血栓與止血檢驗的基本方法：血小板的檢驗

2023/11/251第十一章血栓與止血檢驗的基本方法

第三節(jié)血小板的檢驗（P332-340）

一、血塊收縮試驗（篩查試驗，P324）二、血小板粘附試驗三、血小板聚集試驗四、血小板膜糖蛋白五、血小板活化分析六、血小板第3因子有效性七、血小板自身抗體八、血小板生存時間（略）2023/11/252一、血塊收縮試驗

（clotretractiontest，CRT）分為定量法、試管法和血漿法原理：全血或血漿凝固后，由于血小板收縮使血清從纖維蛋白網(wǎng)眼中擠出而使血塊縮小，觀察血清占原有全血量（如定量法、試管法）或血漿量（如血漿法）的百分比（即血塊收縮率）2023/11/253CRT參考值試管法：2h開始收縮，18-24h完全收縮定量法：48%-64%血漿法：＞40%

2023/11/254CRT臨床意義下降：見于血小板減少癥、血小板增多癥、血小板無力癥、低或無纖維蛋白原血癥、嚴重凝血功能障礙、異常球蛋白血癥（專）、紅細胞增多癥（定量法及試管法）等增加：纖維蛋白穩(wěn)定因子缺乏癥、嚴重貧血（定量法及試管法）應(yīng)用評價：半定量，干擾因素較多2023/11/255二、血小板黏附試驗

（plateletadhensiontest，PAdT）原理：用一定量的抗凝血與一定表面積的玻璃表面接觸一定時間，血小板可黏附于帶負電荷的玻璃表面，根據(jù)黏附前后的血小板數(shù)量之差，得出血小板黏附百分率。

參考范圍：不同方法參考范圍各不相同2023/11/256PAdT操作（以玻璃珠柱法為例）5s5s5s5s血小板黏附率（%）=黏附前血小板數(shù)-黏附后血小板數(shù)黏附前血小板數(shù)×100%臨床意義：減低:先天性和繼發(fā)性血小板功能異常（以后者多見），如VWD、巨大血小板綜合征、服用抗血小板藥物等增加:見于血栓前狀態(tài)和血栓形成性疾病，如高血壓病、糖尿病、妊高征、心腦血管病等應(yīng)用評價：影響因素較多，難于標準化2023/11/257三、血小板聚集試驗

（plateletaggregationtest，PAgT）血小板聚集試驗有光學比濁法和全血電阻法比濁法原理：用乏血小板血漿和富含血小板血漿調(diào)整透光度，在富含血小板血漿的比濁管中加入誘導劑，儀器自動攪拌，隨著血小板聚集的發(fā)生其透光度逐漸增高，記錄儀自動記錄血小板透光度的變化（即血小板聚集曲線）參數(shù)判斷血小板的聚集功能

ADP

腎上腺素花生四烯酸瑞斯托霉素膠原常用的誘導劑：2023/11/258比濁法血小板聚集試驗原理PRP為加誘導劑之前PRP為加誘導劑之后2023/11/259血小板聚集儀2023/11/2510A:血小板無力癥患者血小板對ADP無反應(yīng)

B:正常人血小板對低濃度ADP呈可逆性聚集

C:正常人血小板對中濃度ADP呈雙峰、不可逆性聚集

D:正常人血小板對高濃度ADP呈單峰、不可逆性聚集

E：VWD患者血小板對瑞斯托霉素無反應(yīng)

F:正常人血小板對瑞斯托霉素有反應(yīng)2023/11/2511PAgT參考值最大聚集率

1分鐘聚集率聚集曲線斜率不同儀器、不同誘導劑及濃度參考值有別各實驗室應(yīng)建立自己實驗室的參考值2023/11/2512PAgT臨床意義減低：血小板無力癥、血小板貯存池病（無第二個峰）、

