各類鼻咽癌細(xì)胞株特性及來源

各類鼻咽癌細(xì)胞株特性及來源CNE1為鼻咽高分化鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系；CNE2、HNE1、HNE2、HNE3、HONE1為鼻咽低分化鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系；5—8F為鼻咽低分化鱗狀細(xì)胞癌，細(xì)胞系SUNE—1亞株，具有高轉(zhuǎn)移、高成瘤能力；6-10B為鼻咽低分化鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系SUNE-1亞株，具有高成瘤潛能，不轉(zhuǎn)移特性。C666-1為長期攜帶EB病毒基因的低分化鼻咽癌細(xì)胞株；HK-1為攜帶EB病毒基因的高分化鼻咽癌細(xì)胞株?NP69為永生化鼻咽上皮細(xì)胞系，于1XKsFM（keratinoeyteserum-freemedium,KSFM）培養(yǎng)基中，37C、5%CO2、飽和濕度條件下培養(yǎng)，呈現(xiàn)鱗狀上皮樣、貼壁生長，具有正常鼻咽上皮的特性。CNE11癌組織來源病人王某某，女，58歲，，籍貫吉林省，，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院日壇醫(yī)院住院號：2382248.1975年8月13日患者因頭痛耳鳴、鼻衄等癥狀來院就診。臨床檢查鼻咽部有菜花樣腫物，腫瘤已侵犯顱底和顱神經(jīng)（川，IV,區(qū)劉），雙頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，診斷為鼻咽癌。X光診斷為鼻咽后壁軟組織腫物符合鼻咽癌，顱底象見左側(cè)翼狀突外板可疑骨質(zhì)破壞，鼻咽部腫物作活檢，病理診斷為高分化鱗癌。培養(yǎng)過程在第12代時（培養(yǎng)后的6個月），在上皮樣細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)有少量梭形細(xì)胞。在有的培養(yǎng)瓶中，梭形細(xì)胞逐漸增加。在接種少量細(xì)胞的培養(yǎng)瓶中，有的全為上皮樣細(xì)胞，有的全為梭形細(xì)胞。選擇全為上皮樣的細(xì)胞傳代，稱CNE細(xì)胞株；全為梭形的細(xì)胞傳代，稱CNF細(xì)胞株CNE細(xì)胞株容易形成空泡，不傳代的老細(xì)胞，在顯微鏡下可見到有些細(xì)胞的胞漿突出，然后脫落成死細(xì)胞，還有多核巨細(xì)胞。在這二株細(xì)胞，特別是CNF細(xì)胞的單層或多層細(xì)胞上有很多圓形細(xì)胞，核大，漿少。在培養(yǎng)液中也有大量圓的脫落細(xì)胞。將培養(yǎng)液中的懸浮細(xì)胞接種于培養(yǎng)瓶，細(xì)胞仍能貼瓶，生長出原來的上皮樣細(xì)胞或梭形細(xì)胞。將CNE,CNF細(xì)胞和這二株細(xì)胞的脫落細(xì)胞培養(yǎng)成單層后，不傳代，每周換液二次，繼續(xù)培養(yǎng)7個月，未能得到類淋巴母細(xì)胞株，在培養(yǎng)過程中未見到腫瘤組織培養(yǎng)中常見到的成纖維細(xì)胞生長。特性CNE-22組織來源和培養(yǎng)方法組織取自鼻咽癌（W期）患者，林XX，63歲，男性，廣東籍,活檢組織病理檢查為慢性鼻咽炎，但同時負(fù)壓吸引的鼻咽脫落細(xì)胞為低分化鱗狀細(xì)胞癌（圖1）?病人血清的EB病毒抗體和鼻咽脫落細(xì)胞的EBNA檢測，病人血清的各種抗EB病毒抗體的滴度分別為：VCA/IgG1:320，EAIgG1:160，VCA/lgA1:40，EA/lgA<1:5，抗EBNA抗體為1:160=鼻咽脫落細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)成團(tuán)的癌細(xì)胞呈EBNA陽性細(xì)胞株的EB病毒抗原用抗補(bǔ)體免疫熒光試驗(yàn)檢查CNE-2細(xì)胞中各種EB病毒抗原。體外培養(yǎng)第3代細(xì)胞可見2谷淑燕，趙文平，曾毅，唐慰平趙明倫鄧惠華，李昆.從低分化鼻咽癌病人建立鼻咽癌上皮細(xì)胞株[J].癌癥，1983,02:70-72+129-130?EBNA陽性，胞核呈顆粒狀明亮的熒光，細(xì)胞傳至第11代后進(jìn)行多次檢查，EBNA均呈陰性。經(jīng)ludR或巴豆油、丁酸激活的細(xì)胞，檢查EA、VCA也呈陰性。將細(xì)胞與類淋巴母細(xì)胞株HK-1共同培養(yǎng)，觀察EB病毒對上皮細(xì)胞的再感染，6天后上皮細(xì)胞的EBNA仍呈陰性。HNE1、HNE2，HNE3和HONE1324組織細(xì)胞培養(yǎng)及建株腫瘤組織取自4倒男性鼻咽癌初診患者，分別命名為HNE1、HNE2,HNE3和HONE1，其中HNE1和H0NE1為EBV陽性，HNE2和HNE3為EBV陰性。病理診斷均為低分化鱗癌。EBV抗原及EBV基因組分析EBNA檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn).HNE￡和HONE1細(xì)胞30代以前均為EBNA陽性，HNE2和HNE3則為陰性。晚代HNE1和HONE1細(xì)胞的EBNA也逐漸轉(zhuǎn)為陰性，而從HONE1第5代細(xì)胞中克隆出來的CL40亞株的EBNA則非常穩(wěn)定，傳至52代其EBNA陽性率仍高達(dá)85—90%,VCA結(jié)果示HNE1、HNE2、HNE3,均為EA/VCA朗性.HONE細(xì)胞中只有0.1%為陽性。3人體鼻咽癌上皮樣細(xì)胞株和梭形細(xì)胞株的建立[J].中國