仿刺參(Apostichopus-japonicus)成參體腔細胞酚氧化酶的特性研究.x課件_第1頁
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仿刺參（Apostichopusjaponicus）成參體腔細胞酚氧化酶的特性研究酚氧化酶（phenoloxidase,PO）是無脊椎動物先天性免疫系統(tǒng)中的重要免疫相關(guān)酶。為了解仿刺參（Apostichopusjaponicus）成參體腔細胞中酚氧化酶的生化與酶學(xué)特性,本研究以雌性和雄性仿刺參成參的體腔細胞為樣品,利用線性連續(xù)梯度非變性電泳結(jié)合鄰苯二酚發(fā)色技術(shù)鑒定和分離了酚氧化酶,然后通過分光光度法測定了酚氧化酶的生化與酶學(xué)特性,并通過生長曲線測定法進行了仿刺參酚氧化酶氧化產(chǎn)物的抗菌特性分析。1.從仿刺參成參體腔細胞中鑒定出4種酚氧化酶（按非變性電泳遷移速率由慢到快分別命名為AjPO1、AjPO2、AjPO3、AjPO4）。2.AjPO4為雌性仿刺參成參體腔細胞所特有,并且在仿刺參幼參體腔細胞中未鑒定出上述4種酚氧化酶,表明仿刺參成參和幼參之間以及雌性和雄性成參之間在酚氧化酶系統(tǒng)的組成上均存在顯著差異。3.4種酚氧化酶的最適pH分別為9、8、9和8。沸水浴處理20min后,AjPO1、AjPO2和AjPO3活力無顯著變化,而AjPO4活力顯著下降,表明AjPO1、AjPO2和AjPO3的耐熱性強于AjPO4。4.4種酚氧化酶均可催化鄰苯二酚、左旋多巴、多巴胺和對苯二酚,其中最適底物為鄰苯二酚,但不能催化酪氨酸,表明4種酚氧化酶均屬于漆酶型酚氧化酶。5.4種酚氧化酶的活力可被Mn<sup>2+</sup>和Fe<sup>2+</sup>激活,表明仿刺參成參酚氧化酶系統(tǒng)的功能發(fā)揮可能受到體內(nèi)二價金屬離子的調(diào)節(jié)。另外,4種

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