非發(fā)酵革蘭陰性菌課件

非發(fā)酵革蘭陰性菌DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity非發(fā)酵菌

Nonfermenters概念：一大群不發(fā)酵葡萄糖或僅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厭氧、無(wú)芽胞的革蘭陰性桿菌。DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity主要菌屬：

假單胞菌屬(Pseudomonas)

產(chǎn)堿桿菌屬(Alcaligenes)

不動(dòng)桿菌屬(Acinetobacter)

莫拉菌屬(Moraxella)

黃桿菌屬(Flavobacterium)

叢毛單胞菌屬(Comamonas)

無(wú)色桿菌屬（Achromobacter）艾肯菌屬(Elikenella)

土壤桿菌屬(Agrobacterium)DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity第一節(jié)假單胞菌屬（Pseudomonas）

------銅綠假單胞菌P.aeruginosa

廣泛存在于自然環(huán)境，是引起醫(yī)院內(nèi)感染的常見病原菌，屬于重點(diǎn)監(jiān)測(cè)菌株。為人體正常菌群的一部分，多數(shù)為條件致病菌。具有天然抗藥性，常呈多重耐藥,且耐藥率逐年增加。常見菌有：銅綠假單胞菌P.aeruginosa

熒光假單胞菌P.fluorecence

惡臭假單胞菌P.Putide\DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity

1、形態(tài)染色：G-直或微彎細(xì)長(zhǎng)桿菌，有莢膜，端生單鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑。

2、培養(yǎng)特性：營(yíng)養(yǎng)要求不高：專性需氧，4℃不生長(zhǎng)，42℃可生長(zhǎng)；液體——混濁，形成菌膜；血平板——金屬光澤、特殊氣味、透明溶血環(huán)；普通平板——多種色素（綠膿素和熒光素）MAC---半透明，48h后中心棕綠色一、生物學(xué)性狀：DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversityDepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversityDepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversityDepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity

典型菌落大腸菌樣型菌落粗糙型菌落粘液型菌落侏儒型菌落DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity3、生化反應(yīng)：氧化酶陽(yáng)性；在O/F培養(yǎng)基上，氧化分解葡萄糖；精氨酸雙水解酶陽(yáng)性；利用枸櫞酸鹽；液化明膠；還原硝酸鹽為亞硝酸鹽并產(chǎn)生氮?dú)?。DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity4、抗原構(gòu)造與分型：

外膜蛋白：具有屬的特異性菌體(O)抗原脂多糖：具有型特異性鞭毛（H）抗原

DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity5、抵抗力強(qiáng)：

對(duì)干燥、紫外線有抵抗力；在蒸餾水中長(zhǎng)期存活對(duì)多種抗生素耐藥---先形成生物膜，產(chǎn)生耐藥性（通透性差）

對(duì)熱抵抗力弱，56℃30min可被殺死；對(duì)消毒劑敏感，1%石炭酸5min即被殺死；DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversityPA

對(duì)亞胺培南的耐藥性

銅綠假單胞菌對(duì)β內(nèi)酰胺酶類抗生素的耐藥性明顯增加,尤其是耐碳青霉烯類PA所致感染已成為臨床抗感染治療的棘手問(wèn)題。耐碳青霉烯類抗生素PA的耐藥機(jī)制較復(fù)雜：①產(chǎn)生β--內(nèi)酰胺酶，如：金屬β-內(nèi)酰胺酶②特異性的孔蛋白OprD2缺失③細(xì)菌主動(dòng)外排系統(tǒng)。DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity菌體結(jié)構(gòu)毒素酶致病物質(zhì)二、致病性：DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity2、所致疾?。?/p>

條件致病菌：免疫力低下者易感。醫(yī)院內(nèi)感染：醫(yī)院環(huán)境監(jiān)測(cè)（水、物體表面、

空氣）；藥物敏感性變遷—指導(dǎo)臨床用藥。臨床表現(xiàn)多樣：化膿性細(xì)菌燒傷感染：綠色、惡臭膿液—滲透過(guò)多層紗布。呼吸道感染：常見于免疫力低下者，肺感染者痰中帶血。中耳炎：常見于慢性感染者。眼角膜炎：穿孔后失明。如果合并敗血癥者死亡率高DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity院內(nèi)感染的重要地位1、在院內(nèi)感染比率僅次于大腸桿菌10%2、院內(nèi)感染常見類型：下呼吸道或肺部感染傷口感染尿路感染免疫功能低下者—敗血癥心臟術(shù)后DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity三、微生物檢驗(yàn)1、標(biāo)本采集：血液、腦脊液、胸腹水、尿液、痰液、膿汁等。醫(yī)院環(huán)境監(jiān)控：可采集空氣、水、物體表面等。2、直接鏡檢：涂片、革蘭染色3、分離培養(yǎng)：直接接種或增菌后接種血平板和MAC4、鑒定：根據(jù)菌落特征、色素、菌體形態(tài)、氧化酶試驗(yàn)等作出鑒定。對(duì)無(wú)色素菌株應(yīng)與其他假單胞菌鑒別。5、結(jié)果報(bào)告：①無(wú)正常菌群部位的標(biāo)本，有臨床意義。②有正常菌群的部位標(biāo)本，有臨床特征，檢出有意義。③有正常菌群的部位標(biāo)本，無(wú)臨床特征，檢出無(wú)意義病房物體表面不得檢出銅綠假單胞菌外科、婦科空氣培養(yǎng)不得檢出銅綠假單胞菌DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity2.檢驗(yàn)程序血液腦脊液、胸腹水、膿液、痰、尿液糞便

