細(xì)胞分泌胃酸?，F(xiàn)代藥理研究證實(shí)很多中藥中含有揮發(fā)油成分,能夠增加消化液的分泌,如本方中的烏藥、木香、砂仁等。檳榔中的檳榔堿能通過(guò)興奮迷走神經(jīng)來(lái)增加胃蠕動(dòng),使腺體分泌增加,消化液分泌旺盛,食欲增加。3.2磨飲子的臨床作用本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:五磨飲子能明顯降低Shay大鼠的損傷指數(shù),療效明顯優(yōu)于思密達(dá)。其作用機(jī)理可能為:①促進(jìn)胃液分泌,加強(qiáng)“黏液-碳酸氫鹽屏障”。五磨飲子能興奮迷走神經(jīng),釋放Ach,促進(jìn)黏液頸細(xì)胞分泌黏液,加強(qiáng)這一屏障,從而起到保護(hù)胃黏膜作用。②抑制胃蛋白酶活性。五磨飲子通過(guò)抑制胃蛋白酶活性來(lái)降低損傷指數(shù),保護(hù)胃黏膜。③增加胃黏膜血流量,改善微循環(huán)。雖然Shay本人認(rèn)為幽門(mén)結(jié)扎造成消化性潰瘍是由于胃液的消化作用而生成的,但Debray、石原等認(rèn)為,這