黃體酮環(huán)糊精包合物的制備及性質(zhì)考察

黃體酮環(huán)糊精包合物的制備及性質(zhì)考察

黃酮屬于激素類藥物，能保證子宮內(nèi)膜有足夠的血流，促進胚胎生長，不被排斥。它對臨床上的預(yù)測妊娠、標(biāo)準(zhǔn)溶出嬰兒出生也起著保護作用。由于黃體酮肝臟首過效應(yīng)大,不宜口服,肌肉注射又給患者帶來痛苦和感染的可能,因此,近年來探索其他的給藥途徑,如陰道、直腸等。然而,黃體酮在水中的溶解度很小,不易在直腸及陰道內(nèi)溶解和吸收,故生物利用度很低。β-環(huán)糊精(β-CD)具有環(huán)狀中空筒型,環(huán)外親水,環(huán)內(nèi)疏水的特殊結(jié)構(gòu)和性質(zhì),難溶性藥物經(jīng)其包合后,可隨β-CD的溶解而溶解。本實驗應(yīng)用β-CD將黃體酮制成包合物,現(xiàn)報道如下。1儀器、儀器和儀器黃體酮(浙江仙居藥廠,批號990626);β-CD(陜西省佳縣生物化學(xué)工業(yè)公司);無水乙醇(分析純);UV7500分光光度計(上海天美科學(xué)儀器有限公司);恒溫水浴箱(北京西城區(qū)醫(yī)療器械廠);2RS-8G智能溶出儀(天津大學(xué)無線電廠);FA/JA型電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)。2方法和結(jié)果2.1包組分的制備2.1.1實驗方法實驗2選擇共沉淀法制備包合物,分別選擇三因素(主客比,溫度,包合時間),三水平,以正交設(shè)計法安排實驗,并以包合物的收率、包合率為指標(biāo)綜合評價制備工藝。實驗結(jié)果表明,采用主客比1∶2,包合溫度40℃,包合時間4h為最佳制備工藝。2.1.2黃體酮的制備稱取β-CD適量,置于三口燒瓶中,于40℃恒溫水浴中加純化水制成飽和溶液,開動攪拌器。稱取黃體酮適量,用適量無水乙醇溶解后緩慢滴入三口瓶中,避光下操作,恒溫攪拌1h,停止加熱繼續(xù)攪拌3h。停止攪拌后,放置冰箱中冷藏過夜,減壓抽濾,用無水乙醇及純化水快速沖洗過濾物。過濾物40℃真空恒溫干燥至恒重。同法制備5批。2.2黃酮-cd包組分中黃酮的含量測定2.2.1掃描波長的選擇取適量黃體酮溶于無水乙醇中,取適量β-CD溶于純化水中,兩者均配成一定的濃度,用分光光度計在200~400nm波長之間進行掃描。結(jié)果在241nm處黃體酮有最大吸收,而β-CD在此波長處無吸收,故確定241nm為黃體酮的測定波長。2.2.2標(biāo)準(zhǔn)液的制備精密稱取干燥至恒重的黃體酮125mg,置100mL棕色量瓶中,加無水乙醇溶解,加至刻度搖勻。吸取2mL置25mL棕色量瓶中,用無水乙醇稀釋至刻度作為標(biāo)準(zhǔn)液,分別吸取標(biāo)準(zhǔn)液1,2,3,4,5,6,7mL各置25mL棕色量瓶中,并加無水乙醇至刻度。以無水乙醇為空白,在241nm處測各點吸收度A值,經(jīng)線性回歸,得回歸方程:A=2.479×10-4+525.9C,r=0.9999。2.2.3批包合物中黃體酮含量的測定精密稱取包合物約10mg,置50mL棕色量瓶中,加無水乙醇至刻度,搖勻。置超聲波振蕩器中超聲10min使溶解,置離心機上,離心(3000r·min-1)3min。上清液用0.45μm微孔濾膜過濾。取續(xù)濾液2mL,置25mL棕色量瓶中,加無水乙醇至刻度,以無水乙醇為空白,在241nm處測定吸收度A,代入標(biāo)準(zhǔn)方程中計算包合物中黃體酮含量,并計算產(chǎn)率,包合率。得5批包合物中黃體酮的平均含量為13.68%,RSD為1.87%;平均收率為58.26%,RSD為1.49%。2.3超聲波振蕩時間分別精密稱取黃體酮約10mg和包合物約86mg(約含黃體酮10mg)置于100mL棕色量瓶中,加純化水至刻度,置超聲波振蕩器中,于25℃恒溫振蕩,離心(3000r·min-1)3min。取上清液用0.45μm的微孔濾膜過濾,續(xù)濾液于241nm處測定吸收度A,求算溶解度,黃體酮為(9.33±0.21)mg·L-1,包合物為(35.1±0.3)mg·L-1(n=4)。2.4藥物分離、純化分別精密稱取黃體酮約20mg和包合物約170mg(約含黃體酮20mg)各4份,置于(37±0.5)℃恒溫的500mL純化水中,轉(zhuǎn)速100r·min-1。采用轉(zhuǎn)籃法,籃下置一0.45μm的微孔濾膜,當(dāng)藥物接觸介質(zhì)時起計時,分別在1,5,15,30,60,90,120min定位吸取2mL,放入10mL棕色量瓶中,用無水乙醇定容。用分光光度計在241nm處測定各點A值,計算累積釋放百分率,見表1。2.5處理數(shù)據(jù)兩樣品均數(shù)成組t檢驗,結(jié)果黃體酮與黃體酮β-CD包合物的溶解度和溶出度差異均有顯著性(P<0.05)。2.6紅外光譜測試對黃體酮,β-CD,黃體酮與β-CD的物理混合物(1∶2)及包合物4種物質(zhì)進行了紅外光譜測試。結(jié)果發(fā)現(xiàn),包合物與其他3種物質(zhì)在圖譜上有明顯差別,說明包合物已形成了一新的物相。3包合物的篩選黃體酮見光易分解,在實驗過程中應(yīng)避光操作,黃體酮經(jīng)β-CD包合后可以提高其穩(wěn)定性。本文用正交實驗篩選包合物的制備條件,其結(jié)果為:黃體酮