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血細(xì)胞分析在臨床中的應(yīng)用
1編輯ppt血細(xì)胞分析的開(kāi)展近年來(lái),隨著科學(xué)技術(shù)的飛速開(kāi)展及計(jì)算機(jī)在血液分析儀中的廣泛應(yīng)用,各種先進(jìn)的血液分析儀逐漸普及.2編輯ppt1953年,第一臺(tái)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀問(wèn)世,標(biāo)志著這一工程拋棄了作坊式手段;1913-1998ModelAHighspeedautomaticbloodcellcountandcellsizeanalyzer3編輯ppt
原理血液分析儀主要是利用阻抗原理進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)的.不同體積的血細(xì)胞,因其電阻大小不同,而產(chǎn)生相應(yīng)大小的脈沖,分別進(jìn)入到儀器設(shè)置的不同通道4編輯ppt5編輯pptCBC(全血細(xì)胞計(jì)數(shù))+DIFF(WBC分類)模式下WBC計(jì)數(shù)分類WBC/DIFF通道對(duì)WBC計(jì)數(shù)和分類時(shí),使用的兩個(gè)信號(hào):細(xì)胞經(jīng)半導(dǎo)體激光激發(fā)產(chǎn)生側(cè)向熒光強(qiáng)度側(cè)向散射光強(qiáng)度信號(hào)6編輯ppt使用的兩種試劑:溶血素(4DL):將RBC完全溶解,同時(shí)在WBC膜外表打孔熒光染料(4DS,聚次甲基熒光染料)通過(guò)小孔進(jìn)入WBC內(nèi),對(duì)胞漿和胞核中的核酸物質(zhì)進(jìn)行染色7編輯ppt測(cè)定經(jīng)過(guò)核酸熒光染色后的WBC在633nm激光的照射下,產(chǎn)生側(cè)向熒光信號(hào)和側(cè)向散射光信號(hào)。側(cè)向熒光強(qiáng)度與WBC的核酸(DNA/RNA)含量成正比,側(cè)向散射光強(qiáng)度反映了細(xì)胞內(nèi)容物的復(fù)雜程度(核的分葉,胞漿顆粒的大小,數(shù)量,分布均勻程度)。8編輯ppt123459鞘流技術(shù)激光計(jì)數(shù)原理示意圖1流通池2梭頭3樣本頭4鞘流頭5透鏡6吸收光7低角度散射光檢測(cè)8高角度散射光檢測(cè)9光源8769編輯ppt10編輯ppt11編輯pptSideScatter(Internalstructure)淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞嗜中性細(xì)胞
嗜酸細(xì)胞
Fluorescence(RNA,DNA)RBCghost嗜堿細(xì)胞12編輯pptRBC和PLT檢測(cè)原理全血標(biāo)本稀釋后分配到RBC/PLT計(jì)數(shù)池,鞘流技術(shù)產(chǎn)生的層流使這個(gè)電阻信號(hào)轉(zhuǎn)化為脈沖信號(hào)記錄下來(lái),脈沖的高度反映了細(xì)胞的大小,每個(gè)脈沖信號(hào)代表一個(gè)細(xì)胞,收集信號(hào)得到RBC和PLT的直方圖。13編輯ppt14編輯ppt15編輯pptSLS血紅蛋白檢測(cè)方法檢測(cè)使用的主要成份為十二烷基磺酸鈉外表活性劑先將RBC溶解,釋放出Hb分子Hb分子中的Fe2+被氧化為Fe3+,與SLS結(jié)合形成SLS-Hb有色基團(tuán),在535nm有最大吸收峰。16編輯pptSLS血紅蛋白檢測(cè)方法特點(diǎn)不含氰化物,無(wú)毒具有環(huán)保性SLS是一種脂溶性試劑,可減少脂血和高WBC總數(shù)造成的濁度對(duì)血紅蛋白檢測(cè)的影響17編輯ppt數(shù)據(jù)異常信息18編輯ppt中性粒細(xì)胞增多感染〔急性細(xì)菌感染〕組織損傷〔心肌堵塞.手術(shù)〕惡性血液病藥物使用(腎上腺素.類固醇)生理性增高19編輯ppt淋巴細(xì)胞增多惡性血液病感染(百日咳.傳單.病毒性風(fēng)疹)應(yīng)激狀態(tài)(急性心衰.心臟堵塞.過(guò)敏反響)自身免疫性疾病.腫瘤.吸煙20編輯ppt單核細(xì)胞增多感染(細(xì)胞性.敗血癥)膠原病妊娠性WBC增多霍奇金氏病惡性腫瘤21編輯ppt嗜酸性細(xì)胞增多過(guò)敏反響(藥物.