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文檔簡(jiǎn)介
基因工程的應(yīng)用
第六單元
遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)DNA的復(fù)制一、DNA的復(fù)制1.概念:以親代DNA為模板,合成子代DNA的過(guò)程。2.時(shí)間:細(xì)胞分裂前的間期3.場(chǎng)所:真核:主要在細(xì)胞核,也可以在線粒體、葉綠體原核:擬核、細(xì)胞質(zhì)(質(zhì)粒)病毒:宿主細(xì)胞中解旋酶解開(kāi)4.過(guò)程:解旋酶解開(kāi)雙
螺
旋
結(jié)
構(gòu)母鏈脫氧核苷酸DNA聚合酶堿基互補(bǔ)配對(duì)4.過(guò)程:解旋酶解開(kāi)雙
螺
旋
結(jié)
構(gòu)母鏈脫氧核苷酸DNA聚合酶堿基互補(bǔ)配對(duì)4.過(guò)程:ATCGATAGCTATCGATAGCTTAGCTATCGA1個(gè)DNA分子2個(gè)完全相同的DNA分子(堿基排列順序相同)5.結(jié)果:6.特點(diǎn):半保留復(fù)制(方式)邊解旋邊復(fù)制多起點(diǎn)(真核)
雙向(每條子鏈的合成方向均從自身5'端→3'端)7.精準(zhǔn)復(fù)制的原因:①DNA獨(dú)特的雙螺旋結(jié)構(gòu),為復(fù)制提供精確的模板。②通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì),保證了復(fù)制能夠準(zhǔn)確地進(jìn)行。8.意義:DNA通過(guò)復(fù)制,使遺傳信息從親代傳給了子代,從而保證了物種的相對(duì)穩(wěn)性,保持了遺傳信息的連續(xù)性,使得種族得以延續(xù)。①全保留復(fù)制:新復(fù)制出的分子直接形成,完全沒(méi)有舊的部分;②半保留復(fù)制:形成的分子一半是新的,一半是舊的;③彌散復(fù)制:新復(fù)制的分子中新舊都有,但分配是隨機(jī)組合的復(fù)制一次復(fù)制一次復(fù)制一次DNA分子復(fù)制的猜測(cè)二、DNA半保留復(fù)制的實(shí)驗(yàn)證據(jù)2、研究方法:假說(shuō)-演繹法4、實(shí)驗(yàn)材料:大腸桿菌5、實(shí)驗(yàn)技術(shù):同位素標(biāo)記法和離心技術(shù)1、實(shí)驗(yàn)者:美國(guó)生物學(xué)家梅塞爾森和斯塔爾
密度梯度離心法3、實(shí)驗(yàn)假設(shè):DNA以半保留的方式復(fù)制6、實(shí)驗(yàn)原理:含15N的雙鏈DNA密度大,含14N的雙鏈DNA密度??;一條鏈含14N、一條鏈含15N的雙鏈DNA密度居中。(重:15N/15N—DNA)(輕:14N/14N—DNA)(中:14N/15N—DNA)實(shí)驗(yàn)過(guò)程①用同位素15N標(biāo)記大腸桿菌的DNA分子②將15N的大腸桿菌放在14N的培養(yǎng)基中培養(yǎng)③提取DNA,離心④觀察試管中DNA的位置預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果親代DNA位于下部(15N/15N)第一代DNA位于中部(15N/14N)第二代DNA一半位于中部,一半位于上部(14N/14N和15N/14N)重帶中帶輕帶重帶中帶輕帶重帶中帶輕帶14N14N14N15N親代DNA子一代DNA子二代DNA重帶中帶輕帶重帶中帶輕帶重帶中帶輕帶15N15N15N14N14N14N15N14N14N14N15N14N14N15N結(jié)論:DNA分子的復(fù)制方式:半保留復(fù)制演繹推理三、DNA復(fù)制相關(guān)計(jì)算只含14N
的分子__________個(gè)將含有15N標(biāo)記的DNA分子(親代)放到含14N的培養(yǎng)液中連續(xù)復(fù)制n次15N15N15N14N親代復(fù)制1次15141415復(fù)制2次1514141414141415
復(fù)制3次15141414141414151414141414141414......復(fù)制n次共有DNA分子
個(gè)2n含15N
的分子__________個(gè)2含14N
的分子__________個(gè)2n只含15N
的分子__________個(gè)2n-201、分子數(shù)目計(jì)算:三、DNA復(fù)制相關(guān)計(jì)算將含有15N標(biāo)記的DNA分子(親代)放到含14N的培養(yǎng)液中連續(xù)復(fù)制n次15N15N15N14N親代復(fù)制1次15141415復(fù)制2次1514141414141415
復(fù)制3次15141414141414151414141414141414......復(fù)制n次脫氧核苷酸鏈共
條2n+1含15N
的鏈__________條2含14N
的鏈__________條2n+1-22、脫氧核苷酸鏈數(shù)計(jì)算:在解決這類問(wèn)題時(shí),先畫(huà)出細(xì)胞分裂中染色體行為變化,再畫(huà)DNA,再補(bǔ)全染色體,染色體中只要有一條脫氧核苷酸單鏈被標(biāo)記,則認(rèn)為該染色體含有放射性標(biāo)記。“四步法”解決細(xì)胞分裂中染色體標(biāo)記問(wèn)題過(guò)程圖解復(fù)制一次(母鏈標(biāo)記,培養(yǎng)液不含標(biāo)記同位素):轉(zhuǎn)至不含放射性培養(yǎng)液中再培養(yǎng)一個(gè)細(xì)胞周期:
規(guī)律總結(jié)(1)有絲分裂中染色體標(biāo)記情況若只復(fù)制一次,產(chǎn)生的子染色體都帶有標(biāo)記;若復(fù)制兩次,產(chǎn)生的子染色體只有一半帶有標(biāo)記過(guò)程圖
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