微生物曲霉菌屬課件

四、曲霉菌屬

曲霉菌屬（Aspcrgillus）是絲孢目叢?？频恼婢?。

分布：廣泛，有些菌種可在食品、儲糧和動物飼料中生長。

危害：引起糧食等的霉壞，而且還產(chǎn)生霉素，對人畜健康造成很大威脅。概況概況菌絲分支分隔，接觸培養(yǎng)基的菌絲分化出足細胞，其上生出直立的分生孢子柄，頂端膨大成球形頂囊，在頂囊處以輻射方式生出桿狀小梗（一排或兩排），頂端產(chǎn)生一連串分生孢子。

分生孢子柄、頂囊、小梗和分生孢子合成孢子頭，可用于產(chǎn)生淀粉酶、蛋白酶和磷酸二酯酶等，也是釀造工業(yè)中的常見菌種。分生孢子為單細胞，有黑、黃、白、綠等多種不同顏色，是鑒別不同菌種的依據(jù)。米曲霉、醬油曲霉是常用發(fā)酵菌種。黃曲霉、煙曲霉菌是常見禽畜致病菌。黃曲霉菌也是地球的早期生命。概況黃曲霉菌

分布廣泛，常生長于花生仁及玉米、花生餅、棉籽餅和秸稈等飼料上，還可以在各種食物及肉類制品上生長繁殖，并產(chǎn)生黃曲霉素散入各基質(zhì)中，引起人畜中毒。黃曲霉毒素是由黃曲霉和寄生曲霉產(chǎn)生的雜環(huán)化合物，它的代謝產(chǎn)物主要有B1、B2、G1、G2、M1和M2等類型。顯微鏡下的黃曲霉黃曲霉菌1.形態(tài)特征分生孢子梗多從基質(zhì)部生出，長度小于1mm,壁厚無色粗糙。頂囊早起較長，晚期呈燒瓶形或近似球形，直徑10~65mm。頂囊上產(chǎn)生小梗（單層或雙層），小梗頂端著生分生孢子，孢子呈球形、近似橘形。2.培養(yǎng)特征可以培養(yǎng)于沙氏培養(yǎng)基、2%麥芽糖及7.5%氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基上。生長溫度為28~30°C，相對濕度在80%以上。菌落生長較快。呈扁平狀，也有褶皺呈腦回狀。最初帶黃色，后變黃綠色，老齡菌落呈暗色，反面帶褐色或無色。成份：蛋白胨、水、瓊脂、葡萄糖或麥芽糖制法：將上述物質(zhì)稱好，放入水中煮沸溶解分裝包扎，高壓后凝固備用。用途：作分離培養(yǎng)霉菌用。注意：1接種臨床新鮮標本可先加1-2滴70%酒精讓干后再接種于含12．5%氯霉素沙氏斜面培養(yǎng)基上。

實驗室條件下接種黃曲霉菌3.致病性黃曲霉菌的致病性主要是其所產(chǎn)生的毒素。在各類黃曲霉毒素中，黃曲霉毒素Ｂ1的毒性最大，其次是M1、G1、M2、B2和G2。因此，許多國家規(guī)定了黃曲霉毒素在食品中的極限值，即食品中的黃曲霉毒素含量不允許超過此值。黃曲霉菌的毒性極強，遠遠高于氰化物、砷化物和有機農(nóng)藥的毒性，其中以B1毒性最大。當人攝入量大時，可發(fā)生急性中毒，出現(xiàn)急性肝炎、出血性壞死、肝細胞脂肪變性和膽管增生。當微量持續(xù)攝人，可造成慢性中毒，生長障礙，引起纖維性病變，致使纖維組織增生。AFT的致癌力也居首位，是目前已知最強致癌物之一。B1毒性分類黃曲霉毒素是一種強烈的肝臟毒，可使牛、豬、馬、雞、鴨、綿羊等多種動物發(fā)生霉菌毒素中毒。4.感染途徑散布在空氣中的分生孢子在有利的條件下菌絲本身也可伸長增殖。菌絲形成隔壁即可產(chǎn)生兩個獨立的細胞。此外稱做子囊孢子的有性孢子也具有增殖的能力?？梢鹨苑螢橹鞯亩鄠€臟器的非壞死性肉芽腫性病變。在病變部位可見大量的嗜中性粒細胞浸潤，其中可見呈Y字型分歧的有隔壁的菌絲。分為化學方法（薄層層析）、生物學方法和免疫學方法三大類。

