旋光度的測(cè)定（物理常數(shù)測(cè)定課件）

葡萄糖及果糖

旋光度的測(cè)定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解測(cè)定旋光度測(cè)定的意義。2.了解旋光儀的構(gòu)造，熟悉旋光儀的操作及注意事項(xiàng)，能規(guī)范操作自動(dòng)旋光儀。3.了解葡萄糖及果糖的物理性質(zhì)，學(xué)會(huì)比旋度的計(jì)算。二、實(shí)驗(yàn)原理葡萄糖化學(xué)式(C6H12O6),是自然界分布最廣且最為重要的一種單糖，它是一種多羥基醛。純凈的葡萄糖為無(wú)色晶體，有甜味但甜味不如蔗糖，易溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙醚。二、實(shí)驗(yàn)原理天然葡萄糖水溶液旋光向右，故屬于“右旋糖”。葡萄糖在生物學(xué)領(lǐng)域具有重要地位，是活細(xì)胞的能量來(lái)源和新陳代謝中間產(chǎn)物，即生物的主要供能物質(zhì)。植物可通過光合作用產(chǎn)生葡萄糖。在糖果制造業(yè)和醫(yī)藥領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用。二、實(shí)驗(yàn)原理果糖中含6個(gè)碳原子，也是一種單糖，是葡萄糖的同分異構(gòu)體，它以游離狀態(tài)大量存在于水果的漿汁和蜂蜜中，果糖還能與葡萄糖結(jié)合生成蔗糖。純凈的果糖為無(wú)色晶體，熔點(diǎn)為103～105℃,它不易結(jié)晶，通常為黏稠性液體，易溶于水、乙醇和乙醚。D-果糖是最甜的單糖。二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理比旋度是檢查某些藥品的純度和測(cè)定含量的重要方法。直線偏振光通過含有不對(duì)稱碳原子或某些光學(xué)活性的化合物液體或溶液時(shí),能引起旋光現(xiàn)象,使偏轉(zhuǎn)光的平面向左或向右旋轉(zhuǎn)。此種旋轉(zhuǎn)在一定條件下有一定的度數(shù),稱為旋光度(α)。二、實(shí)驗(yàn)原理因旋光度受溶液濃度、管長(zhǎng)、溫度、測(cè)定波長(zhǎng)等影響,為比較物質(zhì)的旋光性,通常規(guī)定:偏振光透過長(zhǎng)1dm且每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液,在一定波長(zhǎng)與溫度下測(cè)得的旋光度稱為比旋度(或旋光率),用[α]表示。它是每種旋光物質(zhì)特有的一種物理常數(shù),在藥物分析中用以對(duì)藥物進(jìn)行質(zhì)量鑒定。二、實(shí)驗(yàn)原理在一定的波長(zhǎng)和溫度下比旋光度[α]D20可以用下列關(guān)系式表示：溶液的比旋光度：

[α]D20

=αDt/（c·L）

二、實(shí)驗(yàn)原理[α]Dt：表示旋光性物質(zhì)在t℃、光源的波長(zhǎng)為λ時(shí)的比旋光度。光源的波長(zhǎng)一般用鈉光的D線，在20℃或25℃測(cè)定。如[α]D20（水）表示某旋光化合物以水為溶劑在20℃時(shí)在鈉光的D線下所測(cè)的比旋光度；

二、實(shí)驗(yàn)原理[α]D20：樣品的比旋光度（°）；[α]Dt：測(cè)定的比旋光度（°）；c:每100ml溶液中含有被測(cè)物質(zhì)的重量，g（按干燥品或無(wú)水物計(jì)算）密度（單位：g/cm3）；t：測(cè)定時(shí)樣品溶液的溫度，℃L:

