川參通注射液與頭孢菌素配伍的理化性狀及抗菌活性研究

川參通注射液與頭孢菌素配伍的理化性狀及抗菌活性研究

細(xì)菌感染是臨床上最常見的疾病之一。由于幾種頭孢菌素具有很強(qiáng)的抗菌作用和低毒，它被用作各種細(xì)菌感染疾病的主要抗生素。但由于抗生素的不規(guī)范使用或?yàn)E用等因素,已造成耐頭孢菌素的菌株廣泛形成和擴(kuò)散,造成了對(duì)某些細(xì)菌感染病癥治療上的困難。文獻(xiàn)報(bào)道許多中藥不但具有較強(qiáng)的抑菌或殺菌活性以及較低的毒、副作用,而且細(xì)菌也不易形成對(duì)中藥的抗藥性。川參通注射液是一種具有活血化瘀、抗炎消腫作用的純中藥制劑,目前已在臨床應(yīng)用于前列腺炎及良性前列腺增生的治療。本文將川參通注射液與頭孢菌素配伍后對(duì)其某些性狀及抗菌活性進(jìn)行了觀察,探討川參通與抗生素配伍對(duì)于治療細(xì)菌感染性疾病的應(yīng)用前景,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。1材料和方法1.1藥物、試劑和培養(yǎng)基料①川參通注射液:4毫升/支,棕色澄清溶液,批號(hào):000212,貴州瑞和制藥有限公司提供。②頭孢菌素,頭孢唑林注射劑:0.5克/瓶,批號(hào):B20010561,哈藥集團(tuán)制藥總廠提供。頭孢曲松注射劑:1克/瓶,批號(hào):010637,上海新亞藥業(yè)有限公司提供。頭孢拉定注射劑:0.5克/瓶,批號(hào):B20000852,哈藥集團(tuán)制藥總廠提供。頭孢噻肟注射劑:1克/瓶,批號(hào):20010306,四川長(zhǎng)征制藥股份有限公司提供。頭孢呋辛注射劑:750亳克/瓶,批號(hào):C029870,葛蘭素威康公司提供。③菌種:金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌、普通變形桿菌、銅綠假單胞菌、淋病奈瑟菌,均為本室保存菌種。④培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、淋球菌瓊脂培養(yǎng)基,杭州微生物試劑廠提供。血瓊脂培養(yǎng)基,本室自制。1.2這是配方法1.2.1目標(biāo)函數(shù)的要求用滅菌蒸餾水稀釋川參通注射液后加入營(yíng)養(yǎng)瓊脂、淋球菌瓊脂及血瓊脂培養(yǎng)基,使每毫升培養(yǎng)基含川參通注射液的終濃度(ml/ml)為1/5、1/10、1/20、1/40、1/60、1/80、1/100。用滅菌生理鹽水將各菌種稀釋成1億個(gè)/毫升的菌液,用接種環(huán)分別取一環(huán)菌液接種于含試藥的各相應(yīng)培養(yǎng)基上以及不含試藥的培養(yǎng)基上,置普通溫箱內(nèi)(淋病奈瑟菌置燭缸內(nèi))37℃培養(yǎng)24小時(shí)后觀察培養(yǎng)基上細(xì)菌的生長(zhǎng)情況判斷各試藥對(duì)該菌種的抑菌作用,以完全無菌生長(zhǎng)的試藥最高稀釋度作為該試藥的最低抑菌濃度。1.2.2終濃度的確定用滅菌蒸餾水分別稀釋各抗生素后加入營(yíng)養(yǎng)瓊脂、血瓊脂或淋球菌瓊脂培養(yǎng)基內(nèi),使每毫升培養(yǎng)基內(nèi)分別含各抗生素的終濃度(μg/ml)成200、100、50、20、10、5、2、1、0.5、0.1、0.05、0.01、0.005、0.001、0.0005,傾注平板。按1.2.1方法接種細(xì)菌、培養(yǎng)和觀察結(jié)果。1.2.3頭孢菌素/川參通的水回用水培養(yǎng)基分別用4ml滅菌蒸餾水稀釋頭孢菌素注射劑后與4ml川參通注射液混勻,使每毫升配伍液含頭孢菌素及川參通的含量分別為:頭孢唑林/川參通62.5mg/0.5ml,頭孢曲松/川參通125mg/0.5ml,頭孢拉定/川參通62.5mg/0.5ml,頭孢噻肟/川參通125mg/0.5ml,頭孢呋辛/川參通93.75mg/0.5ml。按文獻(xiàn)方法用滅菌蒸餾水以倍比稀釋法分別稀釋各混合物并加入營(yíng)養(yǎng)瓊脂、血瓊脂和淋球菌瓊脂培養(yǎng)基內(nèi),制備成含不同濃度和不同種類頭孢菌素/川參通的瓊脂平板。按1.2.1方法接種細(xì)菌、培養(yǎng)和觀察結(jié)果。1.2.4最低殺菌濃度測(cè)定分別取MIC試驗(yàn)中無菌生長(zhǎng)的接種細(xì)菌處的瓊脂接種于不含試藥的相應(yīng)瓊脂培養(yǎng)基上,置普通溫箱或燭缸內(nèi)37℃培養(yǎng)24小時(shí)后觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況判斷試藥對(duì)該菌種的殺菌作用,以完全無菌生長(zhǎng)的試藥最高稀釋度作為該試藥的最低殺菌濃度。1.2.5芽孢桿菌用蒸餾水稀釋各頭孢菌素注射液使終濃度分別為頭孢唑林125mg/ml,頭孢曲松250mg/ml,頭孢拉定125mg/ml,頭孢噻肟250mg/ml,頭孢呋辛93.75mg/ml。分別取4ml各頭孢菌素溶液與4ml川參通注射液混合,肉眼觀察各頭孢菌素-川參通配伍液有無沉淀、絮狀物或混濁,用分光光度儀檢測(cè)其405nm波長(zhǎng)處的吸光度值(A405)。