微生物標(biāo)本采集要求課件

臨床微生物標(biāo)本采集要求

“超級(jí)病菌”變種襲擊英國(guó)醫(yī)院

2006年12月18據(jù)英國(guó)媒體報(bào)道，俗稱(chēng)“超級(jí)病菌”MRSA的一個(gè)變種今年襲擊了英國(guó)一家醫(yī)院，已造成8人感染，其中2人死亡2004年受感染死亡的英國(guó)士兵坎貝，18歲，感染后48h死亡CA-MRSA

阿什頓·邦茲，07年10月4日感到身體一側(cè)疼痛，就到當(dāng)?shù)匾患裔t(yī)院就診。10月17日死亡。美國(guó)弗吉尼亞州貝德福德一名17歲高中生就因感染MRSA而死亡，21所學(xué)校停課。ZellerJL,etal.JAMApatientpage.MRSAinfectionsJAMA.2007Oct17;298(15):1826.世界人口死因（1998年）

感染性疾?。?5％(1330萬(wàn)/5390萬(wàn)）

抗生素時(shí)代，感染仍是人類(lèi)健康的主要“殺手”“君子慎始，差之毫厘，謬以千里”

——《禮記》

微生物檢驗(yàn)結(jié)果是臨床醫(yī)師在診療感染癥過(guò)程中所需要的重要信息，臨床醫(yī)師可以根據(jù)這些檢驗(yàn)結(jié)果及病人的臨床情況來(lái)區(qū)分疾病的不同階段，觀察疾病的變化，判斷預(yù)后或觀察療效。所以分析前階段樣本的質(zhì)量保證是直接關(guān)系到檢驗(yàn)結(jié)果能否真實(shí)客觀地反應(yīng)患者當(dāng)前病情的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。

正確的采取、處理與運(yùn)送本是臨床微生物檢驗(yàn)成功與直接關(guān)系檢驗(yàn)結(jié)果的基本關(guān)鍵。

如果標(biāo)本采集不當(dāng)，即使有經(jīng)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室工作者及最好的儀器設(shè)備也難以彌補(bǔ)在采集標(biāo)本時(shí)引入的誤差和錯(cuò)誤。標(biāo)本采取與處理的規(guī)范化是準(zhǔn)確、及時(shí)地向臨床提供重要的臨床感染信息的基礎(chǔ)；而標(biāo)本采取與處理不符合要求，則微生物培養(yǎng)的結(jié)果毫無(wú)意義。故病人準(zhǔn)備和標(biāo)本采集是檢驗(yàn)質(zhì)量保證的重要環(huán)節(jié)之一。正確的采取、處理與運(yùn)送本是臨床微生物檢驗(yàn)成功與直接關(guān)系檢驗(yàn)結(jié)果的基本關(guān)鍵。

由于病人受到各種內(nèi)在和外界的影響，可使檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生或大或小的誤差，為此檢驗(yàn)前病人須作適當(dāng)準(zhǔn)備，可減少隨機(jī)分析誤差。如標(biāo)本采取或處理失當(dāng)，造成污染，甚至使檢驗(yàn)結(jié)果給臨床以誤導(dǎo)，延誤對(duì)患者的正確治療造成嚴(yán)重后果。標(biāo)本保存和運(yùn)送是檢驗(yàn)質(zhì)量保證的重要環(huán)節(jié)之一。由于采集的標(biāo)本受各種因素的影響，可能使檢驗(yàn)結(jié)果受或大或小的誤差，因此必須正確掌握標(biāo)本保存和運(yùn)送?！罢_的微生物學(xué)檢驗(yàn)始自正確的標(biāo)本采取。臨床醫(yī)師、護(hù)師及檢驗(yàn)技師都必須通曉其要領(lǐng)?！?/p>

著名的臨床微生物檢驗(yàn)專(zhuān)著ManualofClinicalMicrobiology的主編PatrickMurray

標(biāo)本采集和運(yùn)送是

細(xì)菌培養(yǎng)成功的最最重要的關(guān)鍵

但由于標(biāo)本的采集和運(yùn)送常有護(hù)士或醫(yī)生或病人自己完成，所以也是最不容易做好的事情，而且不知道問(wèn)題所在之處，造成的后果是:臨床醫(yī)生最不能接受的問(wèn)題:陽(yáng)性率低