尋麻疹)寄生蟲(chóng)病皮膚病纖維瘤內(nèi)分泌病感染(結(jié)核病)22編輯ppt中性粒細(xì)胞減少嚴(yán)重的細(xì)菌感染白血病.腫瘤骨髓轉(zhuǎn)移藥物血液惡液質(zhì)過(guò)敏性休克.酒精中毒23編輯ppt淋巴細(xì)胞減少流行性感冒.敗血病藥物(抗腫瘤藥物.腎上腺皮質(zhì)激素)腫瘤晚期.霍奇金氏病膠原性疾病(系統(tǒng)性紅斑狼瘡.類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)24編輯ppt干擾因素造成假性增高(降低)25編輯pptWBC假性增高PLT聚集冷凝集有核紅細(xì)胞難溶紅細(xì)胞冷球蛋白26編輯pptPLT假性增高紅細(xì)胞碎片小紅細(xì)胞冷白蛋白27編輯pptPLT假性降低血小板聚集巨大血小板28編輯pptRBC假性增高白細(xì)胞增多巨大血小板29編輯pptRBC假性降低紅細(xì)胞碎片冷凝集小紅細(xì)胞30編輯ppt急性粒細(xì)胞白血病Auer小體31編輯ppt出現(xiàn)原始粒細(xì)胞DIFF散點(diǎn)圖顯示:淋巴細(xì)胞.單核細(xì)胞和原始細(xì)胞區(qū)域出現(xiàn)大量散點(diǎn)且連成一片,大局部原始細(xì)胞由于異常增殖含有過(guò)多的DNA/RNA32編輯ppt出現(xiàn)異常淋巴細(xì)胞散點(diǎn)圖顯示:有大量的異常淋巴細(xì)胞,熒光強(qiáng)度較弱而側(cè)向散射光強(qiáng)度稍強(qiáng)33編輯pptRBC雙峰分布表示出現(xiàn)大小不同的兩群紅細(xì)胞34編輯ppt缺鐵性貧血診斷與鐵劑治療后
直方圖動(dòng)態(tài)變化-療效觀察
鐵劑治療2周后鐵劑治療4周后35編輯ppt特發(fā)性PLT減少性紫癲(ITP)PLT直方圖分布上,在40fl附近出現(xiàn)一個(gè)頂峰,提示有大型PLT,因此反映細(xì)胞大小的直方圖無(wú)法將PLT準(zhǔn)確檢測(cè)出來(lái),許多大的PLT被計(jì)數(shù)成RBC36編輯ppt需要鏡檢的情況37編輯ppt、國(guó)際血液學(xué)復(fù)檢專家組推薦的41條自動(dòng)CBC和DC復(fù)檢規(guī)那么:
1.新生兒:〔1〕復(fù)檢條件:首次檢測(cè)標(biāo)本;〔2〕復(fù)檢要求:涂片鏡檢。
2.WBC、RBC、Hb、PLT、網(wǎng)織紅細(xì)胞〔Ret〕:〔1〕復(fù)檢條件:超出線性范圍;〔2〕復(fù)檢要求:稀釋標(biāo)本后重新測(cè)定。
3.WBC、PLT:〔1〕復(fù)檢條件:低于實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)的儀器線性范圍;〔2〕復(fù)檢要求:按實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程〔SOP〕進(jìn)行。38編輯ppt4.WBC、RBC、Hb、PLT:〔1〕復(fù)檢條件:無(wú)結(jié)果;〔2〕復(fù)檢要求:①檢查標(biāo)本是否有凝塊,②重測(cè)標(biāo)本,③如果維持不變,用替代方法計(jì)數(shù)。
5.WBC:〔1〕復(fù)檢條件:首次結(jié)果<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L;〔2〕復(fù)檢要求:涂片鏡檢。
6.WBC:〔1〕復(fù)檢條件:3天內(nèi)Delta值超限,并<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L;〔2〕復(fù)檢要求:涂片鏡檢。
39編輯ppt7.PLT:〔1〕復(fù)檢條件:首次結(jié)果<100x10e9/L或>1000.0x10e9/L;〔2〕復(fù)檢要求:涂片鏡檢。
8.PLT:〔1〕復(fù)檢條件:Delta值超限的任何結(jié)果;〔2〕復(fù)檢要求:涂片鏡檢。
9.Hb:〔1〕復(fù)檢條件:首次結(jié)果<70g/L或>其年齡和性別參考范圍上限20g/L;〔2〕復(fù)檢要求:①涂片鏡檢,②確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求。
10.平均紅細(xì)胞體積〔MCV〕:〔1〕復(fù)檢條件:24h內(nèi)標(biāo)本的首次結(jié)果<75fl或>105fl〔成人〕;〔2〕復(fù)檢要求:涂片鏡檢。