5.微生物學診斷1、生物學方法

1）抑菌試驗黃曲霉菌有抑制某些微生物生長的作用，故用其抑菌作用來測定黃曲霉菌的存在和含量。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)巨大芽胞桿菌和短芽胞桿菌對AFT最敏感。通過平皿中抑菌圈大小來衡量黃曲霉菌含量。

2）熒光測定法根據(jù)黃曲霉菌在紫外光照射下可發(fā)出熒光的原理，將待檢菌株接種于培養(yǎng)基中，28—30~C培養(yǎng)48～72小時，產(chǎn)生的毒素便浸入培養(yǎng)基中，在紫外燈光下照射培養(yǎng)基會呈現(xiàn)出特異的熒光。此法操作簡便。對AFT最低檢出量為5pg／ml?！?）大白鼠試驗法黃曲霉菌對大白鼠毒性最早出現(xiàn)損害的是肝臟，其受損范圍廣，而幼鼠最敏感，雄性幼鼠比雌性幼鼠敏感性更高，用100－150g大白鼠作急性中毒試驗，一般3—4天死亡。4）雞胚試驗5）鴨雛試驗鴨雛對黃曲霉菌非常敏感，致死性強，一般用一次劑量后72小時內(nèi)死亡。

6）斑點試驗本法用于檢測真菌毒素致突變試驗的一種有意義的方法。主要利用沙門氏菌/微粒體突變性來檢測某些樣品種AFT的存在與含量。

A先將鼠傷寒沙門氏菌組氨酸缺陷型變種的菌懸液，與一定量肝組織勻漿混合作傾注平板。

B待凝固后，再將一定量被檢物(含AFT)加在平板中央待黃曲霉菌往外圍瓊脂中擴散時，圍繞中心點將出現(xiàn)密布的回復突變的菌落。本法作為一種生物學檢驗法廣泛應用于開發(fā)安全、有用的化學物質(zhì)和檢測食品或農(nóng)產(chǎn)品中黃曲霉菌。2．免疫學方法

黃曲霉菌是分子量為312～346的二氫呋喃香豆素的衍生物，無免疫原性，不能引起抗體的產(chǎn)生，故必須與大分子化學基團或蛋白質(zhì)偶聯(lián)，成為完全抗原，方能引起免疫動物的抗體形成，然后利用血清學方法檢測AFT由于黃曲霉菌的量一般都較低，因此，檢測方法主要是敏感性較高的放射免疫測定法(RIA)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。煙曲霉菌可使雞鴨鵝鴿及鸚鵡發(fā)生曲霉菌病或霉菌性肺炎。也可在發(fā)霉的飼料中產(chǎn)生毒素，一起家畜中毒。是曲霉菌屬中致病性最強。煙曲霉菌煙曲霉菌分生子孢頭1.形態(tài)特征孢子為圓形，呈藍綠色，直徑2.5~3.5um,呈連珠狀排列。分生孢子柄長250~300um，分布在有隔板的縱橫交織的氣聲菌絲上。2.培養(yǎng)基特征在沙氏培養(yǎng)基上初形成白色、圓形、絨毛狀菌落，最后變成深綠色或者灰綠色。3.致病性

可使雞鴨鵝等曲霉菌病或霉菌性肺炎，在幼禽多呈急性經(jīng)過；哺乳動物及人也可感染。在感染組織的過程中，還可產(chǎn)生