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文檔簡介
腦脊液及漿膜腔積液檢查內(nèi)科教研室
實習(xí)目的和要求掌握標(biāo)本的采集和送檢要求掌握滲出液與漏出液的鑒別特點掌握常見腦及腦膜疾病的腦脊液鑒別特點熟悉漿膜腔積液及腦脊液檢查的臨床意義了解實驗原理與方法標(biāo)本的采集和送檢要求一般為穿刺后所得如腰穿胸穿腹穿心包穿收集于三只試管內(nèi):第一管行第二管行第三管行及時送檢:防止細(xì)胞破壞,糖分解或形成凝塊細(xì)菌學(xué)檢查細(xì)胞計數(shù)和分類檢查化學(xué)和免疫學(xué)檢查腦脊液及漿膜腔穿刺液檢查器材與試劑顯微鏡飽和石碳酸
冰醋酸量筒比重計小試管計數(shù)板
吸管移液管微量移液器水浴箱葡萄糖檢測試劑盒分光光度計
腦脊液檢查內(nèi)容與方法一般性狀檢查:
壓力:
顏色透明度
薄膜形成
比重(1.006~1.008)
PH(7.35~7.40)
化學(xué)檢查顯微鏡檢
細(xì)胞學(xué)檢查細(xì)菌學(xué)檢查報告方式:一般性狀+化學(xué)檢查+顯微鏡檢70-180mmH2O化學(xué)檢查蛋白質(zhì)檢查
潘迪氏實驗(PandyTest):球蛋白定性試驗,其原因是腦脊液在病變時,蛋白有不同程度的增加,多為球蛋白增加,在潘氏試驗中球蛋白遇酚而變性,出現(xiàn)沉淀而成陽性。
方法:取試管放入飽和石炭酸溶液1-2ml,用滴管滴入腦脊液1-2滴,若出現(xiàn)白色沉淀,為陽性.糖檢測:腦脊液含糖約為血糖的60%,正常含量為2.5-4.5mmol/L,化腦或結(jié)腦時,腦脊液含糖量減少氯化物檢查:正常為120~130mmol/L酶學(xué)檢查:CK、AST、LDH、IZM、ADA等腦脊液檢查腦脊液及漿膜腔穿刺液檢查(糖檢測)原理:葡萄糖+2水+GOD→D-葡糖酸+2水紅色醌類化合物酚+4AAP步驟:待測管標(biāo)準(zhǔn)管空白管樣本20ul標(biāo)準(zhǔn)液20ul
蒸餾水20ul工作液2ml2ml2ml混勻,37℃,10分鐘,505nm比色樣本濃度=(樣本光度值/標(biāo)準(zhǔn)液光度值)×標(biāo)準(zhǔn)液濃度細(xì)胞學(xué)檢查
細(xì)胞總數(shù)計數(shù):四個大方格內(nèi)細(xì)胞總數(shù)細(xì)胞分類:離心后用沉淀物涂片以瑞氏染色法染色并分類。分類計數(shù)至少要查找100個細(xì)胞,每種細(xì)胞用百分率表示白細(xì)胞計數(shù):將一小試管吸少量冰醋酸潤濕管腔,再加少量穿刺液,搖勻后滴入計數(shù)池內(nèi)。此時紅細(xì)胞已被破壞,計數(shù)四個大方格的白細(xì)胞數(shù)。白紅紅紅紅紅計數(shù)板計數(shù)原理大方格長寬均為1mm計數(shù)池深0.1mm每個大方格體積=1×1×0.1=0.1mm3即0.1ul計算:每升CSF中細(xì)胞數(shù)目=4個大方格內(nèi)細(xì)胞個數(shù)/4(0.1ul)×10(1ul)×106(1L)白白白白白白白白1mm1mm病原體檢查微生物檢查:將標(biāo)本離心后取沉淀物涂片,作革蘭氏染色找細(xì)菌或抗酸染色找抗酸桿菌,必要時細(xì)菌培養(yǎng)寄生蟲檢查:漿膜腔積液,乳糜液中檢查微絲蚴,阿米巴胸水進(jìn)行碘液染色可查到阿米巴滋養(yǎng)體報告方式
顏色:無色、微黃或紅色等透明度:透明、微混、渾濁凝塊形成:無、小凝塊、標(biāo)本全凝比重:X.XXX
蛋白定性:陽性或陰性細(xì)胞總數(shù):x~xx×106/L
白細(xì)胞數(shù):x~xx×106/L
紅細(xì)胞數(shù):x~xx×106/L
有核細(xì)胞分類:單個核細(xì)胞0.xx
多個核細(xì)胞0.xx腦脊液及漿膜腔穿刺液檢查檢查內(nèi)容與方法一般性狀檢查(肉眼)
量顏色透明度凝固性
比重(漏<1.018;滲>1.018)化學(xué)檢查顯微鏡檢查:細(xì)胞學(xué)檢查病原體檢查報告:一般性狀+化學(xué)檢查+顯微鏡檢
漿膜腔穿刺液檢查
化學(xué)檢查粘蛋白定性試驗(Rivaltatest)蛋白定量測定:漏出液:25g/L以下滲出液:30g/L以上葡萄糖測定:漏出液與血糖相近滲出液糖含量較低酶活性測定:LDH、ADA等乳酸測定漿膜腔穿刺液檢查粘蛋白定性實驗(Rivaltatest)
原理:檢查方法:
注意事項:
原理:漿膜上皮細(xì)胞在炎性反應(yīng)刺激下分泌粘蛋白增多,漿膜粘蛋白屬酸性糖蛋白,等電點為PH3-5,因此在稀酸條件下產(chǎn)生白色沉淀。粘蛋白定性實驗(Rivaltatest)
檢查方法:
將100ml蒸餾水置于量筒中,加冰醋酸2滴,混勻,再滴加待測標(biāo)本1-2滴于量筒中,在黑色背景下立即觀察,如見濃厚的白色云霧狀沉淀快速下降,而且形成較多的沉淀物,此為陽性,見于滲出液。如產(chǎn)生白色混濁不明顯,下沉緩慢,并較快消失,則為陰性,見于漏出液.粘蛋白定性實驗(Rivaltatest)注意事項
血性標(biāo)本必須離心沉淀后用上清液檢測
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