40編輯ppt11.MCV:〔1〕復(fù)檢條件:24小時(shí)以上的成人標(biāo)本>105fl;〔2〕復(fù)檢要求:①涂片鏡檢觀察大紅細(xì)胞相關(guān)變化,②如無(wú)大紅細(xì)胞相關(guān)變化,要求重送新鮮血標(biāo)本,③如無(wú)新鮮血標(biāo)本,報(bào)告中注明。
12.MCV:〔1〕復(fù)檢條件:24h內(nèi)標(biāo)本的Delta值超限的任何結(jié)果;〔2〕復(fù)檢要求:確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求。
13.平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度〔MCHC〕:〔1〕復(fù)檢條件:≥參考范圍上限20g/L;〔2〕復(fù)檢要求:檢查標(biāo)本是否有脂血、溶血、RBC凝集及球形紅細(xì)胞。
41編輯ppt16~22條為白細(xì)胞分類的復(fù)檢規(guī)那么:
16.無(wú)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)〔DC〕結(jié)果或DC結(jié)果不全:〔1〕復(fù)檢條件:無(wú)條件復(fù)檢;〔2〕復(fù)檢要求:人工分類和涂片鏡檢。
17.中性粒細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)〔Neut?!常骸?〕復(fù)檢條件:首次結(jié)果<1.0x10e9/L或>20.0x10e9/L;〔2〕復(fù)檢要求:涂片鏡檢。
18.淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)〔Lym?!常骸?〕復(fù)檢條件:首次結(jié)果>5.0x10e9/L〔成人〕或>7.0x10e9/L〔<12歲〕;〔2〕復(fù)檢要求:涂片鏡檢。
42編輯ppt19.單核細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)〔Mono?!常骸?〕復(fù)檢條件:首次結(jié)果>1.5x10e9/L〔成人〕或>3.0x10e9/L〔<12歲〕;〔2〕復(fù)檢要求:涂片鏡檢。
20.嗜酸粒細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)〔Eos?!常骸?〕復(fù)檢條件:首次結(jié)果>2.0x10e9/L;〔2〕復(fù)檢要求:涂片鏡檢。
21.嗜堿粒細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)〔Baso?!常骸?〕復(fù)檢條件:首次結(jié)果>0.5x10e9/L;〔2〕復(fù)檢要求:涂片鏡檢。
43編輯ppt22.有核紅細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)〔NRBC?!常骸?〕復(fù)檢條件:首次出現(xiàn)任何結(jié)果;〔2〕復(fù)檢要求:涂片鏡檢。
23條為網(wǎng)織紅細(xì)胞的復(fù)檢規(guī)那么:
23.網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)〔Ret#〕:〔1〕復(fù)檢條件:首次結(jié)果>0.10x10e9/L;〔2〕復(fù)檢要求:涂片鏡檢。
44編輯ppt24~41條為可以提示的復(fù)檢規(guī)那么:
24.疑心性報(bào)警[不成熟粒細(xì)胞(IG)/桿狀核中性粒細(xì)胞〔Band〕報(bào)警提示除外]:〔1〕復(fù)檢條件:首次成人結(jié)果出現(xiàn)陽(yáng)性報(bào)警;〔2〕復(fù)檢要求:涂片鏡檢。
25.疑心性報(bào)警:〔1〕復(fù)檢條件:首次兒童結(jié)果出現(xiàn)陽(yáng)性報(bào)警;〔2〕復(fù)檢要求:涂片鏡檢。
26.WBC結(jié)果不可靠報(bào)警:〔1〕復(fù)檢條件:陽(yáng)性報(bào)警;〔2〕復(fù)檢要求:①確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求并重測(cè)標(biāo)本,②如出現(xiàn)同樣報(bào)警提示,檢查儀器,③如需要,進(jìn)行人工分類。
