畜禽血常規(guī)檢驗(yàn)1-1204課件

畜禽血常規(guī)檢驗(yàn)（一）臨床獸醫(yī)學(xué)教研室內(nèi)診組2012年4月1可編輯課件PPT內(nèi)容實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求1血樣的采取與抗凝2血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢查32可編輯課件PPT目的與要求掌握動(dòng)物血樣的采取與抗凝方法。掌握血紅蛋白測(cè)定、紅細(xì)胞及白細(xì)胞計(jì)數(shù)的操作方法與注意事項(xiàng)。3可編輯課件PPT一、血樣的采取與抗凝1、血樣的采?、俨裳暗臏?zhǔn)備：采血用應(yīng)事先消毒滅菌、干燥處理。采血部位應(yīng)剪毛按常規(guī)消毒。②少量用血，一般可在耳尖、冠頂及靜脈末梢等處進(jìn)行采取。③多量用血，大動(dòng)物可在頸靜脈處進(jìn)行采取；豬可在前腔靜脈處采??；禽類(lèi)在翅內(nèi)靜脈處采取，必要時(shí)可進(jìn)行心臟穿刺采取。小動(dòng)物一般采用心臟采血。4可編輯課件PPT各種動(dòng)物的采血部位采血部位畜種采血部位畜種頸靜脈馬、牛、羊耳靜脈豬、羊、犬、貓、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物前腔靜脈豬翼下肱靜脈家禽隱靜脈犬、貓、羊蹼間靜脈鴨、鵝前肢頭靜脈犬、貓、豬冠或肉髯雞心臟兔、家禽、豚鼠斷尾豬、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物5可編輯課件PPT6可編輯課件PPT2、血樣的抗凝獸醫(yī)臨床常用的抗凝劑、使用方法及用圖，見(jiàn)下表?？鼓齽┛鼓龣C(jī)制常用濃度使用方法用途肝素阻止凝血酶元轉(zhuǎn)化為凝血酶而阻止血凝0.5～1%溶液配制后應(yīng)及時(shí)使用，每10ml血液加入0.1～0.2ml。適用于多數(shù)血液實(shí)驗(yàn)診斷檢驗(yàn)，不宜用于血涂片檢查。檸檬酸鈉（枸櫞酸鈉）與鈣離子形成非離子的可溶性化合物而阻止血凝3.8%溶液每10ml血液加入1ml。適用于紅細(xì)胞沉降率、輸血用抗凝，但不宜用于血液生化指標(biāo)測(cè)定。EDTA-Na2螯合血中鈣離子而阻止血凝10%溶液每10ml血液加入0.1～0.2ml。適用與一般血液學(xué)檢查，不宜用于鈉、鈣的測(cè)定。草酸鹽合劑（草酸銨＋草酸鉀）與鈣離子結(jié)合，形成不溶解的草酸鈣而阻止血凝1～2%的草酸鹽溶液取此液先作抗凝瓶。1ml此液可抗凝10ml血樣（制作抗凝瓶應(yīng)小于80℃）。有毒不能用于輸血的抗凝，不宜用于白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)與血小板計(jì)數(shù)。肝素7可編輯課件PPT血液學(xué)檢查項(xiàng)目與采血后可保存的時(shí)間檢查項(xiàng)目保存時(shí)間（h）檢查項(xiàng)目保存時(shí)間（h）白細(xì)胞計(jì)數(shù)2～3血紅蛋白含量48紅細(xì)胞計(jì)數(shù)24紅細(xì)胞壓積容量24血小板計(jì)數(shù)1紅細(xì)胞沉降速率2～3網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)2～3白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)1～28可編輯課件PPT二、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）：顯微鏡計(jì)數(shù)法1、原理血液經(jīng)200倍稀釋后，充入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，用顯微鏡觀察，計(jì)數(shù)一定容積內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)并換算成每升血液中的紅細(xì)胞數(shù)。

