兒童房間隔缺損堵閉術(shù)前后血鎳的變化

兒童房間隔缺損堵閉術(shù)前后血鎳的變化

金屬鈦合金廣泛應(yīng)用于許多醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，如畸形外科、口腔畸形校正、骨科等。近年來(lái)，由鎳鈦合金制成的封堵器開(kāi)始廣泛應(yīng)用于先天性心臟病的介入治療。Amplatzer房間隔封堵器1997年問(wèn)世后被廣泛應(yīng)用于臨床，逐漸代替外科手術(shù)。先天性心臟病封堵器鎳鈦合金材料中含有鎳55%，鎳鈦合金具有高回彈性，形態(tài)記憶，質(zhì)輕，耐疲勞和耐腐蝕等優(yōu)點(diǎn)。長(zhǎng)期接觸和吸入鎳可發(fā)生過(guò)敏性皮炎，還可以引起鼻炎、鼻竇炎、哮喘、肺癌。因此含鎳封堵器植入人體后對(duì)健康是否產(chǎn)生負(fù)面影響引起了越來(lái)越多的關(guān)注。本研究就我院心兒科2006年6月～12月進(jìn)行房間隔缺損封堵術(shù)治療房間隔缺損（atrialseptaldefect,ASD)52例，測(cè)量其封堵前后血鎳的改變。1數(shù)據(jù)和方法1.1年齡和理化指標(biāo)2006年在廣東省心血管病研究所心兒科進(jìn)行介入治療52例，年齡3～14歲，使用進(jìn)口Amplatzer封堵器患兒25例，男9例，女16例，年齡（9.3±3.5）歲，體質(zhì)量（28±10)kg，封堵器直徑（23±5)mm；使用國(guó)產(chǎn)先健封堵器患兒27例，男10例，女17例，年齡（7.3±3.7）歲，體質(zhì)量（26±14)kg，封堵器直徑（23±6)mm。術(shù)前經(jīng)體格檢查、心臟彩超、心電圖、X線胸片等檢查，證實(shí)為房間隔缺損，并成功完成房間隔缺損封堵術(shù)。所有患兒均在術(shù)前、術(shù)后靜脈使用抗生素3～5d，術(shù)后口服阿司匹林6個(gè)月，劑量為3～5mg/（kg·d）。1.2儀器和方法測(cè)量鎳的方法采用酶消解質(zhì)譜法。1.2.1試驗(yàn)型材料電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（ICP-MS）,Agilent7500a型；Babington霧化器、Ni采樣錐和截取錐；CETACTechnologies自動(dòng)進(jìn)樣器；10mlPE塑料消化管；Milli-QPlusAcademic超純水系統(tǒng)。1.2.2gc/ms溶液蛋白酶K:MERCK公司；超純水：電阻率在25℃時(shí)不小于18.2MΩ·cm-1；硝酸：MERCK公司；TritonX-100：超純級(jí)，CHARLAUCHEMIE；鎳金屬標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/L；在線內(nèi)標(biāo)液（Li,Sc,Ge,Y,In,Tb,Bi）:0.5mg/L,Agilent公司提供，編號(hào)5183-4680；質(zhì)譜調(diào)諧液（Li,Y,Ce,Tl,Co）:1μg/L,Agilent公司提供，編號(hào)5184-3566；血液樣本于-70℃保存。1.2.3蛋白質(zhì)k的制備以20%硝酸浸泡24h，洗滌器皿，再以去離子水沖洗干凈，超聲清洗2次，每次5min，最后以超純水蕩洗后方可使用。0.02%蛋白酶K配制：準(zhǔn)確稱取0.020g蛋白酶K，加超純水至100.0g，充分混勻備用。2%HNO3加0.002%TritonX-100混合液的配制：準(zhǔn)確稱取14.0g濃HNO3，加超純水至520.0g，再加入10.0μlTritonX-100，充分溶解混勻備用。1.2.4元素的質(zhì)量和內(nèi)標(biāo)元素的選擇以Sc,Ge為測(cè)定Ni的內(nèi)標(biāo)元素。選擇Ni質(zhì)量數(shù)60Ni。1.2.5血清n3和tri能力檢測(cè)血樣使用前從-70℃低溫冰箱中取出，室溫放至完全解凍后振蕩搖勻備用。取1.0ml全血樣本，加入2ml0.02%的蛋白酶K，劇烈振蕩20s,47℃恒溫4h，冷卻至室溫，加入7.0ml2%HNO3和0.002%TritonX-100混合液，振蕩混勻后上機(jī)分析。1.2.6引入儀器內(nèi)標(biāo)儀器點(diǎn)火穩(wěn)定后，用調(diào)諧液調(diào)整儀器各項(xiàng)指標(biāo)，使儀器靈敏度、氧化物、雙電荷、分辨率等各項(xiàng)指標(biāo)達(dá)到測(cè)定要求后，編輯測(cè)定方法、干擾方程及選擇各測(cè)定元素，引入在線內(nèi)標(biāo)，觀測(cè)內(nèi)標(biāo)靈敏度、調(diào)P/A因子，符合要求后，將試劑空白、標(biāo)準(zhǔn)系列、樣品分別引入儀器。