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光敏感原料,天使or魔鬼?之前,以為提到化妝品的安全性,大家一定非常熟悉了。慢慢發(fā)現(xiàn),其實不然。生活中大多集美們關(guān)注的焦點集中在功效上,如保濕、美白、舒敏、抗皺、防曬???,對于化妝品的安全性就是一個小白。安全是護膚的基礎(chǔ),了解一些化妝品安全性的tips,既可以省錢,又能省智商稅。我們常說的化妝品安全性主要是三個方面:刺激性、致敏性以及光毒性。苦除an適輕輕QECD^fi但甫周點茸ITIwU屏的疋1也港力OECDTG4J9^F^^lETSD曲咿ngjsi的輻曰為I?阿罔4JSITElioCkullar力OECDTG4?2塞此凹日ET5Df1 念Bt爾匪事DECDn切£適ME[雄性h<-CLA.l%1HP-1toae/cosjiOEtDTfl4420Epik.uth-Qt-n<*i£EpiKuLi!!-也出1新姜4HS上関話3T}?isuan3TiOECOT@432EpiKutisHio-tota-xIciiEjAsuytlK-PA]Ip-iKuEii:日四空力EpIKutiiSo-n-EliEl'Ulrion-Astjy(EK.SAJEpiKutlE四mi禾HHJ;■耳f\化妝品安全問題及常用評估方法由于作用部位不同,產(chǎn)生的刺激性有皮膚刺激性和眼刺激性;關(guān)于致敏性,關(guān)注更多的是皮膚致敏性;光敏感物質(zhì)在光的作用下,引起的光毒性和光致敏性。刺激性和致敏性都是“熟人”了,容易理解。但是光毒性和光致敏性究竟是個什么鬼,還可以這樣操作?。?!一念“天使”,一念“魔鬼”。光敏感物質(zhì)(化學(xué)原料或產(chǎn)品本身)沒有毒性,安安心心的搬磚,但紫外線“撩撥”后,能量爆棚,非常暴躁,忘了本職工作亂折騰,給周圍的細胞帶來傷害,給皮膚帶來損傷,進而產(chǎn)生光感性皮炎等問題。插圖光毒性/光致敏性的發(fā)生需要同時具備原料(光敏感物質(zhì))和工人(光源,多指UVA和UVB)。依據(jù)光敏感所引發(fā)的階段和機制不同,又可以分為光刺激反應(yīng)(光毒性)、光致敏反應(yīng)(光變態(tài)反應(yīng))。雖然他們是“雙胞胎”,但脾氣和性格差異很大,光刺激反應(yīng)是非免疫性組織損傷,不涉及免疫系統(tǒng)和免疫細胞;光致敏反應(yīng)是W型超敏反應(yīng)(遲發(fā)性超敏反應(yīng)),由免疫系統(tǒng)和免疫細胞引發(fā)的免疫原性皮膚反應(yīng)。另外,光刺激反應(yīng)和光致敏反應(yīng)的發(fā)生率、潛伏期、激發(fā)劑量及臨床表現(xiàn)等都有所不同。光刺激反應(yīng)及檢測方法光刺激反應(yīng)(光毒性)是什么?光刺激反應(yīng)指皮膚單次接觸化學(xué)物質(zhì),經(jīng)紫外線照射后,引發(fā)的一種皮膚毒性反應(yīng),臨床表現(xiàn)為曬斑、紅斑、水腫、色素沉著等。其引發(fā)機制大多是由于物質(zhì)在激發(fā)之后,產(chǎn)生的單線態(tài)氧、超氧陰離子自由基以及羥自由基等活性氧簇。
光刺激反應(yīng)(光毒性)的檢測方法傳統(tǒng)的光毒性測試方法有:動物皮膚的光照實驗和人體光斑貼實驗,以及近幾年發(fā)展的“如火如荼”的體外替代實驗。動物皮鈦光照試臉 人休光斑貼試臉雖然本號已經(jīng)推送了多篇介紹體外替代實驗的文章,這里還要再叨叨一下,即使做不到“書讀百遍其義自見”,也不要成為“最熟悉的陌生人”。體外替代試驗方法是用細胞、組織或者器官模型來代替動物或者人體,確定可檢測的指標(biāo),建立相配套的檢測方法。光毒篩選實驗已建立了多種方法,如3T3中性紅攝取法、角質(zhì)細胞試驗法等;還有對特定光毒機制進行研究的實驗,如紅細胞溶血法、組氨酸光氧化法等。這里簡單介紹兩種體外光毒性檢測方法。