VWD（瑞斯托霉素作為誘導劑時，常減低）、巨大血小板綜合征、低或無Fg血癥、MDS、MPD、急性白血病、肝硬化、尿毒癥、服用抗血小板藥物、ITP、細菌性心內(nèi)膜炎、維生B12缺乏癥等。增加：見于血栓前狀態(tài)和血栓形成性疾病，如糖尿病、腎小球腎炎、腎病綜合征、心臟瓣膜置換術(shù)后、心絞痛、心肌梗死、腦梗死、深靜脈血栓形成、抗原-抗體復(fù)合物反應(yīng)、高脂飲食、口服避孕藥、吸煙等。2023/11/2513PAgT應(yīng)用評價比濁法與電阻法各有優(yōu)缺點比濁法PRP的血小板濃度對結(jié)果影響較大不同激活劑其檢測目的不甚相同臨床上主要用于抗栓治療的監(jiān)測2023/11/2514原理放射免疫法（RIA）或流式細胞術(shù)（FCM）檢測參考范圍：不同試劑參考值有別

臨床意義GPⅠb缺乏見于巨大血小板綜合征

GPⅡb/Ⅲa缺乏見于血小板無力癥增加見于血栓前狀態(tài)與血栓性疾病評價本試驗的特異性和敏感性高，故對診斷巨大血小板綜合征和血小板無力癥具有診斷價值。

標本采集須注意，避免體外激活，出現(xiàn)假陽性。四、血小板膜糖蛋白2023/11/2515五、血小板活化分析流式細胞儀檢測：血小板膜磷脂酰絲氨酸和凝血因子活化血小板膜糖蛋白分子標志物

ELISA或RIA檢測：血漿

-TG和PF4TXB2、尿11-DH-TXB2參考范圍：不同方法或試劑參考范圍有別2023/11/2516血小板活化分析臨床意義：1、血栓前狀態(tài)與血栓性疾病血小板活化程度升高，顆粒釋放反應(yīng)功能亢進。2、抗栓治療的監(jiān)測了解抗血小板藥物應(yīng)用前后血小板活化的情況，有助于選擇最佳治療方案和療效觀察。3、血小板功能缺陷病的診斷血小板活化表達減少見于先天性或獲得性血小板α顆粒缺乏癥等。

2023/11/2517血小板活化分析應(yīng)用評價：1、血小板活化分析反映了血小板在體內(nèi)被激活及釋放的情況，但在體外檢測過程中血小板容易被激活如采血不順利、所用器材不符合要求等，而使結(jié)果偏高。通常：來自體內(nèi)激活者

-TG/PF4之比約為5∶1，來自體外激活者

-TG/PF4之比約為2∶1。2、TXB2常與6-K-PGF1α同時檢測，并報告兩者的比值。尿11-DH-TXB2測定不受體外血小板活化的影響，因此更能真實反映血小板在體內(nèi)被活化情況。3、由于這類試驗影響因素較多，臨床上應(yīng)用較少。2023/11/2518六、血小板第3因子有效性檢測

（plateletfactor3availabilitytest，PF3aT）

本試驗利用白陶土作為血小板的活化劑促進PF3形成，用氯化鈣作為凝血反應(yīng)的啟動劑，用正常血漿、患者血漿的PPP和PRP相互組合，測定各自的凝固時間，比較各組時間，可判斷PF3有否缺陷。原理：2023/11/2519PF3aT有效性測定分組組別患者血漿（ml）正常血漿（ml）PRPPPPPRPPPP10.1

0.12

0.10.1

30.10.1

4

0.10.12023/11/2520PF3aT參考值

第3組、第4組分別為患者和正常人（作為對照管），患者PF3有缺陷或內(nèi)源凝血因子有缺陷時第3組凝固時間比第4組長。當?shù)?組較第2組凝固時間延長5s以上，即為PF3有效性減低。組別患者血漿（ml）正常血漿（ml）PRPPPPPRPPPP

10.1

0.12

0.10.1

30.10.1

4

0.10.12023/11/2521PF3aT臨床意義

減低：見于先天性血小板PF3a缺乏癥、血小板無力癥、肝硬化、尿毒癥、彌散性血管內(nèi)凝血、異常蛋白血癥、

SLE、ITP、MDS、急性白血病及某些藥物影響等。應(yīng)用評價：由于檢測結(jié)果的變異較大，臨床上很少使用。2023/11/2522七、血小板自身抗體

（plateletassociatedimmunoglobulin，PAIg）

在某些免疫性疾病中，血小板膜表面存在著抗體（IgG、IgA、IgM）或