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現(xiàn)代生物技術(shù)專(zhuān)題宣城中學(xué)閆立2021-12-4結(jié)合圖片來(lái)說(shuō)一說(shuō)什么是基因工程?基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)展嚴(yán)厲的設(shè)計(jì),并經(jīng)過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性,從而發(fā)明出更符合人們需求的新的生物類(lèi)型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNA分子程度上進(jìn)展設(shè)計(jì)和施工的,因此又叫做DNA重組技術(shù)或基因拼接技術(shù)。基因工程培育抗蟲(chóng)棉的簡(jiǎn)要過(guò)程:普通棉花(無(wú)抗蟲(chóng)特性)蘇云金芽孢桿菌提取抗蟲(chóng)基因棉花細(xì)胞(含抗蟲(chóng)基因)棉花植株(有抗蟲(chóng)特性)重組DNA導(dǎo)入拼接上述培育抗蟲(chóng)棉的關(guān)鍵步驟是什么?普通棉花不具有抗蟲(chóng)性,科學(xué)家發(fā)現(xiàn)蘇云金芽孢桿菌可以產(chǎn)生一種毒蛋白,對(duì)棉鈴蟲(chóng)有一定的殺傷作用。試設(shè)計(jì)一個(gè)簡(jiǎn)單的方案,使棉花對(duì)棉鈴蟲(chóng)也有抵抗作用.一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀〞思索:1、怎樣從蘇云金芽孢桿菌體內(nèi)提取毒蛋白基因?2、這類(lèi)酶主要在哪些生物中可以找得到?為什么主要存在于這一類(lèi)生物?3、這一類(lèi)酶有什么作用?ATGC黏性末端黏性末端黏性末端:被限制酶切開(kāi)的DNA兩條單鏈的切口,帶有幾個(gè)伸出的核苷酸,他們之間正好互補(bǔ)配對(duì),這樣的切口叫黏性末端。一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀〞大多數(shù)限制酶的識(shí)別序列由6個(gè)核苷酸組成,例如,EcoRΙ、SmaΙ,也有少數(shù)有4、5或8個(gè)核苷酸組成。GAATTCCTTAAG中軸線CTTAAGAATTCG大腸桿菌的一種限制酶〔EcoRⅠ)能識(shí)別GAATTC序列,SmaI識(shí)別CCCGGG序列:
CCCGGGGGGCCCCCCGGGGGGCCC黏性末端平末端一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀〞當(dāng)限制酶從識(shí)別序列的中心軸線處切開(kāi)時(shí),產(chǎn)生的是平末端。當(dāng)限制酶從識(shí)別序列的中心軸線兩側(cè)切開(kāi)時(shí),產(chǎn)生的是黏性末端。一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀〞一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀〞主要是從原核生物中分別純化出來(lái)的一類(lèi)酶。1、來(lái)源:4000種2、種類(lèi):3、作用:識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)。(6個(gè),4、5、8個(gè))構(gòu)成兩種末端黏性末端平末端4、結(jié)果:要想獲得某個(gè)目的基因必需求用限制酶切幾個(gè)切口?可產(chǎn)生幾個(gè)黏性末端?一個(gè)目的基因有幾個(gè)黏性末端?要切兩個(gè)切口,產(chǎn)生四個(gè)黏性末端,兩個(gè)。假設(shè)把兩種來(lái)源不同的DNA用同一種限制酶來(lái)切割,會(huì)怎樣呢?會(huì)產(chǎn)生一樣的黏性末端。是不是把兩者的黏性末端黏合起來(lái),這樣就真的合成重組的DNA分子了?思索題:磷酸二酯鍵DNA銜接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合〞起來(lái),即把梯子兩邊扶手的斷口銜接起來(lái),這樣一個(gè)重組的DNA分子就構(gòu)成了。二、DNA銜接酶——“分子縫合針〞GAATTCCTTAAG即脫氧核糖、磷酸基之間的銜接GPAP思索:DNA銜接酶作用是什么?是不是把兩者的黏性末端黏合起來(lái),這樣就真的合成了重組的DNA分子?DNA銜接酶和DNA聚合酶的區(qū)別是什么?
1、種類(lèi):2、作用部位:E·coliDNA銜接酶〔黏性末端〕T4DNA銜接酶〔黏性末端和平末端〕磷酸二酯鍵DNA銜接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合〞起來(lái),即把梯子兩邊扶手的斷口銜接起來(lái),這樣一個(gè)重組的DNA分子就構(gòu)成了。二、DNA銜接酶——“分子縫合針〞GAATTCCTTAAG即脫氧核糖、磷酸基之間的銜接GPAP三、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車(chē)〞思索討論:1、怎樣把毒蛋白基因裝載到分子運(yùn)輸車(chē)上?2、毒蛋白基因進(jìn)入棉花細(xì)胞后,分子運(yùn)輸車(chē)怎樣保證它能穩(wěn)定的存在?3、毒蛋白基因能否進(jìn)入棉花細(xì)胞我們?cè)鯓硬鸥捎X(jué)察?4、分子運(yùn)輸車(chē)進(jìn)入到棉花細(xì)胞后能否對(duì)棉花本身的平安呵斥要挾?三、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車(chē)〞能自
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