基于細胞模型的3T3中性紅攝取法(參考OECD432標(biāo)準)附丨鱷基于細胞模型的3T3中性紅攝取法(參考OECD432標(biāo)準)附丨鱷4WID-41IIFiKI.ISI-:Ml*TFJtTlXi:IW-i'HI-Alla:JJir[|''5III:MPI'0.J52<PEF<5ikfl.L<Mf£<JO.lS這種方法的檢測路線是,先對細胞進行一定劑量的光照處理,用MTT法檢測細胞活力,隨后根據(jù)細胞存活率的大小來評判光毒性?;隗w外重組皮膚模型建立的檢測方法V活力檢測II清洗EmKin』出甦京an咸般下摘藥事體%基于體外重組皮膚模型建立的檢測方法V活力檢測II清洗EmKin』出甦京an咸般下摘藥事體%:聯(lián)15富.詵壬橫旦丈可的丙煩IV后暉育VI肌林化讀數(shù)VTT法制嗣Zan:這種方法,首先將待檢物涂抹在模型表面,或者液下給藥,處理一定時間,清洗之后UVA輻照處理,再用MTT法檢測組織的活力,進而評估待檢物的光毒性強弱。光致敏反應(yīng)及檢測方法光致敏反應(yīng)是什么?光致敏性的發(fā)生機理與皮膚致敏性的類似,不過光致敏性的誘發(fā)因素是光源(主要是UVA)。檢測的方法除了常規(guī)的DPRA法、h-CLAT法外,還有基于體外重組皮膚模型的EpiKutis-Genes
法,可以利用多種方法對光致敏反應(yīng)進行綜合的評估。SHDCNH2cn^DPFW法EpiKu(i&-Gene5j£h-CLATj£法,可以利用多種方法對光致敏反應(yīng)進行綜合的評估。SHDCNH2cn^DPFW法EpiKu(i&-Gene5j£h-CLATj£原理:親核親電共恰反應(yīng)戰(zhàn)溜:角匪搭刪泡反應(yīng)包括Nf掃 依據(jù):樹突狀細胞的潮活佶號通路的激活風(fēng)邈癥反麗化妝品原料中很多物質(zhì)存在光毒性或者光致敏性,但這種活性物在特定功效上又是“特長生”。這給原料商和品牌商帶來很多困惑,如:要不要放棄使用?添加量如何把握等?我們提供了一些參考方法和解決思路。光敏性原料功效檢測方法與案例以光敏感性原料抗衰功效的評估為例。體外功效評估時,首先,基于模型進行安全性評估;其次,基于安全性評估確定的最大安全濃度,進行功效性評價?;赨VA成纖維細胞所建立的衰老模型,測定原料或者成品的抗衰功效。細胞形態(tài)和細胞活力(MTT)所篩選的原料在最大安全濃度下,UVA處理后,細胞活力呈現(xiàn)下降趨勢【Sl(before)、S2(before)、S3(before)】,出現(xiàn)了明顯的死亡現(xiàn)象[比較明顯的白圈部分]。在測試光敏性原料功效時,采用了多種策略,其一對最大安全濃度倍比稀釋為不同濃度梯度,進行功效評價。其二將“先給藥后照射”的方式調(diào)整為“先照射后給藥”的方式,降低活性物的光毒性。mBiifars:矗詹藥再黑射物的光毒性。mBiifars:矗詹藥再黑射f■丈安全港臨}Aft*!1:先冶藥再關(guān)射鼎顧的1整嘩話11S1# a■昇 r- ?'ipffri調(diào)整評估策略(給藥、照射順序不變,給藥濃度降低一半),活性物處理后(SI、S2、S3),膠原蛋白明顯增加、MMP-1顯著降低,表現(xiàn)出很好的抗衰效果?;谌珜悠つw模型建立的衰老模型,測定原料或者成品的抗衰功效。利用相同的樣品,做了基于3D全層皮膚模型的抗衰功效檢測,檢測結(jié)果與上述案例類似,未做濃度、給藥順序調(diào)整時,在最大安全濃度范圍內(nèi),同樣會表現(xiàn)出光毒性;處理之后,樣品的抗衰功效比較明顯,不再贅述,感興趣的可掃描文章底部二維碼交流。
before組、before組、after組分別為給藥濃度調(diào)整前和調(diào)整后。調(diào)整后,真表皮連接處及真皮層活細胞密度均有明顯改善(左側(cè)組織結(jié)構(gòu)圖)。真皮中活細胞數(shù)量(右上角)有明顯增多(S1、S2、S3柱子比NC高)。右下角表皮層厚度也表現(xiàn)出相似結(jié)果。?S3tHrfWtArter: 再朋射cj毎"障低兩^-a*51IXifW*??S3tHrfWtArter: 再朋射cj毎"障低兩^-a*51IXifW*?同樣,上圖中,濃度處理后,S1、S2、S3組膠原蛋白W和⑷含量均有不同程度增加,尤其是S1組,含量增加非常明顯,這也說明S1組的原料有很好的抗衰功效。洋洋灑灑、啰里啰嗦又說了很多了,文章最后放個大招,光敏性物質(zhì)的抗衰功效體外評價策略,拿走不謝。
光敏性原料UVR-
EkUVR-
EkvivouVA-朋IJ. 芯;1r;|!ir細胞毒性檢測/..光毎性檢測含光敏件原料〔的化池品產(chǎn)品.* 安全漲度生活中接觸的涉及光敏性物質(zhì)的品類
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