玉米粗縮病病原免疫斑點(diǎn)檢測(cè)方法_第1頁
玉米粗縮病病原免疫斑點(diǎn)檢測(cè)方法_第2頁
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1玉米粗縮病病原免疫斑點(diǎn)檢測(cè)方法臺(tái)式離心機(jī)（5000r/min具蓋塑料離心管：200μL；培養(yǎng)3.2.1試驗(yàn)用水均為蒸餾水，使用的化學(xué)試劑未作說明均為分析純和15gNa2HPO4，加水定容至5000mL，用HCl調(diào)節(jié)pH值至7.5，再加入2.5mLTween20，4℃15gNa2HPO4，加水定容至2500mL，4℃保存。3.2.51%脫脂奶粉封閉液：1g脫脂奶粉加入100mL磷酸鹽Tween20緩沖液中，4用時(shí)加入10mL磷酸鹽緩沖液中，再加入10μLH2O2。3.2.8單克隆抗體（單抗玉米粗縮病病原RBSDV單克隆抗體，效價(jià)為1:50），24.1樣品制備4.2封閉的玉米汁液點(diǎn)于膜上預(yù)先標(biāo)記好的正方格內(nèi)，作為陽性粗縮病的玉米汁液點(diǎn)于膜上預(yù)先標(biāo)記好的正方格內(nèi)，作為陰性對(duì)照，將膜置于室溫晾干。4.3孵育將膜完全浸入孵育液，37℃輕輕搖晃，孵育1h～4.4二抗孵育4.6結(jié)果判定5.1.1采集灰飛虱高齡若蟲或成蟲，蟲量不少于100頭，裝至塑料瓶中。樣品儲(chǔ)存方35.2封閉5.3孵育5.6.2帶毒率計(jì)算Lc=根100…………公式1）；Nc—帶毒灰飛虱蟲量；4人5次_

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