2、器材與試劑改良紐巴氏計(jì)數(shù)板、蓋玻片、沙利氏吸管、5ml吸管、試管、小玻棒、顯微鏡、計(jì)數(shù)器、0.85%氯化鈉稀釋液。9可編輯課件PPT3、方法①用5毫升吸管準(zhǔn)確吸稀釋液2毫升于試管中，用沙利氏吸管吸取血樣10微升，用脫脂棉擦去沙利氏吸管外壁多余的血液后插入試管底部，輕輕壓出血液于稀釋液中，再用上清液吸、吹數(shù)次，以洗出沙利氏管內(nèi)黏附的血細(xì)胞，充分混勻后備用。②將稀釋后的血樣用小玻棒取一滴，置于計(jì)數(shù)板與蓋玻片交界的邊緣，讓其自然浸入，使稀釋血樣擴(kuò)散入計(jì)數(shù)室內(nèi)，靜置2～3分鐘，鏡檢。③計(jì)數(shù)時(shí)用低倍鏡，依次計(jì)數(shù)中央大方格內(nèi)的四角和正中5個(gè)中方格，共80個(gè)小方格的紅細(xì)胞數(shù)。為避免重復(fù)和遺漏，計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)按一定順序進(jìn)行。注意壓在雙線上的紅細(xì)胞，遵守“數(shù)左不數(shù)右，數(shù)上不數(shù)下”計(jì)數(shù)法則。10可編輯課件PPT4、計(jì)算方法每mm3血液內(nèi)紅細(xì)胞總數(shù)=5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)×5×10×200×106=5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)×1010

單位：個(gè)/升式中×5—5個(gè)中方格換算成1個(gè)大方格

×10—1個(gè)大方格容積為0.1微升，換算成1.0微升

×200—血液的稀釋倍數(shù)

×106—由微升換算成升注意防凝、防溶、取樣正確。11可編輯課件PPT5、正常參考值健康動(dòng)物除山羊的紅細(xì)胞數(shù)較多外，其他動(dòng)物的紅細(xì)胞數(shù)約為6.0×1012～8.0×1012/L。6、臨床意義

①相對(duì)增多：脫水、急性胃腸炎、腸便秘、滲出性胸膜炎、滲出性腹膜炎、某些傳染病；

②絕對(duì)增多：紅細(xì)胞增多癥，見(jiàn)于代償性機(jī)能不全的心臟病及慢性肺部疾??；

③減少：各種貧血、出血性、溶血性、骨髓造血功能不全性貧血、營(yíng)養(yǎng)不良性貧血、繼發(fā)性貧血。12可編輯課件PPT三、白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）：顯微鏡計(jì)數(shù)法1、原理：用白細(xì)胞稀釋液破壞紅細(xì)胞后，混勻充入計(jì)數(shù)池中，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定容積中的白細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算求得每升血液中的白細(xì)胞總數(shù)。2、試劑與設(shè)備：改良紐巴氏計(jì)數(shù)板、蓋玻片、沙利氏吸管、1ml吸管、試管、小玻棒、顯微鏡、計(jì)數(shù)器、白細(xì)胞稀釋液（2%冰醋酸溶液或1%鹽酸溶液）。13可編輯課件PPT3、方法：用1毫升移液管吸取白細(xì)胞稀釋液0.4毫升于小試管中，再用沙利氏吸管吸取血樣至20微升處，用脫脂棉擦去吸管周?chē)嘤嘌海缓髮⑽懿迦胄≡嚬艿撞浚徛懦鲅汉笥蒙锨逡悍磸?fù)吹洗數(shù)次，以洗凈管內(nèi)所粘附的血液，充分混勻振蕩，備用。取樣與計(jì)數(shù)方法與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)方法相同，計(jì)數(shù)在計(jì)數(shù)室四角的四個(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)。14可編輯課件PPT4、計(jì)算方法：每升血液內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)=