選擇各元素內(nèi)標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)回歸方程分別計(jì)算出血鎳濃度。1.3封堵時(shí)患兒的血鎳通過(guò)測(cè)量指標(biāo)變化的趨勢(shì)比較采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，使用不同封堵器的病人的血鎳隨時(shí)間變化的趨勢(shì)比較采用重復(fù)測(cè)量資料的方差分析，其中以封堵器大小為協(xié)變量，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，球形檢驗(yàn)的檢驗(yàn)水準(zhǔn)，各測(cè)量時(shí)點(diǎn)血鎳的兩兩比較采用LSD法。2不同測(cè)量血鎳的單次給藥后病人的血鎳不全測(cè)量時(shí)點(diǎn)與封堵器種類、封堵器大小均無(wú)交互作用（F1=0.461P1=0.803F2=1.455P2=0.224），說(shuō)明使用不同封堵器的病人的血鎳隨時(shí)間變化的趨勢(shì)相同，使用大小不同的封堵器的病人的血鎳隨時(shí)間變化的趨勢(shì)也相同。兩組病人血鎳在各測(cè)量時(shí)點(diǎn)均相同（F=0.037,P=0.534），但是不同測(cè)量時(shí)點(diǎn)病人體內(nèi)的血鎳不全相同（F=11.267,P<0.001），其中封堵術(shù)后24h均有升高，第1個(gè)月隨訪時(shí)達(dá)到最高值，第3個(gè)月后開(kāi)始下降，到第6～9個(gè)月回到堵閉前水平，見(jiàn)表1；使用不同大小的封堵器的病人的血鎳相同（F=0.074P=0.707），說(shuō)明封堵器大小對(duì)血鎳無(wú)影響。3不同封堵器植入的血鎳鎳以多種形態(tài)存在于人類的周圍，正常成人每日要從食物中攝取鎳51～102μmol(300～600）μg。鎳是人體必需的微量元素，在體內(nèi)有重要的生理作用，正常人的血鎳低于0.34μmol/L(2μg/L）。高濃度的鎳在體內(nèi)長(zhǎng)期蓄積，具有致癌性、致畸性和中樞神經(jīng)系統(tǒng)毒性。不溶性鎳化合物NiS、NiO、Ni3S2等難以從人體清除，是鎳的主要致癌形式，體內(nèi)儲(chǔ)存Ni2+可緩慢釋放。而可溶解鎳NiCl2和NiSO4等很快被排出體外，致癌性較弱。鎳的致癌作用與其催化產(chǎn)生自由基有關(guān)。Sigler等用小羊建立鎳鈦合金封堵器植入的動(dòng)脈導(dǎo)管未閉動(dòng)物模型，發(fā)現(xiàn)5周后封堵器表面形成一層新生內(nèi)皮細(xì)胞膜，其下有成纖維細(xì)胞。廣東省心血管病研究所的謝育梅等用小豬建立了國(guó)產(chǎn)封堵器植入的房間隔缺損動(dòng)物模型，術(shù)后1個(gè)月，有一層較薄的半透明膜狀組織從封堵器邊緣往中央生長(zhǎng)，2個(gè)月見(jiàn)封堵器中央和邊緣均有光滑的膜狀組織覆蓋，3個(gè)月時(shí)已有較厚的白色纖維樣組織將封堵器包裹，6個(gè)月時(shí)，纖維組織更為致密。本研究通過(guò)對(duì)52例行房間隔缺損封堵術(shù)的患兒術(shù)前和術(shù)后血鎳測(cè)定，發(fā)現(xiàn)在術(shù)后第1個(gè)月時(shí)血鎳濃度達(dá)到最高值，第3個(gè)月后開(kāi)始下降，6～9個(gè)月回到堵閉前水平，與國(guó)外學(xué)者的報(bào)道一致。術(shù)后第1日血鎳升高考慮與封堵術(shù)中封堵器鈍化膜的磨損，以及封堵器表面新生內(nèi)膜未形成鎳鈦合金中時(shí)鎳析出相關(guān)。到3個(gè)月以后，封堵器表面形成新生內(nèi)皮細(xì)胞膜，鎳的析出減少。到第6個(gè)月，封堵器表面被致密纖維組織包裹。血鎳逐漸減少到封堵前的水平。本研究中血鎳在術(shù)后6～9月降低至術(shù)前水平，其原因?yàn)榉舛缕鞅砻嫘律鷥?nèi)膜和致密纖維組織包裹的形成，由此推測(cè)術(shù)后9個(gè)月后至術(shù)后更長(zhǎng)時(shí)間血鎳不會(huì)因?yàn)榉舛缕鞯脑蛟俅紊?。本研究比較國(guó)產(chǎn)先健ASD封堵器與Amplatzer封堵器植入人體后血鎳變化，表明ASD封堵術(shù)后24h、第1、3、6、9個(gè)月，國(guó)產(chǎn)先健ASD封