我國(guó)主要蚊媒研究概況

我國(guó)主要蚊媒研究概況

蚊子不僅吸收和傳播嚴(yán)重的血液疾病。在我國(guó),蚊可傳播瘧疾,絲蟲(chóng)病(斑氏絲蟲(chóng)病和馬來(lái)絲蟲(chóng)病),流行性腦炎(ep-idemicencephalitisB)和登革熱/登革出血熱(DF/DHF)。在國(guó)外,蚊還可傳播黃熱病(yellowfever)、西尼羅河熱(westmilefever)、基孔肯雅熱(chikunguanyafever)、東方馬腦炎(easternequineencephalomyelitis,EEE)西方馬腦炎(westernequineen-cephalogelitisWEE)等多種病毒病和帝紋絲蟲(chóng)病及惡絲蟲(chóng)病。蚊媒介研究是流行病學(xué)和防治的首要工作之一?，F(xiàn)就我國(guó)主要蚊媒研究概況綜述如下。1中華按蚊an.mewell瘧疾是由4種人體瘧原蟲(chóng)所引起的世界性蚊媒傳染病。在我國(guó),瘧疾也是長(zhǎng)期危害人民健康的嚴(yán)重疾病之一。目前全球仍有100多個(gè)國(guó)家約22億人受瘧疾威脅,每年臨床病例3~5億。死亡人數(shù)約270萬(wàn)。瘧疾媒介較早受到寄生蟲(chóng)學(xué)和醫(yī)學(xué)昆蟲(chóng)學(xué)工作的重視。例如1937年,已故馮蘭州教授把下列7種按蚊作為我國(guó)的重要媒介:五斑按蚊(Anophelesmaculipennis,Meign,1818);薩氏按蚊(An.saeharovi,Favre,1903);中華按蚊(An.sinensis,Wiedemamm,1928);庫(kù)態(tài)按蚊(An.Culicifa-cies,Giles,1910);杰普爾按蚊(An.Jeyporiensis,James,1902);微小按蚊(An.Minimus,Theobald,1901);帕氏按蚊(An.Pat-toni,Christophers,1926)。通過(guò)近半個(gè)世紀(jì)大量自然腺感染率和流行病學(xué)調(diào)查,結(jié)合按蚊生物系統(tǒng)學(xué)和嗜血性等重要生態(tài)習(xí)性的研究,已澄清了重要媒介的種類(lèi),并對(duì)它們的媒介關(guān)系有了深入的了解,在很大程度上改變了以前的認(rèn)識(shí)［１］。在上述7種按蚊中,現(xiàn)知除中華按蚊、微小按蚊和杰普爾按蚊外,與我國(guó)瘧疾的傳播無(wú)關(guān)或關(guān)系不大。值得一提的是,五斑按蚊是米賽按蚊(An.Messeae,Falleroni,1926)鑒定之誤,它可能是北疆瘧疾的媒介。另外,有些國(guó)外文獻(xiàn)仍把帕氏按蚊稱(chēng)作華北的重要媒介［１］。我國(guó)瘧疾的重要媒介實(shí)為下列4種。1.1嗜人按蚊(An.anthropophagus,Xu&Feng,1975)該蚊是我國(guó)獨(dú)有蚊種,分布在北緯34(以南地區(qū),是其分布區(qū)域瘧疾和馬來(lái)絲蟲(chóng)病的重要媒介。嗜人按蚊是中華按蚊復(fù)合組種類(lèi)。兩者幼蟲(chóng)、蛹和成蚊的形態(tài)非常近似,過(guò)去一直被認(rèn)作是中華按蚊,直到20世紀(jì)50年代末才根據(jù)卵的形態(tài)的比較、雜交、DNA限制酶切長(zhǎng)度、DNA探針以及rDNA轉(zhuǎn)錄間隔2區(qū)(rDNAITS2)序列研究,確認(rèn)為中華按蚊不同的一蚊種［１］。嗜人按蚊與中華按蚊的生態(tài)習(xí)性和對(duì)惡性瘧原蟲(chóng)的易感性明顯不同。雌蚊偏吸人血和內(nèi)棲,對(duì)間日瘧原蟲(chóng)和惡性瘧原蟲(chóng)高度或比較易感。