營(yíng)養(yǎng)肉湯分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)（血瓊脂，麥康凱)涂片染色(SS，麥康凱)

初步鑒定最后鑒定

菌落；形態(tài)；色素；氧化酶生化反應(yīng)分型

血噬綠基清菌膿因型體素型DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity非發(fā)酵菌生化編碼鑒定結(jié)果記錄表試驗(yàn)項(xiàng)目1O/F發(fā)酵管4氧化酶2枸櫞酸鹽1麥芽糖4精氨酸雙水解2甘露醇1木糖4硝酸鹽還原2DNA1乙酰胺結(jié)果總值鑒定值

鑒定結(jié)果

鑒定者

DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity銅綠假單胞菌的鑒定要點(diǎn)及與其他假單胞菌的區(qū)別試驗(yàn)銅綠假單胞菌熒光假單胞菌惡臭假單胞菌斯氏假單胞菌嗜麥芽假單胞菌鼻疽假單胞菌類鼻疽假單胞菌氧化酶++++—+/-+熒光素+++/—————青膿素++/—+/—————?jiǎng)恿?++++—+葡糖氧化+++++++乳糖氧化—+——+++蔗糖氧化—+——+++木糖氧化+++++—+賴氨酸脫羧酶————+——精氨酸脫羧酶+++——++硝酸鹽還原+/-+—+——+明膠液化—/+—/+——+—+42℃

生長(zhǎng)+——+/—+/——+DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity銅綠假單胞菌的鑒定依據(jù)DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity四、防治原則

銅綠假單胞菌可由各種途徑傳播，但主要是通過(guò)污染醫(yī)療器械、用具及帶菌醫(yī)護(hù)人員引起醫(yī)源性感染。結(jié)合臨床感染癥狀，如果無(wú)感染癥狀則作為正常菌群（住院患者帶菌率20%）。臨床治療必須密切遵循藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果。DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity第二節(jié)不動(dòng)桿菌屬

Acinetobacter不動(dòng)桿菌(Acinetobacter)為一群氧化酶陰性，不發(fā)酵糖類、無(wú)動(dòng)力的革蘭陰性菌。主要包括：DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversityDepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversityDepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversityDepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversityDepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity見下表二、致病性1、腐生菌、水中100%有、自來(lái)水清洗器械。2、產(chǎn)生青霉素酶。3、其感染多見于嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病、大量使用抗生素、激素、呼吸機(jī)使用者、透析患者：

※菌血癥：靜脈導(dǎo)管導(dǎo)致

※傷口感染：蜂窩組織炎

※胸外科術(shù)后易感DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity試驗(yàn)醋酸鈣不動(dòng)桿菌鮑曼不動(dòng)桿菌溶血不動(dòng)桿菌瓊氏不動(dòng)桿菌約翰遜不動(dòng)桿菌洛菲不動(dòng)桿菌葡糖氧化+++/————木糖氧化—++/————乳糖氧化++

—+++精氨酸雙水解酶++++—/+—鳥氨酸脫羧酶++————苯丙氨酸脫氨酶++————丙二酸鹽利用+++——/+—檸檬酸鹽利用++++/—+—明膠液化+++———生長(zhǎng)溫度37℃++++—+41℃—+—+——44℃—+————不動(dòng)桿菌屬主要菌種生化反應(yīng)特征DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity血平板和MACDepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity(3)初步鑒定

染色為革蘭陰性球桿狀菌，成對(duì)排列，氧化酶（-），O/F試驗(yàn)為氧化型，動(dòng)力（-），硝酸鹽還原（-）。符合上述結(jié)果即可判定為不動(dòng)桿菌屬的細(xì)菌。與屬內(nèi)其他菌的鑒別：DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity不動(dòng)桿菌屬檢驗(yàn)程序血液、腦脊液增菌培養(yǎng)血平板和MAC

DepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity第三節(jié)產(chǎn)堿桿菌屬

AlcaligenesDepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversityDepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversityDepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversityDepartmentofMicrobiology,HebeiNorthUniversity