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文檔簡介

選修1專題一1菌種/項目生物學分類代謝類型繁殖方式生產(chǎn)應(yīng)用發(fā)酵條件醋酸菌原核生物異養(yǎng)需氧二分裂生殖釀醋真核生物異養(yǎng)需氧孢子生殖制作腐乳一直需氧原核生物異養(yǎng)厭氧二分裂生殖制作泡菜不需氧前期需氧,后期不需氧一直需氧2最適溫度30℃~35℃7~8天適時充氣時間控制其他條件3制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量泡菜制作:乳酸菌無氧呼吸亞硝酸鹽檢測:在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸重氮化反應(yīng)后,與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色挑選葡萄→沖洗→榨汁→酒精發(fā)酵→醋酸發(fā)酵讓豆腐上長也毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制泡菜壇的選擇;腌制的條件;測定亞硝酸鹽含量的操作。量;防止雜菌污染。件。專題2課題1微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用1使用較為溫和的理化方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和適用實驗操作的空間、操作者的衣服和手煮沸消毒法(如在100℃,煮沸5~6)、微生物的培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌常用方法80℃,煮15);使用酒精、氯氣、石炭酸等化學藥劑進行消毒4包括培養(yǎng)基的制備和純化微生物兩個階段,純化(分離)微生物時常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。微生物培養(yǎng):水、無機鹽、碳源、氮源等平板劃線法:通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后,就可以得到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體,這就是菌落。稀釋涂布平板法:將菌液進行一系列梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。5(1①篩選菌株:利用選擇培養(yǎng)基篩選菌株。②測定微生物數(shù)量的常用方法:統(tǒng)計菌落數(shù)目(不是活菌數(shù))和顯微鏡直接計數(shù)。③土壤取樣→樣品的稀釋→微生物的培養(yǎng)與觀察。(2)分解纖維素的微生物的分離①實驗原理即:可根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。②流程:土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布平板→挑選菌落。專題三課題1專題三材料的選取:選擇花藥時(一般選擇單核期),一般要通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。確定花粉發(fā)育時植物組織培養(yǎng)(參照選修三)課題2月季的花藥培養(yǎng)期的最常用的方法是細胞核染成。但是,某些植物的花粉細胞核不易著色,需采用-,這種方法能將專題四課題1果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用1、2、影響酶活性的因素:溫度、PHPH專題四課題2探討加酶洗衣粉的洗劑效果一、實驗原理1.加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉,目前常用的酶制劑有四類:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶,其中,應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。2.堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污跡從衣物上脫落。脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶也能分別將大分子的脂肪、淀粉和纖維素水解為小分子物質(zhì),使洗衣粉具有更好的去污能力。專題四課題3酵母細胞的固定化一、實驗原理1.固定化酶和固定化細胞是利用物理或化學方法將酶或細胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù),包括包埋法、化學結(jié)合法和物理吸附法。一般來說,酶更適合采用化學結(jié)合法和物理吸附法固定,而細胞多采用包埋法固定化。這是因為細胞個大,而酶分子很??;個大的難以被吸附或結(jié)合,而個小的酶容易從包埋材料中漏出。固定化酶優(yōu)點:使酶既能與反應(yīng)物接觸,又能與產(chǎn)物分離,還可以被反復利用。固定化細胞優(yōu)點:成本更低,操作更容易,可以催化一系列的化學反應(yīng)。課題5專題五DNA的粗提取與鑒定一、實驗原理提取生物大分子的基本思路是選用一定的物理或化學方法分離具有不同物理或化學性質(zhì)的生物大分子。對于DNA的粗提取而言,就是要利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學性質(zhì)方面的差異,提取,去除其他成分。1.DNA的溶解性DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,利用這一特點,選擇適當?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達到分離目的。(0.14mol/L時溶解度最低)此外,DNA不溶于酒精溶液,但是細胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理,可以將DNA與蛋白質(zhì)進一步的分離。2.DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但是對DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080C的高溫,而DNA在80oC以上才會變o性。洗滌劑能夠瓦解細胞膜,但對DNA沒有影響。3.DNA的鑒定在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。二、實驗設(shè)計1.實驗材料的選取凡是含有DNA的生物材料都可以考慮,但是使用DNA含量相對較高的生物組織,成功的可能性更大。2.破碎細胞,獲取含DNA的濾液動物細胞的破碎比較容易,以雞血細胞為例,在雞血細胞液中加入一定量的蒸餾水,同時用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可。如果實驗材料是植物細胞,需要先用洗滌劑溶解細胞膜。例如,提取洋蔥的DNA時,在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽,進行充分的攪拌和研磨,過濾后收集研磨液。注意:①為什么加入蒸餾水能使雞血細胞破裂?利用細胞吸水漲破的原理。②加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么?洗滌劑是一些離子去污劑,能溶解細胞膜,有利于DNA的釋放;食鹽的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。