因此,它是一個(gè)高效的瘧疾最重要的傳播媒介。嗜人按蚊的防制主要采取DDT室內(nèi)滯留噴灑或擬除蟲(chóng)菊酯處理蚊帳,可以明顯降低室內(nèi)外成蚊密度和瘧疾發(fā)病率［１］。1.2中華按蚊該蚊廣布除新疆和青海以外的全國(guó)各省區(qū),由于雌蚊人蓄血液兼吸,并以刺吸家畜血液的居多,對(duì)惡性瘧原蟲(chóng)僅低度易感,其傳播作用遠(yuǎn)遜于嗜人按蚊。它是廣大平原,特別是水稻種植區(qū)瘧疾和馬來(lái)絲蟲(chóng)病的重要媒介。這種按蚊雖然不是高效的傳播者,但由于種群數(shù)量大,是以維持瘧疾的低度流行,甚而在適合條件下,引起暴發(fā)性流行［１］。中華按蚊和嗜人按蚊經(jīng)常存在于同一區(qū)域,因而采取上述防制措施,實(shí)際往往兼及兩種媒介。但是由于中華按蚊半內(nèi)棲,這些措施的防制效果不如對(duì)嗜人按蚊。兩種成蚊、蛹和幼蟲(chóng)形態(tài)非常近似,長(zhǎng)期被視為同一蚊種,我國(guó)學(xué)者20世紀(jì)70年代中期,根據(jù)卵甲板的寬窄,給予區(qū)分［１］。近年來(lái),嗜人按蚊與中華按蚊DNA限制性片段的長(zhǎng)度有明顯差異,并建立了DNA探針區(qū)分兩蚊,根據(jù)核糖體DNA第二內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(rDNA-ITS2)序列分析比較中華按蚊的差異為28.8%,更進(jìn)一步證明嗜人按蚊為一個(gè)獨(dú)立種［１～３］。馬雅軍等［２］用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA技術(shù)研究我國(guó)9省10個(gè)代表點(diǎn)的中華按蚊自然群體的遺傳多態(tài)現(xiàn)象,根據(jù)23個(gè)等位基因位點(diǎn)進(jìn)行分析,結(jié)果顯示中華按蚊群體的遺傳結(jié)構(gòu)基本相同。1.3大劣按蚊大劣按蚊是一個(gè)包括A、B、C、D、E型以及林棲按蚊(An.nemophilous,PeytonetRamalingam,1988)和高砂按蚊(An.takasagoensis,Morishita,1946)的復(fù)合體,我國(guó)對(duì)大劣按蚊的分類(lèi)地位和傳瘧作用已有綜合介紹。通過(guò)核型、卵的電鏡掃描以及rDNA-ITS2片段PCR擴(kuò)增,已知我國(guó)大劣按蚊存在有A和D兩型［４］。海南島的大劣按蚊屬A,是該島叢林山麓瘧疾的主要媒介,有很高的媒介效能;云南省的是D型,也有瘧原蟲(chóng)自然腺感染雌蚊發(fā)現(xiàn),表明在當(dāng)?shù)匾财鸬蒋懠矀鞑プ饔茫郏矗?。王冬等［５］?yīng)用線(xiàn)粒體DNA細(xì)胞色素氧化酶亞單位I(mtDNA-COI)基因序列特征闡明我國(guó)大劣按蚊A,D群體的遺傳差異和分化水平。結(jié)果顯示大劣按蚊A的單倍型共3個(gè)。大劣接蚊D的單倍型共6個(gè),均勻分布于3個(gè)群體。勐臘群體內(nèi)錯(cuò)配平均數(shù)(7.4412)明顯大于江城群體(1.2794)和海南群體(1.0513),表明勐臘群體內(nèi)個(gè)體間分化程度最大。分步AMOVA的計(jì)算結(jié)果顯示群體問(wèn)基因交流有限(Fst=0.7999),群體間變異(79.99%)明顯大于群體內(nèi)變異(20.01%)。揭示我國(guó)大劣按蚊A、D群體之間的遺傳差異較小,個(gè)體間的分化水平較高［５］。1.4微小按蚊它分布北緯32(以南,特別是丘陵壩子等地區(qū)的重要媒介。