我們應(yīng)該追求：

“準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷”

“針對(duì)性病原學(xué)治療”

正確的微生物標(biāo)本采集和運(yùn)送，是準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷的前提！

微生物讓人類(lèi)步步為營(yíng)，微生物樣本采樣基本原則1.及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查2.在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本3.采樣時(shí)嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作4.采樣后立即送檢，甚至床旁接種尤其是厭氧培養(yǎng)5.棉拭子標(biāo)本宜用運(yùn)送培養(yǎng)基6.混有正常菌群污染標(biāo)本，不可置肉湯培養(yǎng)7.標(biāo)本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑。8.送檢標(biāo)本應(yīng)注明來(lái)源和檢驗(yàn)?zāi)康奈覀兛赡苊刻於济媾R以下問(wèn)題的挑戰(zhàn)同時(shí)做需氧血培養(yǎng)和厭氧血培養(yǎng)時(shí)血液先注入需氧瓶或厭氧瓶？膿標(biāo)本有時(shí)涂片見(jiàn)到細(xì)菌為什么培養(yǎng)陰性？非上班時(shí)間需要做厭氧培養(yǎng)怎么辦？明顯細(xì)菌性腦膜炎為什么培養(yǎng)陰性？痰標(biāo)本分離出4種細(xì)菌做哪一種細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)？數(shù)量很多的凝固酶陰性葡萄球菌在痰里分離出來(lái)是否要做藥敏?臨床標(biāo)本的分類(lèi)帶菌體液 無(wú)菌體液痰血液咽拭子腦脊液尿液 關(guān)節(jié)腔積液糞便 胸腹水其他類(lèi)別 其他類(lèi)別

一、血培養(yǎng)操作規(guī)范

臨床常見(jiàn)的采血指征

發(fā)熱（

38

C）或低溫（

36

C）寒戰(zhàn)白細(xì)胞增多（計(jì)數(shù)大于10，000

109/L，特別有“核左移”未成熟的或桿狀核的白細(xì)胞）粒細(xì)胞減少（成熟的多核白細(xì)胞<1000

109/L）血小板減少皮膚粘膜出血昏迷，休克多器官衰竭CRP/PCT升高皮膚消毒程序，嚴(yán)格執(zhí)行三步法:1、用75%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30s以上2、用1%-2%碘酊作用30s或10%碘伏作用60s，從穿刺點(diǎn)向外畫(huà)圈消毒,至消毒區(qū)域直徑達(dá)3cm以上，涂擦穿刺皮膚2遍，待干燥。3、75%酒精脫碘：用75%酒精由內(nèi)向外方向涂抹去碘酒液，待酒精揮發(fā)干燥后采血。培養(yǎng)瓶消毒程序

打開(kāi)血培養(yǎng)瓶塑料蓋用75%酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞并擦干表面殘余酒精→消毒皮膚后用無(wú)菌注射器抽取血液從橡皮塞處注入血培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)→用75%酒精重新消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞并蓋好塑料蓋→立即送檢。血培養(yǎng)標(biāo)本的運(yùn)送采集后的血培養(yǎng)瓶應(yīng)在1小時(shí)之內(nèi)送往實(shí)驗(yàn)室。血培養(yǎng)瓶在采血接種后在室溫不超過(guò)4小時(shí)。血培養(yǎng)瓶在接種前和接種后均不得冷藏或冷凍。菌血癥病人血中細(xì)菌濃度成年病人:

鏈球菌心內(nèi)膜炎1to30organisms/ml

葡萄球菌心內(nèi)膜炎1to20organisms/ml

革蘭氏陰性菌血癥少于1to10organisms/ml

革蘭氏陽(yáng)性菌血癥1to300organisms/ml幼兒病人:

