鴨大腸桿菌病病原分離與藥敏實(shí)驗(yàn)

鴨大腸桿菌病病原別離

鑒定與藥敏試驗(yàn)

1編輯ppt論文的結(jié)構(gòu)和主要內(nèi)容第一局部實(shí)驗(yàn)背景第二局部實(shí)驗(yàn)方法第三局部實(shí)驗(yàn)結(jié)果第四局部結(jié)論2編輯ppt一、實(shí)驗(yàn)背景近幾年隨著養(yǎng)殖業(yè)迅速開展和集約化程度的大大提高，大腸桿菌病流行勢(shì)頭愈加迅速。大腸桿菌病是在世界范圍內(nèi)影響?zhàn)B殖業(yè)開展的主要細(xì)菌病之一，常招致巨大的經(jīng)濟(jì)損失，有效防治大腸桿菌病一直是養(yǎng)殖業(yè)的一項(xiàng)重要課題。2021年10月泰州市海陵區(qū)某養(yǎng)殖戶所飼養(yǎng)的肉鴨開始發(fā)病，用藥治療幾天不見效果，戶主立即攜帶病死鴨至xxxx動(dòng)物醫(yī)院進(jìn)行診療，門診初步診斷結(jié)果為鴨大腸桿菌病，還要通過實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步確診。3編輯ppt二、實(shí)驗(yàn)方法2.1病料采集采集送檢病死鴨，無菌取心臟和肝臟。2.2別離培養(yǎng)

以無菌操作的方法，將采取的病料，分別接種在普通瓊脂平板、麥康凱瓊脂、伊紅美蘭瓊脂培養(yǎng)基中37℃恒溫箱培養(yǎng)。2.3鏡檢挑取光滑、磚紅色的單個(gè)菌落涂片，革蘭氏染色鏡檢，觀察記錄菌體形態(tài)和染色特征。2.4生化實(shí)驗(yàn)將各株細(xì)菌分別接種到用于鑒定的生化反響管中4編輯ppt二、實(shí)驗(yàn)方法2.5致病性實(shí)驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)將別離菌接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯，于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。取健康小白鼠6只，分為A、B兩組，A組3只，腹腔接種營(yíng)養(yǎng)肉湯菌液，每只0.2mL；B組3只，腹腔接種等量的滅菌生理鹽水作對(duì)照組，分別隔離飼養(yǎng)觀察。2.6藥物敏感試驗(yàn)將培養(yǎng)16-24h營(yíng)養(yǎng)瓊脂上的菌落接種于普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基外表涂布均勻，將接種的平板置室溫下枯燥3-5min后用無菌鑷子取含各種藥物的藥紙片緊貼于瓊脂外表，置35℃恒溫箱內(nèi)16-18h后，觀察結(jié)果。

5編輯ppt三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果麥康凱培養(yǎng)基菌落邊緣整齊或波狀，稍凸起，外表潤(rùn)滑直徑1.5-2.0mm,呈粉紅色或深紅色。如圖：伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基菌落圓形，呈藍(lán)紫色，中心為紫黑色，帶金屬光澤。如圖：肉湯培養(yǎng)基菌落大，直徑1.5-2.0mm，形成凸起光滑濕潤(rùn)，灰白色，半透明，邊緣整齊并常有特殊的糞樣臭味3.1細(xì)菌的別離培養(yǎng)6編輯ppt三.實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.2形態(tài)學(xué)觀察

經(jīng)鏡檢可見到革蘭氏陰性菌，兩端鈍圓，有長(zhǎng)約1.5～3.O微米的短小桿菌，偶有2～3個(gè)菌體相連，無芽孢。見圖：7編輯ppt三.實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.3生化鑒定將別離到的菌株，經(jīng)生化試驗(yàn)鑒定，分解葡萄糖、麥芽糖、甘露醇產(chǎn)酸產(chǎn)氣不分解蔗糖,MR試驗(yàn)呈陽性，VP試驗(yàn)為陰性，吲哚試驗(yàn)陽性，硝酸鹽試驗(yàn)陽性，枸櫞酸鹽試驗(yàn)陰性，硫化氰試驗(yàn)陰性。此結(jié)果符合大腸桿菌的特征，見表1：生化試劑

試驗(yàn)結(jié)果生化試劑

試驗(yàn)結(jié)果乳糖⊕構(gòu)椽酸鹽—葡萄糖⊕VP試驗(yàn)—甘露醇⊕靛基質(zhì)（吲哚）+麥芽糖⊕甲基紅MR試驗(yàn)+蔗糖

—硫化氫—硝酸鹽+尿素酶—8編輯ppt三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.4致病性實(shí)驗(yàn)小白鼠試驗(yàn)結(jié)果：接種36h內(nèi)A組小白鼠全部死亡，剖檢可見肝腫大、表現(xiàn)出點(diǎn)狀出血和灰白色壞死灶，脾臟瘀血，肺臟出血等明顯病理變化，從死亡小白鼠的心、肝、脾等病料中均能回收到接種菌；B組小白鼠飼養(yǎng)1周后全部存活，剖檢無病理變化。動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果說明：此次別離出的細(xì)菌對(duì)小白鼠有較強(qiáng)的致病性9編輯ppt三.實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.5藥物敏感試驗(yàn)抗菌藥物抑菌圈直徑（mm）結(jié)果判定抗菌藥物抑菌圈直徑（mm）結(jié)果判定阿奇霉素17高敏慶大霉素9.5耐藥卡那霉素16高敏氯霉素0不敏頭孢曲松16高敏氨芐西林7.5耐藥舒巴坦16高敏復(fù)方新諾明7耐藥頭孢氨芐10中敏阿米卡星8耐藥頭孢吡肟11中敏克林霉素0不敏阿莫西林-棒酸13中敏恩諾沙星8耐藥環(huán)丙沙星11.5中敏諾氟沙星8耐藥氧氟沙星7耐藥萬古霉素0不敏多西環(huán)素7耐藥青霉素0不敏林可霉素6.5耐藥阿莫西林0不敏鏈霉素8.5耐藥苯唑西林0不敏四環(huán)素0不敏紅霉素0不敏

10編輯ppt四.結(jié)論本試驗(yàn)從可疑病鴨別離到可疑菌經(jīng)形態(tài)學(xué)及培養(yǎng)條件觀察、生理生化實(shí)驗(yàn)分析鑒定，鑒定為鴨大腸桿菌的感染，經(jīng)動(dòng)物試驗(yàn)說明該別離菌株有較強(qiáng)的致病性。大腸桿菌病是一種常發(fā)病，但是卻難于控制，這不僅因?yàn)槠溲逍投?，各血清型間無交叉保護(hù)性，而且不同血清型對(duì)藥物的敏感性不一致。不同地區(qū)的大腸桿菌對(duì)藥物敏感性也各不一致。本次藥敏試驗(yàn)結(jié)果說明別離菌對(duì)舒巴坦、阿奇霉素、、頭孢曲松、卡那霉素高度敏感，而對(duì)頭孢吡肟、阿莫西林-棒酸、頭孢氨芐、環(huán)丙沙星中度敏感，而對(duì)氧氟沙星、復(fù)方新諾明、鏈霉素、慶大霉素、氨芐西林、克林霉素、諾氟沙星、等藥物