幼蟲(chóng)主要滋生在緩流,如小溪、溝渠、滲出水等。早在20世紀(jì)50年代,我國(guó)已發(fā)現(xiàn)海南島和大陸的微小按蚊存在嗜血性和棲息上的差異,即海南島的主吸人血和內(nèi)棲,而大陸的則不同程度地吸取家畜血液和外棲,這種差別也反映在它們的媒介效能。微小按蚊它歸屬于按蚊屬(GenusAnopheles)塞蚊亞屬(Subgenuscellia)邁蚊系(Myzomyiaseries)微小按蚊種團(tuán)(An.minimusgroup)近緣種包括:烏頭按蚊(An.aconitus,Doentz,1912)、溪流按蚊(An.fluviatilis,James,1902)和瓦容按蚊(An.varuna)［１～６］。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外研究認(rèn)為微小按蚊為一復(fù)合體,但分型情況還未統(tǒng)一,有分為A、B型,或分為A、B、C型,并可能存在其他隱型。微小按蚊近緣種間以及微小按蚊復(fù)合體內(nèi)各成員間成蟲(chóng)和(或)幼蟲(chóng)形態(tài)差別比較細(xì)微,并且該蚊存在較多個(gè)體變異,因而鑒別比較困難。而不同種,型蚊蟲(chóng)其生態(tài)習(xí)性,分布區(qū)域、媒介效能等方面存在差異,正確區(qū)分微小按蚊復(fù)合體成員及其近緣種,對(duì)于研究該蚊及制定有效的防瘧措施具有重要流行病學(xué)意義［７］。俞淵等［７，８］根據(jù)形態(tài)特征和行為習(xí)性將海南島該蚊分為A、B型。兩型在成蟲(chóng)翅脈斑型,食竇甲形態(tài),幼蟲(chóng)頭部顏齒數(shù),嗜血習(xí)性,棲息習(xí)性和DDT敏感性等方面存在較明顯差異。之后的生態(tài)學(xué)研究表明,隨著城鎮(zhèn)開(kāi)發(fā)和大規(guī)模使用殺蟲(chóng)劑,微小按蚊生態(tài)習(xí)性也發(fā)生變化,并且不同地理群體微小按蚊發(fā)生的生態(tài)環(huán)境,對(duì)瘧原蟲(chóng)敏感性及種群結(jié)構(gòu)等方面不盡相同。王學(xué)忠等［９］比較了云南省5個(gè)地理株微小按蚊酯酮同工酶譜的結(jié)果,各地理株之間酶譜存在一定差異,其中4個(gè)地理株進(jìn)行隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)DNA分析,也表明不同地理株存在遺傳分化。鄭彬等［１０，１１］應(yīng)用微衛(wèi)星錨定PCR技術(shù)研究研究云南不同地理來(lái)源微小按蚊的群體遺傳結(jié)構(gòu),結(jié)果顯示以多態(tài)位點(diǎn)比例衡量各種群的遺傳多態(tài)性,云南不同地區(qū)微小按蚊均共享較高多態(tài)性,其中元江(c)的變異程度較低,為43.3%,潞西(A)的變異程度較高,為78.6%。FST和(結(jié)果提示,微小按蚊的遺傳變異主要存在于種群內(nèi)部。微小按蚊A與c分別或兩者合并分析,Nm均大于1。系統(tǒng)樹(shù)主要分為兩支,元陽(yáng)(c)、大關(guān)(c)和勐臘(c)聚為一支;另一支分為元江(c)與潞西(A),新平(A)和臨滄(c),以及勐臘(A)共3層。提示各群體間遺傳距離部分與親緣種分類(lèi)有關(guān),未發(fā)現(xiàn)與地理距離相關(guān)。史慧勤等對(duì)我國(guó)微小按蚊廣西、云南、海南6個(gè)地理株和越南Caonguen株rDNA-ITS2PCR擴(kuò)增片段和序列差異作分析,獲得基因片段總長(zhǎng)為561(563bp,發(fā)現(xiàn)地理株間ITS2序列差異程度不同,分析表明元江株為微小按蚊C型;其余6個(gè)地理株為A型。