丙泊酚對卵巢早衰小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響及其機(jī)制

丙泊酚對卵巢早衰小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響及其機(jī)制目的:比較順鉑及卵巢切除法誘導(dǎo)小鼠卵巢功能早衰模型及其對小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響,尋找適合本研究的卵巢早衰模型;研究丙泊酚對卵巢早衰小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響及其可能的分子機(jī)制。方法:1、雌性6～8周ICR小鼠隨機(jī)分成四組:空白對照組,順鉑模型組,假手術(shù)組和卵巢切除模型組。觀察四組小鼠一般情況、動情周期;稱量空白對照組和順鉑模型組小鼠的卵巢、子宮濕重;采用HE染色觀察順鉑造模后卵巢及子宮的病理改變;采用ELISA檢測小鼠血清中FSH、LH、P及E2的水平;采用避暗實驗檢測小鼠的學(xué)習(xí)記憶行為。2、雌性6～8周ICR小鼠隨機(jī)分成六組:假手術(shù)對照組(sham-operated)、50mg/kg丙泊酚組(Pro50)、250mg/kg丙泊酚組(Pro250)、卵巢切除模型對照組(OVX)、50mg/kg丙泊酚應(yīng)用于卵巢切除模型組(Pro50+OVX)、250mg/kg丙泊酚應(yīng)用于卵巢切除模型組(Pro250+OVX)。觀察小鼠一般情況;采用避暗實驗檢測小鼠的學(xué)習(xí)記憶行為;采用westernblot及免疫組化檢測給藥lh及24h后海馬中GSK-3β、p-GSK-3β-Ser9、CREB、p-CREB-Ser133及caspase-3的水平;采用尼氏染色觀察海馬神經(jīng)元的損傷情況。結(jié)果:1、順鉑模型組:與空白對照組比較,順鉑模型組小鼠體重明顯減輕(P<0.01),行動緩慢,整體狀態(tài)較差,動情間期持續(xù)或延長;卵巢、子宮濕重明顯減輕(P<0.01),順鉑造模后卵巢及子宮病理改變明顯;避暗潛伏期顯著縮短(P<0.01),錯誤次數(shù)顯著增加(P<0.01);血清FSH、LH和E2濃度均無顯著改變(P>0.05),P濃度顯著降低(P<0.01)。卵巢切除模型組:與假手術(shù)組比較,卵巢切除模型組小鼠體重?zé)o明顯變化(P>0.05),動情周期停滯于動情間期;避暗潛伏期顯著縮短(P<0.01),錯誤次數(shù)無顯著性差異(P>0.05);血清FSH和LH的濃度顯著升高(P<0.01),P和E2的濃度顯著降低(P<0.01)。2、各小鼠在丙泊酚給藥前后及組間自主活動均無顯著差異(P>0.05);與sham-operated組相比,Pro50、Pro250及OVX組避暗潛伏期顯著縮短(P<0.0001),Pro50+OVX組較OVX組潛伏期顯著延長(P<0.0001)。3、給藥后lh:不同劑量丙泊酚均會導(dǎo)致正常成年小鼠p-GSK-3β-Ser9及p-CREB-Ser133表達(dá)下調(diào)、caspase-3表達(dá)上調(diào),亞麻醉劑量的丙泊酚會使得卵巢切除小鼠p-GSK-3p-Ser9表達(dá)上調(diào);給藥后24h:不同劑量丙泊酚均會導(dǎo)致正常成年小鼠caspase-3表達(dá)上調(diào),亞麻醉劑量的丙泊酚會使得卵巢切除小鼠p-GSK-3β-Ser9及p-CREB-Ser133表達(dá)上調(diào)、caspase-3表達(dá)下調(diào);與Sham-operated組相比,Pro50、Pro250、OVX及Pro250+OVX組小鼠海馬區(qū)可見神經(jīng)細(xì)胞部分缺失,細(xì)胞輪廓模糊且排列紊亂,神經(jīng)元胞漿內(nèi)尼氏體減少,神經(jīng)元數(shù)量減少;Pro50+OVX組僅偶可見細(xì)胞形態(tài)異常,神經(jīng)元受損較OVX組有明顯改善。結(jié)論:1、小鼠卵巢切除模型能夠更好地模擬小鼠卵巢早衰的癥狀,且對全身系統(tǒng)及學(xué)習(xí)記憶的影響較順鉑模型組小;2、丙泊酚劑量依賴性的損傷正常成年雌性小鼠的記憶鞏固功能;亞麻醉劑量的丙泊酚可以改善卵巢切除小鼠的記憶鞏固功能。3、丙泊酚可以降低假手術(shù)小鼠海馬區(qū)p-GSK-3β-Ser9及p-CREB-Ser133的水平,影響小鼠的記憶鞏固功能;丙泊酚可以升高假手術(shù)小鼠海馬區(qū)caspase-3的水平,加重海馬區(qū)神經(jīng)元的損傷;亞麻醉劑量的丙泊酚可以升高卵巢切除小鼠海馬區(qū)p-GSK