革蘭氏陰性菌血癥5to1000organisms/ml75%幼兒菌血癥病人血液有＞100organisms/mlInfectDisClinicsNAmer2001;15:1009

所以采血量一定要足夠！

采血量

成人為8～10ml,兒童1～5ml

有人引述多篇文章指出:對(duì)成人每增加1ml血量平均能提高陽(yáng)性率3.2%。

采血份數(shù)和采血時(shí)機(jī)采血培養(yǎng)應(yīng)該在使用抗生素之前進(jìn)行間歇性寒戰(zhàn)或發(fā)熱應(yīng)在寒戰(zhàn)或體溫高峰到來(lái)之前0.5小時(shí)采集血液，不知發(fā)熱規(guī)律應(yīng)在寒戰(zhàn)或發(fā)熱后半小時(shí)后進(jìn)行。

24小時(shí)內(nèi)采集2-3份血培養(yǎng)持續(xù)性菌血癥：如急性心內(nèi)膜炎、導(dǎo)管相關(guān)sepsis時(shí)需多次取血監(jiān)測(cè)，捕捉指導(dǎo)治療：特別是金葡菌時(shí)建議

第一天1-3套血，每套16-20ml第二天,如無(wú)跡象有細(xì)菌生長(zhǎng)1-2套，每套16-20ml血培養(yǎng)采血量、份數(shù)與陽(yáng)性率研究表明，當(dāng)每套血培養(yǎng)采血20ml時(shí)一套檢出率：65%二套檢出率：80%三套檢出率：96%目前的指南推薦采集2~3套血培養(yǎng)

特殊的全身性和局部感染患者采血培養(yǎng)的建議(1)可疑急性原發(fā)性菌血癥、真菌菌血癥、腦膜炎、骨髓炎、關(guān)節(jié)炎或肺炎,應(yīng)在不同部位采集2～

3份血標(biāo)本。(2)不明原因發(fā)熱,如隱性膿腫,傷寒熱和波浪熱,先采集2～

3份血標(biāo)本,24～

36h后估計(jì)體溫升高之前(通常在下午)再采集2份以上。特殊的全身性和局部感染患者

采血培養(yǎng)的建議(3)可疑菌血癥或真菌菌血癥,但血培養(yǎng)持續(xù)陰性,應(yīng)改變血培養(yǎng)方法,以獲得罕見(jiàn)的或苛養(yǎng)的微生物。(4)可疑細(xì)菌性心內(nèi)膜炎,在1～

2h內(nèi)采集3份血標(biāo)本,如果24h后陰性,再采集3份以上的血標(biāo)本。采集部位推薦從外周靜脈采集血液標(biāo)本。不推薦動(dòng)脈血，因其診斷價(jià)值沒(méi)有比靜脈血更大。不推薦靜脈留置導(dǎo)管，因其常伴有高污染率。如果必須從留置導(dǎo)管內(nèi)采血，也應(yīng)同時(shí)從外周靜脈采集另外一個(gè)血培養(yǎng)標(biāo)本以幫助陽(yáng)性結(jié)果的判讀提供解釋。血液細(xì)菌培養(yǎng)合格的操作

1從靜脈取血2不宜從靜脈導(dǎo)管或靜脈留置口取血3若從導(dǎo)管設(shè)施取血，須同時(shí)靜脈取血，以求對(duì)比和解釋?zhuān)灰獥壢コ醵窝?，不要用抗凝劑沖洗4不推薦靜脈血直接入瓶，不要和測(cè)血?dú)饧把恋娜⊙瑫r(shí)進(jìn)行（或在先）5不主張換針頭入瓶6有血的培養(yǎng)瓶不可放入冰箱和凍箱保存7建議至少一次做兩瓶培養(yǎng)，一瓶需氧一瓶厭氧瓶數(shù)及血量結(jié)論1：絕對(duì)不能只用一瓶寒戰(zhàn)－升溫之間應(yīng)采血20毫升分裝兩個(gè)瓶?jī)?nèi)先分配在需氧瓶10ml，然后剩余的入?yún)捬跗績(jī)?nèi)，因?yàn)檎婢?、綠膿桿菌、窄食單胞菌只長(zhǎng)在需氧瓶?jī)?nèi)。結(jié)論2：2-5天內(nèi)不必重復(fù)取血結(jié)論3：只有可疑為持續(xù)性菌血癥：如心內(nèi)膜炎、導(dǎo)管相關(guān)sepsis時(shí)，才要有間隔地(1h至24h)幾次取血監(jiān)測(cè)、捕捉、指導(dǎo)治療；特別是金葡菌時(shí)。抽血量和體重的關(guān)系