應(yīng)用限制性?xún)?nèi)切酶Sau96Ⅰ對(duì)微小按蚊復(fù)合體rDNA-ITS2PCR擴(kuò)增片段作酶切分型,結(jié)果同樣顯示兩型差異［１２］。2淡色庫(kù)蚊的確定我國(guó)馬來(lái)絲蟲(chóng)病的主要媒介是嗜人按蚊和中華按蚊。這兩種按蚊研究的進(jìn)展已如上述。斑氏絲蟲(chóng)病的主要媒介是淡色庫(kù)蚊和致倦庫(kù)蚊。它們以及尖音庫(kù)蚊指明亞種和最近發(fā)現(xiàn)的騷擾庫(kù)蚊都屬尖音庫(kù)蚊復(fù)合體。陸寶麟等［４］建立了4個(gè)成員的實(shí)驗(yàn)室種群,對(duì)它們進(jìn)行了雜交、單糖、表皮碳?xì)浠衔镆约爸舅岬臍庀嗌V分析,雄蚊陽(yáng)莖DV/D和幼蟲(chóng)形態(tài)數(shù)值分析等一系列的研究,闡明了我國(guó)尖音庫(kù)蚊是包括4個(gè)亞種的復(fù)合體,致倦庫(kù)蚊并非如國(guó)外學(xué)者看作的獨(dú)立物種,淡色庫(kù)蚊也不是有些學(xué)者認(rèn)為的尖音庫(kù)蚊和致倦庫(kù)蚊的“中間型”。淡色庫(kù)蚊對(duì)殺蟲(chóng)劑抗性研究報(bào)告很多。王金福等［１３］采用分子雜交技術(shù)和限制性酶切片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP)分析鑒定多種酯酶等位基因具有明顯的選擇作用。雙硫磷品系為B1型;毒死蜱和敵百蟲(chóng)品系為B2型;馬拉硫磷品系為B1型和B1/B2雜合型。不同地區(qū)采集的種群表現(xiàn)出不同的酶型頻率分布。公茂慶等［１４］對(duì)淡色庫(kù)蚊細(xì)胞色素P450(CYP6F1)基因進(jìn)行了克隆與表達(dá)差異的鑒定。結(jié)果顯示CYP6FI在淡色庫(kù)蚊對(duì)溴氰菊酯抗性品系中表達(dá)水平高于敏感品系,且CYP6F1基因在淡色庫(kù)蚊各個(gè)發(fā)育階段有不同的表達(dá)。田海生等［１５］發(fā)現(xiàn)13個(gè)差異表達(dá)基因和2個(gè)特異表達(dá)基因與淡色庫(kù)蚊對(duì)溴氰菊酯抗藥性和敏感性相關(guān)。3傳播水生動(dòng)物傳播種類(lèi)型病毒我國(guó)登革熱的媒介是埃及伊蚊(Aedesaegypti,Linnaeus,1762)和白紋伊蚊(Ae.albopictus,skuse,1894)。白紋伊蚊原是廣布亞洲熱帶、亞熱帶并伸達(dá)溫帶的蚊種,但從20世紀(jì)80年代起,已傳到北美、南美、歐洲和非洲的有些國(guó)家,引起世界衛(wèi)生組織和有關(guān)國(guó)家的重視。在我國(guó),它的分布很廣,包括遼寧(北至沈陽(yáng))、河北、山西、陜西、山東、河南、江蘇、浙江、福建、臺(tái)灣、廣東、香港、澳門(mén)、廣西、四川、貴州、云南和西藏。但以北緯32(以南為普通。雌蚊偏吸人血,多在戶(hù)外侵襲人體,但也有在室內(nèi)叮咬吸血者。雌蚊在飽吸血液之后以及在卵巢發(fā)育過(guò)程中會(huì)再次或多次吸血。白紋伊蚊是“半家蚊”,多滋生在居民點(diǎn)及其周?chē)母鞣N人工容器中,包括大小能積水的容器物,輪胎以及室內(nèi)盆景和花瓶積水和植物容器,包括竹筒、樹(shù)筒、葉液積水以及石穴、水泥地等。白紋伊蚊刺叮兇猛異常,刺叮后皮膚奇癢,可引起皮膚紅腫,局部皮炎,甚至全身性皮炎,抓破后易潰瘍感染。除刺叮騷擾外,更重要的是多種疾病的傳播媒介［３］。1978年和1980年我國(guó)廣東、海南曾發(fā)生過(guò)登革熱流行。白紋伊蚊是廣州佛山、中山和廣州等地登革熱的重要媒介。