2結(jié)果2.1對(duì)三大病原菌mic和b川參通注射液對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC和MBC均為1/40;表皮葡萄球菌的MIC為1/20,MBC為1/10;對(duì)大腸埃希菌的MIC和MBC均為1/5;對(duì)普通變形桿菌的MIC和MBC均為1/20;對(duì)銅綠假單胞菌的MIC和MBC均為1/20;對(duì)淋病奈瑟菌的MIC為1/5,MBC>1/5;對(duì)肺炎克雷伯菌的MIC和MBC均>1/5。2.2對(duì)細(xì)菌mic和mic的測(cè)定頭孢唑林對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC和MBC,5μg/ml;對(duì)表皮葡萄球菌的MIC為0.5μg/ml,MBC為50μg/ml;對(duì)淋病奈瑟菌的MIC和MBC,50μg/ml。頭孢曲松對(duì)大腸埃希菌的MIC和MBC,0.5μg/ml:對(duì)普通變形桿菌的MIC和MBC,0.01μg/ml;對(duì)淋病奈瑟菌的MIC和MBC,2μg/ml。頭孢拉定對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC為2μg/ml,MBC為50μg/ml。頭孢噻肟對(duì)銅綠假單胞菌的MIC和MBC,50μg/ml。頭孢呋辛對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC為0.5μg/ml,MBC為20μg/ml;對(duì)大腸埃希菌的MIC為5μg/ml,MBC為20μg/ml;對(duì)普通變形桿菌的MIC為50μg/ml,MBC>50μg/ml;對(duì)肺炎克雷伯菌的MIC為50μg/ml,MBC>50μg/ml,見表1、2。2.3菌株mic頭孢唑林(μg/ml)/川參通(μg/ml)對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC<0.0005/0.000004,MBC為0.1/0.0008;對(duì)表皮葡萄球菌的MIC<0.0005/0.000004,MBC為0.05/0.0004;對(duì)淋病奈瑟菌的MIC為0.001/0.000008,MBC為0.5/0.004。頭孢曲松(μg/ml)/川參通(μg/ml)對(duì)大腸埃希菌的MIC為0.005/0.00002,MBC為0.5/0.002;對(duì)普通變形桿菌的MIC為0.01/0.00004,MBC為0.01/0.00004;對(duì)淋病奈瑟菌的MIC為0.1/0.0004,MBC為0.1/0.0004。頭孢拉定/(μg/ml)川參通(μg/ml)對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC為1/0.008,MBC為5/0.04。頭孢噻肟(μg/ml)/川參通(μg/ml)對(duì)銅綠假單胞菌的MIC為5/0.02,MBC為50/0.2。頭孢呋辛(μg/ml)/川參通(μg/ml)對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC為0.05/0.000213,MBC為5/0.0213;對(duì)大腸埃希菌的MIC為0.5/0.00213,MBC為5/0.0213;對(duì)普通變形桿菌的MIC為0.5/0.00213,MBC為20/0.0826;對(duì)肺炎克雷伯菌的MIC為50/0.213,MBC>50/0.213,見表1、2。2.4perrin-c-有關(guān)部門藥物制備的物理性質(zhì)頭孢菌素-川參通配伍液的外觀均為棕色澄清液體,未見沉淀、混濁或絮狀物,見表3。3黃連素的配伍使用自抗生素被發(fā)現(xiàn)與使用以來,人類由微生物引起的許多感染癥及其相關(guān)疾病得到了有效的控制。但抗生素的廣泛使用或?yàn)E用也造成了細(xì)菌耐藥性的廣泛形成并且迅速擴(kuò)散,導(dǎo)致越來越多耐藥菌株的出現(xiàn)和治療上的困難。人們?cè)噲D采用加大抗生素劑量和延長(zhǎng)療程的方法克服細(xì)菌的耐藥性及其引起的感染,但由此造成的抗生素對(duì)人體的毒副作用及其引起菌群失調(diào)所致的二重感染的病例卻不斷增多。盡管人們不斷地努力研究和開發(fā)新的抗菌藥物,但對(duì)新藥產(chǎn)生耐藥性的菌株可很快形成與擴(kuò)散。目前,探討細(xì)菌耐藥性形成與擴(kuò)散的機(jī)制并對(duì)其采取有效的防范措施已成為醫(yī)學(xué)界最關(guān)注的課題之一。文獻(xiàn)報(bào)道,許多天然藥物具有抗菌活性,不但可通過直接作用于細(xì)菌等微生物的細(xì)胞結(jié)構(gòu)或某個(gè)代謝環(huán)節(jié)而發(fā)揮抗菌作用,而且還可通過調(diào)節(jié)宿主的免疫和生理機(jī)能發(fā)揮抗菌和抗炎活性。此外,這些天然藥物還具有毒副作用較小、細(xì)菌不易對(duì)其產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)。已證實(shí)黃連素具有促進(jìn)細(xì)菌質(zhì)粒丟失的作用,這對(duì)于防止由于耐藥性質(zhì)粒轉(zhuǎn)移所導(dǎo)致的耐藥性菌株的形成與擴(kuò)散具有重要的意義。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,川參通注射液分別與頭孢唑林、頭孢曲松、頭孢拉定、頭孢噻肟、頭孢呋辛配伍后沒有發(fā)生混濁或沉淀等反應(yīng),配伍液對(duì)金黃