體重Kg抽血量ml套（需氧+厭氧）<11-211.1-2422.1-12.76212.8-36.3202>=36.340-602-3真菌血培養(yǎng)真菌血培養(yǎng)采用需氧血培養(yǎng)瓶采集標(biāo)本。采用中和/滅活抗菌藥物的血培養(yǎng)瓶可提高真菌的檢出率。自動(dòng)化血培養(yǎng)系統(tǒng)不能用于雙相真菌的檢測(cè)。分枝桿菌血培養(yǎng)必須采用特殊的商品化分枝桿菌血培養(yǎng)瓶。所有培養(yǎng)基都必須孵育至少4周。感染性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎急性：在經(jīng)驗(yàn)性抗生素用藥前30min之內(nèi)采集血培養(yǎng)。亞急性：在30分鐘至1小時(shí)之內(nèi)連續(xù)抽取數(shù)套血培養(yǎng)。最初采集3套血培養(yǎng)。假如這些血培養(yǎng)在24小時(shí)之內(nèi)結(jié)果是陰性的，再采集2套血培養(yǎng)，總共5套。血液及骨髓標(biāo)本采集運(yùn)送的規(guī)范

1.采血時(shí)間：盡可能在用抗生素前，心內(nèi)膜炎例外。2.采血量：采一次或采一瓶是錯(cuò)誤的，至少應(yīng)采一套2瓶，分需氧和厭氧。2瓶血量不少于16-20ml，先將10ml注入需氧瓶，再將剩余血采血注入?yún)捬跗俊?.采血方法：不要與血?dú)夂脱翗?biāo)本一起采血；不推薦血入瓶前換針頭；不推薦靜脈血直接入瓶；不宜在靜脈導(dǎo)管或靜脈留置口采血。血液及骨髓標(biāo)本采集運(yùn)送的規(guī)范

4.采血間隔：如第一次采集2套（4瓶）血培養(yǎng)標(biāo)本，在以后的2-5天不必采血，但除外心內(nèi)膜炎和導(dǎo)管相關(guān)性敗血癥。5.兒童：采血量是總血量的1%。6.延遲培養(yǎng)瓶處理:延遲培養(yǎng)瓶不要放冰箱或孵箱，放常溫，盡早送往臨床細(xì)菌室。7.皮膚消毒液推薦：建議先用70-80%異丙醇去脂，再用葡萄糖酸氯乙定消毒。血培養(yǎng)假陽(yáng)性的危害1、增加患者抗生素用量，破壞其微生態(tài)環(huán)境2、延長(zhǎng)了住院天數(shù)3、延誤病情診斷4、增加經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)防止皮膚寄生菌或環(huán)境微生物污染二、泌尿標(biāo)本采集的規(guī)范尿液培養(yǎng)標(biāo)本送檢指征您知道嗎？

正常人尿液是無(wú)菌的，而尿液細(xì)菌培養(yǎng)最大的問(wèn)題是雜菌污染。正常人外尿道有大腸桿菌、葡萄球菌等存在。而這些細(xì)菌又是尿路感染中常見(jiàn)的病源菌。因此要作好尿液細(xì)菌學(xué)檢查，首先應(yīng)注意標(biāo)本收集問(wèn)題。您知道嗎？尿液經(jīng)尿道排出時(shí)會(huì)受到尿道內(nèi)正常菌群的污染,但定量培養(yǎng)時(shí)計(jì)數(shù)不會(huì)超過(guò)103CFU/ml,泌尿系感染時(shí)定量培養(yǎng)在104