③為什么反復地溶解與析出,能夠去除雜質(zhì)?用高鹽濃度的溶液溶解DNA,能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì);用低鹽濃度使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此,通過反復溶解與析出DNA,就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)。3.DNA的析出與鑒定將處理后的溶液過濾,加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液,靜置2~3min,溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物,這就是粗提取的。用玻璃棒沿一個方向攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取上面的水分。取兩支20ml的試管,各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液,將絲狀物放入其中一支試管中,用玻璃棒攪拌,使絲狀物溶解。然后,向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑?;旌暇鶆蚝?,將試管置于沸水中加熱5min,待試管冷卻后,比較兩支試管溶液顏色的變化,看看溶解有DNA的溶液是否變藍。四、注意事項1.以血液為實驗材料時,每100ml血液中需要加入3g檸檬酸鈉防止血液凝固。2.加入洗滌劑后,動作要輕緩、柔和,否則容易產(chǎn)生大量的泡沫,不利于后續(xù)步驟地操作。加入酒精和用玻璃棒攪拌時,動作要輕緩,以免DNA分子的斷裂,導致DNA分子不能形成絮狀沉淀。3.二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,否則會影響鑒定的效果。4.DNA的溶解度與NaCl溶液濃度的關(guān)系:當NaCl溶液濃度低于0.14mol/L時,隨濃度的升高,DNA的溶解度降低;當NaCl溶液濃度高于0.14mol/L時,隨濃度升高,DNA的溶解度升高。專題四課題6血紅蛋白的提取和分離一、實驗原理蛋白質(zhì)的物化理性質(zhì):形狀、大小、電荷性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)、親和力等千差萬別,由此提取和分離各種蛋白質(zhì)。1.凝膠色譜法(分配色譜法):(1先被洗脫出來;分子量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部,路程長,流動慢。(2)凝膠材料:多孔性,多糖類化合物,如葡聚糖、瓊脂糖。(3)分離過程:混合物上柱→洗脫→大分子流動快、小分子流動慢→收集大分子→收集小分子洗脫:從色譜柱上端不斷注入緩沖液,促使蛋白質(zhì)分子的差速流動。2.緩沖溶液緩沖液作用:抵制外界酸、堿對溶液pH的干擾而保持pH穩(wěn)定。3.凝膠電泳法:(1)原理:不同蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì)、電量、形狀和大小不同,在電場中受到的作用力大小、方向、阻力不同,導致不同蛋白質(zhì)在電場中的運動方向和運動速度不同。(電量大,速度快)(2)分離方法:瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。(3)分離過程:在一定pH下,使蛋白質(zhì)基團帶上正電或負電;加入帶負電荷多的SDS,形成“蛋白質(zhì)-SDS使蛋白質(zhì)遷移速率僅取決于分子大小,可用于測定蛋白質(zhì)分子量。2.破碎細胞,獲取含DNA的濾液動物細胞的破碎比較容易,以雞血細胞為例,在雞血細胞液中加入一定量的蒸餾水,同時用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可。如果實驗材料是植物細胞,需要先用洗滌劑溶解細胞膜。例如,提取洋蔥的DNA時,在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽,進行充分的攪拌和研磨,過濾后收集研磨液。注意:①為什么加入蒸餾水能使雞血細胞破裂?利用細胞吸水漲破的原理。②加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么?洗滌劑是一些離子去污劑,能溶解細胞膜,有利于DNA的釋放;食鹽的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。③為什么反復地溶解與析出,能夠去除雜質(zhì)?用高鹽濃度的溶液溶解DNA,能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì);用低鹽濃度使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此,通過反復溶解與析出DNA,就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)。3.DNA的析出與鑒定將處理后的溶液過濾,加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液,靜置2~3min,溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物,這就是粗提取的。用玻璃棒沿一個方向攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取上面的水分。取兩支20ml的試管,各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液,將絲狀物放入其中一支試管中,用玻璃棒攪拌,使絲狀物溶解。然后,向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑?;旌暇鶆蚝?,將試管置于沸水中加熱5min,待試管冷卻后,比較兩支試管溶液顏色的變化,看看溶解有DNA的溶液是否變藍。四、注意事項1.以血液為實驗材料時,每100ml血液中需要加入3g檸檬酸鈉防止血液凝固。2.加入洗滌劑后,動作要輕緩、柔和,否則容易產(chǎn)生大量的泡沫,不利于后續(xù)步驟地操作。加入酒精和用玻璃棒攪拌時,動作要輕緩,以免DNA分子的斷裂,導致DNA分子不能形成絮狀沉淀。3.二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,否則會影響鑒定的效果。4.DNA的溶解度與NaCl溶液濃度的關(guān)系:當NaCl溶液濃度低于0.14mol/L時,隨濃度的升高,DNA的溶解度降低;當NaCl溶液濃度高于0.14mol/L時,隨濃度升高,DNA的溶解度升高。專題四課題6血紅蛋白的提取和分離一、實驗原理蛋白質(zhì)的物化理性質(zhì):形狀、大小、電荷性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)、親和力等千差萬別,由此提取和分離各種蛋白質(zhì)。1.凝膠色譜法(分配色譜法):(1先被洗脫出來;分子量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部,路程長,流動慢。(2)凝膠材料:多孔性,多糖類化合物,如葡聚糖、瓊脂糖。(3)分離過程:混合物上柱→洗脫→大分子流動快、小分子流動慢→收集大分子→收集小分子洗脫:從色譜柱上端不斷注入緩沖液,促使蛋白質(zhì)分子的差速流動。2.緩

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