四個(gè)大方格白細(xì)胞數(shù)÷4×10×20×106

單位：個(gè)/升5、注意事項(xiàng)：初學(xué)者容易把塵埃異物與白細(xì)胞混淆，可用高倍鏡觀察，白細(xì)胞有細(xì)胞核的結(jié)構(gòu)，而塵埃異物的形狀不規(guī)則，無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)。15可編輯課件PPT5、正常參考值（附后表）6、臨床意義①增多：細(xì)菌性感染、炎癥、白血病、惡性腫瘤、中毒性疾病。②減少：病毒性傳染病、犬瘟熱、貓泛白血病減少癥、各種疾病晚期;再生障礙性貧血;藥物性降低：磺胺類(lèi)、氯霉素、青霉素、鏈霉素、氨基比林、水楊酸鈉等;血液原蟲(chóng)病、血液孢子病。16可編輯課件PPT各種健康動(dòng)物血紅蛋白數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)及白細(xì)胞數(shù)參考值動(dòng)物Hb/(g·L-1)RBC/(1012·L-1)WBC/(109·L-1)水牛123.0±16.65.91±0.988.04±0.30黃牛95.5±10.07.24±1.578.43±2.08乳牛83.7±7.05.97±0.869.41±2.13綿羊92.6±5.18.42±1.208.45±1.90山羊118.0±10.315.23±1.0312.47±0.90豬112.3±13.75.51±0.3114.02±0.93犬133.6±13.56.57±0.3410.93±1.29雞84.9±30.43.04±0.28/資料見(jiàn)：安麗英編著.獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)診斷.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社.2000年:25.17可編輯課件PPT18可編輯課件PPT19可編輯課件PPT全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀檢驗(yàn)動(dòng)物種類(lèi)多有12種動(dòng)物檢測(cè)模式，如狗、貓、馬、牛、羊、猴、鼠，并有四種用戶自定義模式。適用范圍寵物醫(yī)院動(dòng)物檢疫部門(mén)畜牧獸醫(yī)院動(dòng)物園科研院校實(shí)驗(yàn)中心20可編輯課件PPT操作方便嵌入式標(biāo)本處理和測(cè)量單元全新高精度血液處理技術(shù)，抗凝全血9.6μl試劑自動(dòng)加入，能直接感應(yīng)試劑余量排堵方便20項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果及WBC、RBC、PLT直方圖同屏顯示9.6μl抗凝血只需按“計(jì)數(shù)“健即被吸取分析結(jié)果可靠界面鼠標(biāo)操作，參數(shù)支持人工調(diào)整提供配套的動(dòng)物血檢測(cè)專(zhuān)用試劑有報(bào)告打印功能21可編輯課件PPT主要技術(shù)參數(shù)工作原理：電阻抗法，氰化高鐵血紅蛋白法及無(wú)氰化物的SFT法檢測(cè)參數(shù)：白細(xì)胞三分群，23項(xiàng)參數(shù)（含WBC、RBC、PLT彩色直方圖）標(biāo)準(zhǔn)用量：9.6μl（全血模式）20μl（預(yù)稀釋模式）檢測(cè)速度：≥40樣本/小時(shí)，可24小時(shí)開(kāi)機(jī)有自動(dòng)休眠及喚醒功能結(jié)果存儲(chǔ)：主機(jī)自動(dòng)存儲(chǔ)12000份樣本的全部參數(shù)包括直方圖、歷史數(shù)據(jù)的管理查詢更便捷操作語(yǔ)言：全中文動(dòng)物種類(lèi)：狗、貓、馬、牛、羊、猴、鼠等八種和四種用戶自定義模式質(zhì)控方式：X-B、L-J、、SD、CV標(biāo)準(zhǔn)方式：自動(dòng)校準(zhǔn)和人工校準(zhǔn)顯示屏：大屏幕彩色液晶顯示，640480分辨率信息：支持多種快速中文輸入接口：一個(gè)并行打印機(jī)接口，兩個(gè)USB接口，兩個(gè)PS/2接口，兩個(gè)RS232接口（支持聯(lián)網(wǎng)）電源：AC220V50HZ22可編輯課件PPT血常規(guī)化驗(yàn)單“血常規(guī)”檢查主要有四項(xiàng)指標(biāo)：白細(xì)胞數(shù)（WBC計(jì)數(shù)）、紅細(xì)胞數(shù)（RBC計(jì)數(shù)）、血紅蛋白（HB）和血小板數(shù)（PLT計(jì)數(shù)）。

白細(xì)胞數(shù)（WBC），它的多少反映身體抵御、殺滅致病微生物能力的強(qiáng)弱。如果減少通常是由于病毒感染、再生障礙性貧血、傷寒或瘧疾、營(yíng)養(yǎng)不良、極度衰竭，以及脾功能亢進(jìn)和自身免疫性疾病等。增多主要是急性化膿感染、炎癥存在、嚴(yán)重的組織損傷及大量的血細(xì)胞破壞、急性大出血和溶血、白血病及某些腫瘤等。

RBC、HB分別是紅細(xì)胞和血紅蛋白，是反映貧血的兩個(gè)指標(biāo)。當(dāng)發(fā)生貧血、白血病、失血等時(shí)，會(huì)減少；當(dāng)發(fā)生嘔吐、腹瀉、缺氧和心肺疾病時(shí)增多。

紅細(xì)胞（RBC）計(jì)數(shù)，增多的病理性原因有嚴(yán)重的肺氣腫、肺原性心臟病、真性紅細(xì)胞增多癥、慢性一氧化碳（CO）中毒等。減少的病理性原因有缺鐵性貧血、溶血性貧血、營(yíng)養(yǎng)不良性貧血、再生障礙性貧血、失血性貧血等。

血紅蛋白（HB），其病理性原因與“紅細(xì)胞數(shù)”相同，但在各種貧血時(shí)，由于紅細(xì)胞與血紅蛋白含量不同，二者的減少程度可以不一致。因此，同時(shí)測(cè)定紅細(xì)胞和血紅蛋白，對(duì)貧血類(lèi)型的鑒別有重要意義。