～

105CFU/ml。另外,由于絕大多數(shù)的泌尿系感染是由腸桿菌科細(xì)菌引起,而此類(lèi)細(xì)菌的硝酸鹽還原實(shí)驗(yàn)為陽(yáng)性,故可參考尿十項(xiàng)檢查中的硝酸鹽還原實(shí)驗(yàn)來(lái)推斷是否有細(xì)菌感染。尿培養(yǎng)樣本采集方法

標(biāo)本采集應(yīng)力爭(zhēng)在未使用抗生素之前．注意避免消毒劑污染標(biāo)本1清潔中段尿中段尿（晨尿最佳）約10～

20ml直接排入專(zhuān)用的無(wú)菌容器中，立即送檢，2h內(nèi)接種。2恥骨上膀胱穿刺：評(píng)估膀胱內(nèi)細(xì)菌感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”方法。3直接導(dǎo)尿：可減污染，準(zhǔn)確反映膀胱感染情況。4小兒收集包：對(duì)于無(wú)控制能力的小兒可應(yīng)用收集包收集尿液，這種裝置由于很難避免會(huì)陰部菌群污染產(chǎn)生假陽(yáng)性，所以只有在檢驗(yàn)結(jié)果為陰性時(shí)才有意義。尿培養(yǎng)樣本采集方法5留置導(dǎo)尿管收集尿液：穿刺導(dǎo)尿管吸取尿液，不能從收集袋中采集尿液。長(zhǎng)期留置導(dǎo)尿患者，應(yīng)在更換新尿管時(shí)留取尿標(biāo)本。6集尿法：尿查抗酸桿菌時(shí)，留24小時(shí)尿液盛于潔凈容器內(nèi)，取其沉渣10mL送檢。泌尿標(biāo)本采集的規(guī)范1、采集后的標(biāo)本應(yīng)立即送檢。標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢，否則可暫存于4℃冰箱。2、采集時(shí)間：多數(shù)藥物從尿道排泄，所以不管用哪種方法都應(yīng)在用藥前采集。應(yīng)采集早晨第一次的尿。3、標(biāo)本管不應(yīng)含防腐劑和消毒劑。泌尿標(biāo)本采集的規(guī)范4、采集中段尿時(shí)要先用肥皂清洗女性的外陰和男性的外生殖器包括包皮內(nèi)，然后用清水沖洗。5、長(zhǎng)期留置導(dǎo)尿管的患者應(yīng)在更換新管時(shí)留取尿標(biāo)本。6、做厭氧培養(yǎng)時(shí)應(yīng)膀胱穿刺采集尿。特別注意尿液通常是無(wú)菌的或一過(guò)性有少量微生物，但是尿道內(nèi)或尿道周?chē)つw的菌群會(huì)污染尿液標(biāo)本，從而可能導(dǎo)致錯(cuò)誤的培養(yǎng)結(jié)果。診斷癥狀明顯的病人（如尿急、尿頻、尿痛），一份標(biāo)本就已足夠，治療48～

72小時(shí)后再采集第二份標(biāo)本。對(duì)于癥狀不明顯的病人，需采集2～

3份標(biāo)本。懷疑腎結(jié)核時(shí)，應(yīng)連續(xù)3天采集晨尿。

特別注意多次收集或24小時(shí)尿不能用作培養(yǎng)。申請(qǐng)單上必須注明病人癥狀是否明顯，這對(duì)于定量培養(yǎng)分析非常重要，尤其只有少量尿液標(biāo)本。室溫都有利于病原菌和污染菌會(huì)生長(zhǎng)繁殖，因此若30min內(nèi)不能及時(shí)培養(yǎng)尿液則必須冷藏，但也不能超過(guò)24小時(shí)。特別注意

多數(shù)藥物從尿道排泄,所以標(biāo)本采集應(yīng)力爭(zhēng)在未使用抗生素之前或停用抗菌藥5d之后留取尿液標(biāo)本;尿液在膀胱內(nèi)應(yīng)停留6～