有些單位發(fā)病率達(dá)30%~40%以上,嚴(yán)重危害人民健康。除些之外,實(shí)驗(yàn)室感染表明,通過(guò)刺叮能傳播黃熱病、西方馬腦炎,委內(nèi)瑞拉馬腦炎,西尼羅河熱、基孔肯尼亞熱等多種病毒性疾病,是傳播病毒性疾病的潛在性媒介［３，１６］。3.1登革病毒在蚊體內(nèi)的復(fù)制、分布及傳代登革病毒和其他正鏈RNA病毒一樣,在敏感細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行復(fù)制。登革病毒微粒由一個(gè)外層糖蛋白和病毒衣殼蛋白包裹基因組構(gòu)成。衣殼蛋白位于宿主-衍生脂質(zhì)雙層內(nèi)。病毒進(jìn)入期間,E蛋白形成糖蛋白鞘與細(xì)胞表面受體分子連接,有助于經(jīng)過(guò)網(wǎng)絡(luò)蛋白介導(dǎo)內(nèi)吞作用內(nèi)化病毒,隨著內(nèi)化發(fā)生,內(nèi)涵體小泡酸化,激發(fā)病毒由糖蛋白結(jié)構(gòu)再排,驅(qū)動(dòng)病毒和內(nèi)吞膜融合,釋放病毒RNA進(jìn)入胞質(zhì),正鏈RNA被翻譯成為一個(gè)多聚蛋白,它被病毒和細(xì)胞蛋白酶加工成為三個(gè)結(jié)構(gòu)即衣殼蛋白(C)、前膜蛋白(prM)、包膜蛋白(E)和7個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白(NS1,NS2A/B,NS3,NS4A/B,NS5)［１７，１８］。近年來(lái),國(guó)內(nèi)外學(xué)者用口感染和胸內(nèi)注射方法來(lái)觀察登革病毒在蚊體內(nèi)的繁殖動(dòng)態(tài),擴(kuò)散與分布情況。研究表明,兩種伊蚊對(duì)登革病毒的復(fù)制和繁殖總量基本一致,病毒在蚊體內(nèi)2~3d即可檢出,隨時(shí)間延長(zhǎng),病毒滴度有規(guī)律地逐漸增加。繁殖高峰時(shí)間為8~11d,病毒可在蚊體內(nèi)存活30d以上。病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)持續(xù)感染,可使病毒突變,導(dǎo)致變異株的產(chǎn)生［１９］。陳虹等［１９］在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)病毒突變是由于病毒的表位在該種病毒持續(xù)感染的細(xì)胞培養(yǎng)中被修飾所致。謝超等［２０］利用蚊蟲(chóng)連續(xù)石蠟切片免疫組織化學(xué)技術(shù),對(duì)登革Ⅱ型病毒(DEN-2)感染白紋伊蚊后的散播時(shí)間、程度及組織器官的感染順序進(jìn)行監(jiān)測(cè),結(jié)果表明:大劑量感染登革Ⅱ型病毒后,在蚊蟲(chóng)消化道的主要部位以及大多數(shù)組織包括神經(jīng)及內(nèi)分泌系統(tǒng)在內(nèi)如誕腺、腦、神經(jīng)節(jié)等亦檢測(cè)到病毒抗原。登革Ⅱ型病毒一旦感染并逸出中腸會(huì)迅速侵染其他組織。從各組織感染率的高低推斷,病毒逸出中腸后通過(guò)血淋巴傳播到其他組織的順序通常為:前腸、涎腺、咽部神經(jīng)節(jié)、腦及食管下神經(jīng)節(jié)、后腸及復(fù)跟的小眼等。蚊媒在蟲(chóng)媒病毒所起的媒介效能,不僅取決于蚊種、數(shù)量、生物學(xué)特性、與人關(guān)系,而且還取決于對(duì)該病毒的易感性,傳播能力及經(jīng)卵傳遞力等。蟲(chóng)媒病毒如何在自然界長(zhǎng)期保存也是一項(xiàng)重要而復(fù)雜的問(wèn)題,一直為流行病學(xué)工作者所關(guān)注。