光路長(zhǎng)度,即實(shí)驗(yàn)中所用旋光管長(zhǎng)度（dm）三、旋光測(cè)定計(jì)旋光計(jì)是用以測(cè)定物質(zhì)的旋光性能和旋光度大小的一種儀器，也稱旋光測(cè)定計(jì)或旋偏光計(jì)。是由光源、偏振鏡、樣品管、檢偏鏡和檢測(cè)器等幾個(gè)基本部件組成。光源使用鈉蒸氣燈，起偏器和檢偏器用Nicol棱鏡，起偏鏡固定不動(dòng)用來(lái)產(chǎn)生面偏振光，檢偏鏡用來(lái)測(cè)定偏振光。1.WZZ-2B自動(dòng)旋光儀2.旋光儀的工作原理光源起偏鏡偏振光樣品管檢偏鏡偏振光旋轉(zhuǎn)的角度四、實(shí)驗(yàn)材料1.儀器旋光儀1臺(tái)膠頭滴管1根容量瓶（25℃100ml）2個(gè)分析天平1臺(tái)稱量瓶1個(gè)玻璃棒1根量筒1個(gè)濾紙、擦鏡紙若干2.試劑葡萄糖（分析純）果糖（分析純）氨試劑五、實(shí)驗(yàn)操作步驟1.待測(cè)溶液的配制（已配制）—葡萄糖溶液：10%—果糖溶液：10%。2.用蒸餾水校正儀器零點(diǎn)3.測(cè)定溶液樣品的旋光度1.待測(cè)溶液的配制在分析天平上精密稱取干燥葡萄糖樣品約10g置于燒杯中，加蒸餾水適量，充分溶解后用玻璃棒引流至100ml容量瓶，再加入0.2ml濃氨水，用蒸餾水定容至刻度，搖勻，25℃下放置15分鐘。

2.用蒸餾水校正儀器零點(diǎn)

①檢查樣品室內(nèi)異物，將儀器電源插頭插入220V交流電源插座上。

②向上打開電源開關(guān)，這時(shí)鈉光燈在交流工作狀態(tài)下起輝，瞬時(shí)起輝點(diǎn)燃，但發(fā)光不穩(wěn)，經(jīng)五分鐘鈉光燈激活后，鈉光燈才發(fā)光穩(wěn)定。

2.用蒸餾水校正儀器零點(diǎn)

③打開測(cè)量開關(guān)，這時(shí)數(shù)碼管應(yīng)有數(shù)字顯示。

④將旋光管一端螺帽放上皮墊和蓋玻片（蓋玻片應(yīng)緊靠試樣管）接緊，從另一端注入蒸餾水，先洗滌旋光管后裝滿，將另一端玻片蓋上，放上皮墊，擰緊螺帽。

⑤將兩端通光面蓋玻片用換鏡紙擦干，旋光管中若有氣泡，應(yīng)先讓氣泡浮在凸頸處。2.用蒸餾水校正儀器零點(diǎn)

⑥然后將旋光管放入樣品室，蓋上箱蓋，待示數(shù)穩(wěn)定后，按清零按鈕。如測(cè)定值為停點(diǎn)，則使用復(fù)測(cè)按扭，記錄3次平均值。

⑦計(jì)算時(shí)應(yīng)扣除讀數(shù)即為零點(diǎn)。旋光管螺帽不宜旋得過緊，以免產(chǎn)生應(yīng)力影響讀數(shù)，旋光管放置時(shí)，應(yīng)注意標(biāo)記的位置和方向。3.測(cè)定溶液樣品的旋光度

①取出旋光管，倒出空白溶劑，注入待測(cè)試液少量，沖洗數(shù)次后裝滿溶液，按相同的位置和方向放入樣品室內(nèi)。蓋好箱蓋，儀器數(shù)顯窗將顯示出試樣品的旋光度。3.測(cè)定溶液樣品的旋光度

②逐次按下復(fù)測(cè)按鈕，重復(fù)讀幾次值，取平均值再扣除空白溶液的讀數(shù)，即為待測(cè)試品的旋光度，記下實(shí)驗(yàn)溫度。按公式計(jì)算比旋度值。實(shí)驗(yàn)結(jié)時(shí)立即將盛液