8h以上，使細(xì)菌有足夠的時(shí)間繁殖,故應(yīng)盡量采集早晨第一次的尿,同時(shí)注意避免消毒劑污染標(biāo)本。三、下呼吸道分泌物（痰培養(yǎng)）

標(biāo)本采取規(guī)范下呼吸道標(biāo)本標(biāo)本送檢指征1咳嗽、咳痰：痰液可為膿性、血性、鐵銹色或紅棕色膠胨樣痰。2咯血：肺結(jié)核病人常痰中帶血。3呼吸困難4發(fā)熱5胸痛：當(dāng)炎癥病變累及壁層胸膜時(shí)，會(huì)發(fā)生胸痛。肺部感染的患者有25～

50％可能發(fā)生菌血癥，應(yīng)同時(shí)作血培養(yǎng)。病原體種類(lèi)繁多而復(fù)雜使下呼吸道感染病原診斷成為難題細(xì)菌（包括放線菌與奴卡菌，厭氧菌與分枝桿菌）真菌（包括肺孢子菌）病毒支原體、衣原體與立克次體原蟲(chóng)寄生蟲(chóng)咳痰途經(jīng)口咽部唾液中口咽部定植菌的濃度可達(dá)108～

109/ml。研究顯示，國(guó)內(nèi)常規(guī)痰標(biāo)本中約半數(shù)存在唾液嚴(yán)重污染現(xiàn)象。不可避免地受到污染我國(guó)痰細(xì)菌培養(yǎng)現(xiàn)狀標(biāo)本送檢率低苛養(yǎng)菌檢出率極低結(jié)果重復(fù)性差報(bào)告速度慢感染菌與污染菌不易區(qū)分藥敏結(jié)果與治療反應(yīng)存在差距咳痰標(biāo)本的采集標(biāo)本采集方法醫(yī)師或護(hù)士直視下采集標(biāo)本病人先漱口，去除表面的菌群教育病人深咳，收集從下呼吸道咳出的痰液臨床上約半數(shù)咳痰標(biāo)本不合格！關(guān)于咳痰標(biāo)本在抗生素應(yīng)用前采集痰標(biāo)本;標(biāo)本采集后1～

2h內(nèi)必須立即進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室處理；咳痰標(biāo)本應(yīng)用最早且廣泛，但也是最受爭(zhēng)議的標(biāo)本;取標(biāo)本前應(yīng)摘去牙托，清潔口腔如刷牙和漱口;深咳，采集標(biāo)本過(guò)程中要有專(zhuān)業(yè)的醫(yī)務(wù)人員指導(dǎo);無(wú)痰可用3％～

5％NaCl5ml霧吸約5min導(dǎo)痰；也可用物理療法、體位引流、鼻導(dǎo)管抽吸等法取痰；咳痰標(biāo)本不合格，退檢嗎？如果低倍視野下鱗狀上皮細(xì)胞大于25個(gè)，白細(xì)胞小于10個(gè)，應(yīng)不做或僅在特殊要求時(shí)做培養(yǎng)。如做培養(yǎng)，報(bào)告中注明“鏡檢結(jié)果表明標(biāo)本口咽分泌物污染明顯”。下呼吸道標(biāo)本采集方法1自然咳痰法：晨痰、漱口，深咳呼吸道深部痰（非后鼻部分泌物、非唾液）留于無(wú)菌容器內(nèi)。對(duì)于痰量少或無(wú)痰的患者可采用霧化吸入45℃10％NaCL水溶液，使痰液易于排出。對(duì)咳痰少的幼兒，可輕輕壓迫胸骨上部的氣管，使其咳嗽。2支氣管鏡采集法：經(jīng)支氣管鏡直接吸引支氣管肺泡灌洗防污染樣本毛刷下呼吸道標(biāo)本采集方法3胃內(nèi)采痰法：無(wú)自覺(jué)癥狀的肺結(jié)核病人尤其嬰幼兒不會(huì)咳嗽，有時(shí)將痰誤咽入胃中，可采集胃內(nèi)容物做結(jié)核分支桿菌培養(yǎng)。4氣管穿刺法：主要用于厭氧菌培養(yǎng)5小兒取痰法：用彎壓舌板向后壓舌，將拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上送檢。幼兒還可用手指輕叩胸骨柄上方，以誘發(fā)咳痰。標(biāo)本的質(zhì)量檢查