通過(guò)大量的現(xiàn)場(chǎng)和實(shí)驗(yàn)觀察,認(rèn)識(shí)到病毒在蚊蟲(chóng)間的傳遞對(duì)保存病毒有一定的重要性。研究表明,DEN能通過(guò)其媒介蚊蟲(chóng)而垂直傳遞,并在很多現(xiàn)場(chǎng)采集及實(shí)驗(yàn)觀察下得到證實(shí)。趙星等［２１］利用細(xì)胞及分子生物學(xué)技術(shù),研究白紋伊蚊貴州省貴陽(yáng)、興義、畢節(jié)株對(duì)1-4型登革病毒(DEN1-4)的垂直傳遞能力。結(jié)果顯示白紋伊蚊貴陽(yáng)、興義、畢節(jié)、海南株親代蚊蟲(chóng)均對(duì)DEN易感;白紋伊蚊興義株與海南株均能垂直傳播DEN-1,4到子3代,傳遞DEN-3到子2代,白紋伊蚊興義株能垂直傳遞DEN-1到子2代,DEN-4至3代,未發(fā)現(xiàn)能垂直傳遞DEN-2,3,提示對(duì)DEN1-4易感的白紋伊蚊貴陽(yáng)、興義、畢節(jié)株能垂直傳遞DEN,且對(duì)DEN的垂直傳遞能力與其地理來(lái)源有關(guān),貴州省3個(gè)地方株的白紋伊蚊卵可在干燥室溫下越冬保存DEN。林立輝等［２２］采用C6/36培養(yǎng)的DEN經(jīng)口感染白紋伊蚊,不僅對(duì)DEN有較高的感染率(32.1%~32.8%),而且通過(guò)直接叮咬乳鼠,也能傳播DEN。對(duì)感染雌蚊的子1和子2代雌雄成蚊分別進(jìn)行全蟲(chóng)均漿分離和直接叮咬乳鼠法檢測(cè),也證明白紋伊蚊能經(jīng)卵傳遞DEN,至少可傳2代以上。郭曉霞等［２３］也證明登革Ⅱ型病毒能在白紋伊蚊滯育卵內(nèi)存活并傳至子代。3.2我國(guó)不同地區(qū)白紋伊蚊基因序列特征蔡燕麗等［２４］探索廣州市白紋伊蚊線(xiàn)粒體細(xì)胞色素c氧化酶亞基Ⅰ基因(COI)序列的特征,分析同一城市不同環(huán)境下白紋伊蚊的遺傳變異。用單蚊抽提廣州市不同點(diǎn)采集的白紋伊蚊基因組DNA,擴(kuò)增細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅰ基因片段,聯(lián)合單鏈構(gòu)象多態(tài)性PCR(PCR-SSCP)技術(shù)分析COI基因片段多態(tài)性并篩選部分樣品進(jìn)行克隆測(cè)序,用軟件比對(duì)分析序列的差異。結(jié)果顯示廣州市不同采樣點(diǎn)白紋伊蚊PCR擴(kuò)增后獲得709bp的COI基因部分序列,序列分析出現(xiàn)12個(gè)變異位點(diǎn),變異率為1.69%。聚類(lèi)分析顯示廣州株白紋伊蚊不同采樣點(diǎn)的群體間出現(xiàn)部分分化。提示廣州市不同采樣點(diǎn)的白紋伊蚊線(xiàn)粒體COI基因出現(xiàn)部分遺傳多態(tài)性,可能與城市化發(fā)展下白紋伊蚊孳生環(huán)境的變化有一定關(guān)系。陳虹等［２５］擴(kuò)增白紋伊蚊COI基因片段并進(jìn)行克隆測(cè)序;用鄰接法進(jìn)行分子系統(tǒng)發(fā)育分析。結(jié)果顯示各地理株白紋伊蚊COI基因片段序列長(zhǎng)度均為415bp,所測(cè)各株序列均無(wú)缺失。云南思茅株的堿基轉(zhuǎn)換率為1.93%,顛換率為0.24%。貴州麻尾株和廣西南寧株的轉(zhuǎn)換率為0.48%。各地理株中思茅株與麻尾株關(guān)系較近,麻尾株與南寧株關(guān)系較近,其余11個(gè)地理株均為同型株。