血小板數(shù)（PLT），它在止血、凝血過(guò)程中起著十分重要的作用。正常畜禽每天血小板數(shù)有一定的波動(dòng)，午后較早晨高，高原地區(qū)較平原地區(qū)高，妊娠中晚期升高，分娩后1－2天降低；劇烈活動(dòng)和飼喂后升高，休息后又恢復(fù)到原來(lái)水平。如果低于正常值，就要引起重視，因減少常見(jiàn)于急性白血病、難治性貧血、脾功能亢進(jìn)、彌漫性血管內(nèi)凝血等；如果大于正常值，也不能馬虎，因在慢性粒細(xì)胞白血病、溶血性貧血及急性化膿性感染時(shí)，是增多的。23可編輯課件PPT當(dāng)血常規(guī)化驗(yàn)檢查的這些指標(biāo)偏離（指標(biāo)或高、或低）正常值范圍時(shí)，說(shuō)明受檢者的身體存在某一方面的病變。如果HGB值低于正常值，就說(shuō)明有貧血存在，應(yīng)該進(jìn)一步檢查是什么性質(zhì)的貧血。如果HGB值高于正常值，可能是因?yàn)榛加醒t蛋白增高癥或者血液被濃縮的緣故。白細(xì)胞代表的機(jī)體的防御系統(tǒng)功能，其總數(shù)增高時(shí)，多表明有炎癥、感染存在。此時(shí)患病動(dòng)物多有發(fā)熱癥狀，如果WBC值過(guò)高，并伴有嚴(yán)重的貧血，需進(jìn)一步做骨髓穿刺檢查，排除白血病的可能。WBC值低于正常值，可由接受放射線、病毒感染藥物及化學(xué)物質(zhì)中毒等引起。PLT減少時(shí)，可能會(huì)有出血，如血小板減少性紫癜等；增高時(shí)，說(shuō)明血液呈高凝狀態(tài)，易發(fā)生血栓。其他檢查項(xiàng)目發(fā)生異常時(shí)，同樣提示機(jī)體出現(xiàn)了某一病變。24可編輯課件PPT血細(xì)胞直方圖一、WBC直方圖：是反映WBC體積大小的頻率分布圖。正常人WBC直方圖可見(jiàn)兩個(gè)明顯分離的峰，左峰為小細(xì)胞群（以淋巴細(xì)胞為主），右峰為大細(xì)胞群（以中性粒細(xì)胞為主），兩峰之間為中間細(xì)胞群（包括嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞）。小細(xì)胞群峰又高又陡，大細(xì)胞群較高較寬，中間細(xì)胞群一般為有一定寬度的平坦區(qū)。小細(xì)胞群峰越高，淋巴細(xì)胞比率越大；大細(xì)胞群峰越高，中性粒細(xì)胞比率越大；而嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞增多或出現(xiàn)病理性細(xì)胞時(shí)，中間細(xì)胞群峰值增高。例如白血病時(shí)外周血中出現(xiàn)大量幼稚細(xì)胞，多分布于中間細(xì)胞群及其附近，使峰尖增高，不同白血病類(lèi)型出現(xiàn)特異性直方圖。二、RBC直方圖：是反映RBC體積大小或任何相當(dāng)于RBC體積大小范圍內(nèi)粒子的分布圖。正常RBC直方圖為偏態(tài)分布曲線圖，峰值表示一定數(shù)量的RBC體積的平均值，與RBC平均體積基本一致，正常人峰值一般在82-94fl之間。直方圖峰值變低，基底部增寬，說(shuō)明RBC體積大小不一，與紅細(xì)胞分布增大一致。直方圖左移，提示RBC體積較小，如缺鐵性貧血病人的RBC直方圖明顯左移，基底部顯著增寬。直方圖右移，提示RBC體積較大，見(jiàn)于巨幼紅細(xì)胞性貧血和新生兒。RBC直方圖有時(shí)出現(xiàn)雙峰，是貧血治療有效的證據(jù)，多見(jiàn)于缺鐵性貧血、巨幼紅細(xì)胞性貧血病人治療后。三、PLT直方圖:是反映PLT體積大小分布頻率的分布圖，正常PLT直方圖呈左偏態(tài)分布，峰值一般在6-10fl之間，直方圖左移，提示PLT體積偏小，直方圖右移，提示PLT體積偏大。直方圖尾部抬高或在20-30fl處出現(xiàn)另一個(gè)波峰，提示血液中可能存在較多的小紅細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片、巨大血小板、血小板凝集及纖維蛋白等。缺鐵性貧血病人的PLT直方圖尾部明顯抬高、PLT減少及其治療過(guò)程中的直方圖多呈波浪狀。25可編輯課件PPTDiagramThemeGallery

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