于顯微鏡低倍鏡下檢查（10x10），觀察WBC及扁平上皮細(xì)胞存在情況，作為參考：痰標(biāo)本顯微鏡檢查的分類(lèi)

分類(lèi)細(xì)胞數(shù)/低倍鏡視野

(級(jí))白細(xì)胞扁平上皮細(xì)胞

6<25<255>25<104>2510-253>25>25210-25>251<10>25

分類(lèi)中1～

3類(lèi)不做培養(yǎng)，要求重新留取標(biāo)本：4、5類(lèi)為合格標(biāo)本：6類(lèi)為氣管穿刺液，如未見(jiàn)到白細(xì)胞，而扁平上皮細(xì)胞>10/低倍鏡視野，亦應(yīng)重新留取標(biāo)本。痰培養(yǎng)的送檢次數(shù)對(duì)于普通細(xì)菌性肺炎，痰標(biāo)本送檢每天1次，連續(xù)2～

3天。不建議24h內(nèi)多次采集，除非痰液外觀性狀出現(xiàn)改變；懷疑分枝桿菌感染者，應(yīng)連續(xù)收集3天清晨痰液送檢；懷疑軍團(tuán)菌或深部真菌感染，痰標(biāo)本理想的送檢次數(shù)尚無(wú)定論。痰培養(yǎng)的運(yùn)送和保存所有病人的下呼吸道標(biāo)本應(yīng)在采集后立即送至微生物室，并于1小時(shí)內(nèi)接種如不能及時(shí)送達(dá)，應(yīng)將標(biāo)本暫存于4℃，但放置時(shí)間不可超過(guò)24h。運(yùn)輸時(shí)勿置于冰塊中厭氧培養(yǎng)標(biāo)本的最佳運(yùn)送時(shí)間取決于標(biāo)本量。被口咽部菌群污染的標(biāo)本如咳痰等不可用于厭氧菌培養(yǎng)。室溫下放置>1h會(huì)降低肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌的分離率而定植于上呼吸道的非致病菌則會(huì)過(guò)度生長(zhǎng)痰培養(yǎng)拒收標(biāo)準(zhǔn)光學(xué)顯微鏡細(xì)胞學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)口咽分泌物污染明顯。沒(méi)有標(biāo)簽或貼錯(cuò)標(biāo)簽。運(yùn)送容器選擇不當(dāng)或有滲漏。標(biāo)本采集不符合要求。同一天同一試驗(yàn)重復(fù)送檢2次。延時(shí)送至實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)本。四、大便培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范大便培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范1.采集時(shí)間：腹瀉患者應(yīng)在用藥前、急性期采集；沙門(mén)菌感染、腸熱癥應(yīng)在2周內(nèi)采；厭氧菌出現(xiàn)癥狀即采集。2.采集方法：自然排便者可用小木棒挑取有膿血和黏液的部位的糞便2-3克，如液狀糞便取絮狀物盛于無(wú)菌的、密封的、不吸水的、容器內(nèi)或直接盛于增菌液或保存液中；對(duì)不易獲得糞便患者及幼兒，可用直腸拭子采集后置保存液或輸送培養(yǎng)基中送檢。大便培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范3.

