環(huán)鳥苷酸對(duì)小型豬血壓和血漿的影響

環(huán)鳥苷酸對(duì)小型豬血壓和血漿的影響

動(dòng)脈供血量（chf）是由心臟泵血功能異常引起的一過性心理血氧異常引起的。在靜息或一般體力活動(dòng)的情況下，靜脈回流的血液無法有效地排出，以滿足全身組織的代謝需求。由于長期靜脈系統(tǒng)供血不足，靜脈系統(tǒng)血沉（缺血），以及交感神經(jīng)系統(tǒng)激活的異常綜合征。腦鈉素(B型利鈉肽,BNP)是神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)相關(guān)家族成員之一。已有研究表明,在腦室容積及壓力過度負(fù)荷時(shí),BNP增加。Cardeva是一種新型的BNP與人白蛋白復(fù)合蛋白,可用于治療充血性心力衰竭。1材料和方法1.1中心caeva健康的雌性中國巴馬小型豬共18頭,約4月齡,體重6±2kg(購自第三軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,清潔級(jí));Cardeva購自CoGenesys,Inc(Rockville,US);IBMX(3-異丁基-1-甲基黃嘌呤)和ELISA試劑盒均購自南京建成生物工程研究所;BP-200血壓分析儀購自VisitechSystems(Apex,NC)。1.2模型建立的驗(yàn)證選取健康雌性巴馬小型豬10頭,在基礎(chǔ)飼料基礎(chǔ)上添加喂食高糖高脂高膽固醇飼料(豬油10%、蔗糖37%和膽固醇2%)。動(dòng)物分欄飼養(yǎng),每日投食3次,日投食量為體重的4%,喂養(yǎng)5個(gè)月后測空腹血糖,以空腹血糖>120mg/dL判斷模型是否建立成功。結(jié)果8頭建模成功,因此另2頭建模未成功的巴馬小型豬不列入統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。1.3正常飼料和高糖高脂飼料uf將8頭建模成功的糖尿病豬均分為高糖高脂飼料對(duì)照組和高糖高脂飼料給藥組。將正常飼料飼養(yǎng)5個(gè)月的8頭豬均分為正常飼料對(duì)照組和正常飼料給藥組。正常飼料對(duì)照組和高糖高脂飼料對(duì)照組靜注生理鹽水(6mL/頭);正常飼料給藥組及高糖高脂飼料給藥組靜注Cardeva(4mg/kg)。1.4u3000mx-3-異丁基-1-甲基黃立糖液液的制備cGMP水平的檢測給藥后第1、8、16、24、48、72h耳緣靜脈取血,經(jīng)600g/min離心15min,取血漿,-20℃保存,并收集尿液于試管中,加入IBMX(3-異丁基-1-甲基黃嘌呤)至750mmol,600g/min離心15min,-20℃保存。采用ELISA試劑盒檢測血漿及尿液中的cGMP水平。1.5血壓測量采用BP-200血壓儀測量動(dòng)物尾部收縮壓,記錄給藥前及給藥后第1、8、16、24h的收縮壓。1.6數(shù)據(jù)處理分析所有數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用WindowsSPSS11.0軟件進(jìn)行分析,處理組間采用單因素方案分析,P<0.05表示差異有顯著性意義。2結(jié)果2.1密度膽固醇、總膽固醇及三酰甘油、tg水平30天與第150天基礎(chǔ)指標(biāo)的影響正常飼料飼養(yǎng)的兩組在第30天與第150天空腹時(shí)血糖高密度脂蛋白膽固醇(HDL)、總膽固醇(TC)、游離脂肪酸(FFA)及三酰甘油(TG)水平差異無顯著性(P>0.05);而在第150天,高糖高脂飼料飼養(yǎng)兩組與正常飼料飼養(yǎng)兩組空腹血糖、HDL、TC、FFA水平相比較,差異有顯著性意義(P<0.01)。見表1。