周光智等［２６］用20個(gè)隨機(jī)引物對(duì)中國(guó)的北京、廣州、上海、成都和日本的沖繩、長(zhǎng)樂(lè)寺等6個(gè)不同地理株的12只白紋伊蚊個(gè)體基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增,通過(guò)隨機(jī)擴(kuò)增的多態(tài)DNA技術(shù)來(lái)研究不同地理株白紋伊蚊的遺傳差異。結(jié)果顯示,有8個(gè)引物顯示清晰的擴(kuò)增帶并呈顯著多態(tài)性。通過(guò)條帶計(jì)算遺傳距離發(fā)現(xiàn):同地理株的不同個(gè)體之間遺傳距離不同,不同地理株的不同個(gè)體之間的遺傳距離也不同,成都和上海兩個(gè)地理株之間的遺傳距離最小,長(zhǎng)樂(lè)寺和其他白紋伊蚊地理株之間的遺傳距離最大,提示不同地理株之間的遺傳差異。3.3白紋伊蚊對(duì)登革病毒易感性研究有關(guān)白紋伊蚊易感性研究進(jìn)展已有報(bào)告［２７～２９］?，F(xiàn)將最近一些發(fā)表與未發(fā)表最新研究成果補(bǔ)充如下:鄭學(xué)禮課題組已在登革病毒感染受體篩選鑒定方面取得重要進(jìn)展,作者采用VOPBA對(duì)白紋伊蚊不同發(fā)育時(shí)期蟲(chóng)體表達(dá)DENV的連接蛋白分子進(jìn)行篩選,從白紋伊蚊幼蟲(chóng)樣品篩選出25、35、50ku登革病毒連接分子;蛹樣品篩選35、50ku分子;雄蚊樣品可見(jiàn)到50ku分子,雌蚊樣品亦篩選出35、50ku分子。35ku分子在幼蟲(chóng)、蛹及成蚊雌蚊的三個(gè)階段均具有,而雄蚊的成蚊則完全沒(méi)有這一分子;最近亦在白紋伊蚊的中腸組織、馬氏管、卵巢也發(fā)現(xiàn)35ku登革病毒連接分子;作者采用相同蛋白樣品量,SDS分析致倦庫(kù)蚊各階段組織,病毒覆蓋結(jié)合試驗(yàn)檢測(cè)不同發(fā)育時(shí)期致倦庫(kù)蚊樣品時(shí)未檢測(cè)到35ku分子;二維電泳分析白紋伊蚊C6/36的膜蛋白,病毒覆蓋結(jié)合試驗(yàn)亦檢測(cè)出35ku分子,經(jīng)質(zhì)譜序列測(cè)定,分析35ku蛋白序列與埃及伊蚊陰離子通道蛋白鑒定較高,該分子功能研究正在進(jìn)行。雄蚊不吸血,只吸植物汁液及花蜜。雌蚊必須吸食人或動(dòng)物的血液卵巢才能發(fā)育、產(chǎn)卵,同時(shí)在吸血過(guò)程中獲得病原體而成為傳播媒介,上述結(jié)果提示35ku分子可能具有組織特異性和病毒向性,并認(rèn)為其與病毒的感染相關(guān),在病毒與宿主細(xì)胞的相互作用方面,扮演角色［１７］。陳曉光課題組已對(duì)白紋伊蚊基因組進(jìn)行測(cè)序并組裝分析,尚未公布。同時(shí)陳曉光等通過(guò)對(duì)白紋伊蚊小RNA的深度測(cè)序以及生物信息學(xué)分析,共測(cè)得序列12663936條,1801570種［３３］。其中通過(guò)與miRBasel4.0數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)分析得到92種已知miRNAs,通過(guò)miRNA預(yù)測(cè)軟件mireap預(yù)測(cè)新的miRNAs46種。共選擇12種-miRNAs進(jìn)行驗(yàn)證,包括6種保守性miRNAs與6種蚊蟲(chóng)特異性miRNAs。所有的miRNAs在白紋伊蚊中均得到驗(yàn)證,并且大多數(shù)miRNA在蚊蟲(chóng)的不同發(fā)育階段具有表達(dá)差異。共選擇4種-miRNAs(miR-184,miR-998,miR-989、miR-N1)做吸血前后的表達(dá)差異分析,其中3種miRNAs在雌蚊吸血后表達(dá)水平增加,miR-N1在雌蚊吸血后才開(kāi)始有表達(dá)。