27.RBC碎片:〔1〕復(fù)檢條件:陽(yáng)性報(bào)警;〔2〕復(fù)檢要求:涂片鏡檢。
28.雙形RBC:〔1〕復(fù)檢條件:首次結(jié)果出現(xiàn)陽(yáng)性報(bào)警;〔2〕復(fù)檢要求:涂片鏡檢。
45編輯ppt本卷須知儀器為篩選試驗(yàn),不能從測(cè)定結(jié)果直接診斷疾病遇到異常提示時(shí)及時(shí)鏡檢儀器定期保養(yǎng),保證日常工作正常進(jìn)行46編輯ppt47編輯ppt48編輯ppt〔二〕血細(xì)胞形態(tài)變化的一般規(guī)律1.細(xì)胞大小及形態(tài)大小:由大到小。2個(gè)例外:巨核細(xì)胞及早幼粒細(xì)胞。形態(tài):紅細(xì)胞始終圓形,粒細(xì)胞圓形或橢圓形,單核細(xì)胞由圓形、橢圓形變?yōu)椴灰?guī)那么形,巨核細(xì)胞由圓形變?yōu)椴灰?guī)那么形。2.細(xì)胞核大?。河纱蟮叫 >藓思?xì)胞除外。核形:各系細(xì)胞有不同表現(xiàn)。核位置:紅系核居中,粒、單系核偏位,淋巴細(xì)胞核一側(cè)著邊,僅一側(cè)有胞漿。49編輯ppt
核染色質(zhì):顏色由淺到深,染色質(zhì)由細(xì)致疏松到粗糙密集,最后緊縮成塊。核膜:不明顯到明顯。核仁:清晰、模糊、消失。3.細(xì)胞漿
量:由少到多。顏色:粒、紅、巨核由深藍(lán)或淺藍(lán)到淺紅;淋巴、單核保持淺藍(lán)或灰藍(lán)色;漿細(xì)胞由灰藍(lán)變?yōu)樯钏{(lán)。顆粒:從無(wú)到有,由非特異性到特異性。50編輯ppt51編輯ppt㈢、血細(xì)胞的正常形態(tài)學(xué)特征1、紅細(xì)胞系統(tǒng)原紅〔normoblast〕早幼紅〔basophilicnormoblast〕中幼紅〔polychromaticnormoblast〕晚幼紅〔orthochromaticnormoblast〕原紅細(xì)胞:早幼紅細(xì)胞:中幼紅細(xì)胞52編輯ppt2、粒細(xì)胞系統(tǒng)原?!瞞yeloblast〕早幼?!瞤romyelocyte〕中幼?!瞞yelocyte〕:中性、嗜酸、嗜堿晚幼?!瞞etamyelocyte〕桿狀核粒〔stabgranulocyte,bandgranulocyte〕分葉核〔Segmenteelgranulocyte〕原粒細(xì)胞早幼粒細(xì)胞中性中幼粒細(xì)胞晚幼粒細(xì)胞桿狀核粒細(xì)胞53編輯ppt嗜酸粒細(xì)胞〔中幼、晚幼、桿狀核、分葉核54編輯ppt嗜堿粒細(xì)胞〔早幼、中幼、晚幼、桿狀核、分葉核〕55編輯ppt3、淋巴細(xì)胞系統(tǒng)原淋〔Lymphoblast〕幼淋〔prolymphocyte〕淋巴〔lymphocyte〕大淋巴細(xì)胞小淋巴細(xì)胞原淋巴細(xì)胞幼淋巴細(xì)胞:大淋巴細(xì)胞小淋巴細(xì)胞56編輯ppt4、漿細(xì)胞系統(tǒng)原漿〔plasmablast〕幼漿〔proplasmacyte〕漿細(xì)胞〔plasmacyte〕原漿細(xì)胞幼漿細(xì)胞漿細(xì)胞57編輯ppt5、單核細(xì)胞系統(tǒng)A.原單〔monoblast〕B.幼單〔promonocyte〕C.單核〔monocyte〕D.吞噬〔maerophage〕ABC原單核細(xì)胞幼單核細(xì)胞單核細(xì)胞58編輯ppt6、巨核細(xì)胞系統(tǒng)原巨〔megakaryoblast〕幼巨〔promegakaryocyte〕顆粒巨〔granularmegakaryocyte〕產(chǎn)板巨〔thrombacytogenousmegakaryocyte〕裸核〔nakednucleous〕原巨核細(xì)胞幼巨核細(xì)胞顆粒型巨核細(xì)胞產(chǎn)血小板型巨核細(xì)胞59編輯ppt推片推片、染片的質(zhì)量
60編輯ppt正常骨髓象〔油鏡〕61編輯ppt缺鐵性貧血骨髓象62編輯ppt溶血性貧血骨髓象63編輯ppt巨幼細(xì)胞性貧血骨髓象64編輯ppt地中海貧血
65編輯ppt慢性ITP骨髓象〔高倍鏡〕66編輯ppt幼紅細(xì)胞形態(tài)異常67編輯ppt核間橋〔細(xì)胞內(nèi)〕68編輯ppt69編輯ppt核間橋〔細(xì)胞外〕70編輯ppt
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