2.2cmp濃度的變化正常飼料對(duì)照組的血漿cGMP濃度要高于高糖高脂飼料對(duì)照組,注入Cardeva1h以后,cGMP濃度開始升高,而高糖高脂飼料給藥組要顯著高于正常飼料給藥組。1h后開始下降,但至16h時(shí)高糖高脂飼料給藥組仍高于高糖高脂飼料對(duì)照組,24h后各組差異無顯著性。見圖1。雖然在開始時(shí)尿液中cGMP濃度正常飼料對(duì)照組稍高于高糖高脂飼料對(duì)照組,但在注入Cardeva后,尿液中的cGMP濃度也開始上升,高糖高脂飼料給藥組尿液中的cGMP濃度在注入Cardeva后的8、16、24h較其他組要高,差異有顯著性。(P<0.05)。而注入生理鹽水的兩組則無變化。見圖2。2.3不同給藥組和高糖高脂飼料對(duì)大鼠血清中收縮壓的影響正常飼料對(duì)照組和高糖高脂飼料對(duì)照組在注入生理鹽水后收縮壓無明顯差異,注入Cardeva后1h正常飼料給藥組和高糖高脂飼料給藥組的收縮壓下降,且低于各對(duì)照組,隨后開始回升;在注入Cardeva后8h,高糖高脂飼料給藥組的收縮壓高于對(duì)照組。見圖3。3bnp的基本原理及對(duì)hba的影響CHF主要表現(xiàn)為交感神經(jīng)功能增強(qiáng),副交感神經(jīng)功能降低,內(nèi)源性縮血管物質(zhì)的激活。CHF的重要標(biāo)志是循環(huán)中的內(nèi)源性腦鈉肽(hBNP)升高。心臟的前后負(fù)荷增加可以促進(jìn)hBNP的合成和釋放。而hBNP有排鈉利尿和擴(kuò)血管的作用。CHF患者其排鈉利尿作用減弱,血管的調(diào)節(jié)能力也有所改變。這種由血管緊張素Ⅱ介導(dǎo)的排鈉利尿及擴(kuò)血管作用的減弱促進(jìn)了CHF患者水鈉潴留。因此,內(nèi)源性hBNP是CHF的重要標(biāo)志,而藥理劑量的hBNP對(duì)心臟血流的動(dòng)力學(xué)和神經(jīng)體液具有有利的影響。腦鈉素(Nesiritide,BNP)是一種重組的BNP,在結(jié)構(gòu)上與內(nèi)源性的hBNP相同,分子式為C143H244N50O42S4;由美國Scios公司研制,2001年以Natreor商品名在美國首次上市。已有一些資料表明,BNP能增加cGMP水平,降低肺毛細(xì)血管嵌楔壓(PcWp)、全身血管阻力(SVR)和肺動(dòng)脈壓(PAP),增加心指數(shù)(CI)搏出量指數(shù)(SVI)和排鈉利尿作用。其還能在不影響RAS系統(tǒng)的情況下減少醛固酮水平。在理論上,細(xì)胞外cGMP水平可反映出細(xì)胞內(nèi)cGMP水平;而機(jī)體內(nèi)cGMP及尿液中cGMP水平可能是重要的生物學(xué)標(biāo)志。本研究選用巴馬小型豬,因其與其他動(dòng)物相比,在解剖結(jié)構(gòu)和生理學(xué)與人類有相似的心血管和消化系統(tǒng)。經(jīng)過喂飼5個(gè)月后,高糖高脂飼料組出現(xiàn)高血糖、高三酰甘油及高游離脂肪酸,并有高頻率發(fā)生CHF的傾向。在未給予Cardeva處理時(shí),高糖高脂飼料飼養(yǎng)的兩組較正常飼料飼養(yǎng)的兩組血壓高且細(xì)胞外cGMP水平低;在給予Cardeva后,血漿及尿液中cGMP迅速上升,于1h后開始下降,且收縮壓下降,這種效應(yīng)在高糖高脂給藥組尤為明顯。對(duì)于急性心衰并伴有呼吸困難者血漿中BNP水平的測定可作為測量的有效證據(jù)。同時(shí),BNP對(duì)血流動(dòng)力學(xué)的影響有望成為住院患者中患急性冠脈綜合征及慢性心衰者的檢測手段。此外,BNP對(duì)血流動(dòng)力學(xué)的影響,將成為心衰患者治療的一種新途徑,但BNP半衰期短(約18mi