埃及伊蚊(Aedesagypti)屬雙翅目(Diptera)蚊科(Culici-dae)伊蚊屬(Aedes)覆蚊亞屬(Stegomyia)A組。分布于世界熱帶和亞熱帶地區(qū),在我國(guó),分布于北緯22(以南的一些地區(qū),包括臺(tái)灣省南部、海南省、廣東省和廣西壯族自治區(qū)的個(gè)別島嶼,為世界大多數(shù)地區(qū)登革熱(Denguefever)和登革出血熱(Den-guehemorrhagicfever,DHF)最主要的傳播媒介之一,同時(shí)還是城市型黃熱、基孔肯雅、立谷熱等蟲(chóng)媒病的重要媒介［２，３］。1978年在廣東佛山石灣發(fā)生有登革熱流行,接著在海南以及廣東、廣西的部分地區(qū)都先后發(fā)生流行或大流行,其中海南以及廣西的合浦、防城及廣東的少數(shù)地區(qū)主要由埃及伊蚊傳播。在海南島1980和1986年兩次流行中,發(fā)病人數(shù)達(dá)50余萬(wàn)人之多［３０］。埃及伊蚊全基因組已測(cè)序組裝完成并公布,埃及伊蚊對(duì)黃病毒易感性、信號(hào)通道、蚊蟲(chóng)抗性及監(jiān)測(cè)方面,國(guó)外均取得很大進(jìn)展,我國(guó)在這方面研究仍較為薄弱。4帶論蚊病毒的傳播JE是我國(guó)流行的蚊媒病之一。我國(guó)曾有白紋伊蚊和伊川伊蚊是乙腦傳播媒介的報(bào)告,但王逸民等通過(guò)大量流行病學(xué)、生態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)等的系統(tǒng)研究,提出了三帶喙庫(kù)蚊是乙腦病毒的主要傳播媒介,目前已獲國(guó)際公認(rèn)［１］。三帶喙庫(kù)蚊(Cx.tritaenio-rhynohus,Giles,1901)也是一個(gè)復(fù)合體。作為一個(gè)重要媒介蚊種,也需要作比較系統(tǒng)的研究。淡色庫(kù)蚊和致倦庫(kù)蚊也可能起次要傳播媒介。乙腦病毒的傳播媒介可因地區(qū)不同而存在差異。云南乙腦高發(fā)區(qū)洱源縣的麻翅庫(kù)蚊帶毒率高于當(dāng)?shù)夭傻降娜龓о箮?kù)蚊,而且蚊蟲(chóng)出現(xiàn)時(shí)間及病毒檢出時(shí)間也早于三帶喙庫(kù)蚊。國(guó)內(nèi)外曾在十余蚊蟲(chóng)及蠓分離到乙腦病毒,提示病毒可由多種蚊蟲(chóng)攜帶傳播。如國(guó)外曾從赫坎按蚊分離到病毒。該蚊在我國(guó)分布于新疆,而這一地區(qū)既無(wú)三帶喙庫(kù)蚊的分布,也無(wú)乙型腦炎的報(bào)告,這些蚊蟲(chóng)在我國(guó)成為乙型腦炎病毒的潛在媒介。另外,國(guó)內(nèi)從蠛蠓和庫(kù)蠓中分離到乙腦病毒。5關(guān)于蚊的形態(tài)和物種近年來(lái)我國(guó)在瘧疾、登革熱(登革出血熱媒介的研究有了很大進(jìn)展,但仍有需進(jìn)一步研究的問(wèn)題。5.1蚊媒病媒介種群鑒定蚊在分類(lèi)上屬于昆蟲(chóng)綱,雙翅目,蚊科(culicidae),蚊科分為3個(gè)亞科,即按蚊亞科、巨蚊亞科和庫(kù)蚊亞科。全世界的蚊蟲(chóng)已知34屬約3300種及亞種,我國(guó)已發(fā)現(xiàn)15屬333種及亞科。由于地區(qū)差異使蚊在形態(tài)上可能出現(xiàn)變異,有效形態(tài)特征比較有限,以及表型可塑性和遺傳可變性的存在導(dǎo)致蚊的分類(lèi)研究形成物種同物異名,如:1赫坎按蚊復(fù)合體是我國(guó)最復(fù)雜的種團(tuán)。我國(guó)從1975年以來(lái)共記述了9個(gè)新種,這些新種的記述主要根據(jù)形態(tài)、甚至微小的區(qū)別,因而有的已確定為一種的同物異名。以上特征雖然是一般蚊