注意事項(xiàng)：⑴雖然糞便標(biāo)本本身含很多細(xì)菌但也要用無(wú)菌容器。⑵在患者病情許可的條件下應(yīng)在用藥前采集標(biāo)本。⑶應(yīng)床邊接種或置輸送培養(yǎng)基送檢。⑷厭氧細(xì)菌（難辯梭菌）培養(yǎng)的標(biāo)本應(yīng)盡量減少與空氣接觸。您知道嗎？住院超過(guò)3d或入院診斷不是胃腸炎的患者不做常規(guī)糞便培養(yǎng)。除嬰兒和有活動(dòng)性腹瀉癥狀的患者外不推薦用拭子做常規(guī)病原檢測(cè)。有腹部痙攣的患者在發(fā)病6h內(nèi)采集到的血便或液狀便的效果最好。對(duì)于弧菌的培養(yǎng)需要提出特別申請(qǐng)。五、腦脊液標(biāo)本采集腦脊液培養(yǎng)標(biāo)本的采集

采集時(shí)間：懷疑腦膜炎時(shí)應(yīng)立即采集腦脊液，最是在應(yīng)用抗生素之前采集腦脊液。采集方法：無(wú)菌腰穿采集腦脊液3～5ml，分裝到3個(gè)無(wú)菌小瓶中（各1～

2ml）。第一管用于細(xì)菌培養(yǎng)!

用于細(xì)菌和病毒檢測(cè)時(shí)腦脊液量不少于1ml；用于真菌和抗酸桿菌檢測(cè)腦脊液量不少于2ml。腦脊液培養(yǎng)標(biāo)本的采集

標(biāo)本采集后注入無(wú)菌管/小瓶中送檢也可將抽取液直接注入血培養(yǎng)瓶,用血培養(yǎng)儀培養(yǎng)。腦膜炎奈瑟菌離體后會(huì)迅速自溶,肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌也很容易死亡,因此,標(biāo)本應(yīng)立即送檢,并注意保溫、防干燥。切不可置冰箱保存,否則會(huì)影響檢出率。腦脊液標(biāo)本的運(yùn)送常溫立即送檢，實(shí)驗(yàn)室收到標(biāo)本后應(yīng)立即接種。腦脊液標(biāo)本送檢的理想時(shí)間為15分鐘內(nèi)，半小時(shí)送檢是可接受的，如果送檢時(shí)間超過(guò)1小時(shí)，則會(huì)影響結(jié)果，在結(jié)果報(bào)告時(shí)，在備注處注明此情況。如不能及時(shí)送檢，可使用血培養(yǎng)瓶（懷疑腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌感染時(shí)，請(qǐng)勿使用血培養(yǎng)瓶）六、穿刺液標(biāo)本的采集穿刺液類(lèi)標(biāo)本的采集

穿刺液培養(yǎng)標(biāo)本包括胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜液等穿刺液培養(yǎng)標(biāo)本。采集時(shí)間：一般在用抗生素等抗菌藥物治療之前，或在停止使用抗菌藥物之后2～

3d采集標(biāo)本。穿刺液類(lèi)標(biāo)本的采集

七、胃液及膽汁培養(yǎng)標(biāo)本胃液及膽汁培養(yǎng)標(biāo)本八、分泌物采集規(guī)范分泌物樣本棉花纖維+竹/木條抑菌區(qū)是因?yàn)椋褐参锓置诔鰜?lái)的：脂肪酸；樹(shù)脂；福爾馬林氯氣，重金屬與膠水的影響

分泌物采集規(guī)范分泌物采集規(guī)范2、閉鎖性膿腫：如淋巴膿腫、肺膿腫、肝膿腫、腹腔膿腫、盆腔膿腫等，對(duì)封閉的膿腫常采用穿刺或引流的的方法采樣，應(yīng)在用藥前采集，應(yīng)注意膿液的氣味、性狀、顏色注意厭氧菌存在的可能。不能及時(shí)送檢應(yīng)應(yīng)用輸送培養(yǎng)基。分泌物采集規(guī)范3、燒傷傷口：清創(chuàng)，出現(xiàn)滲出液后以拭子用力采集，僅作需氧培養(yǎng)。也可送檢活檢組織標(biāo)本。4、膿皰或水皰：酒精消毒使之干燥，對(duì)于患兒用23號(hào)針頭挑破膿皰，拭子采集膿皰液和基底部標(biāo)本。5、標(biāo)記：不要只寫(xiě)“分泌物”標(biāo)記標(biāo)本，應(yīng)有專(zhuān)門(mén)的描述和解剖來(lái)源。注明滲出液來(lái)自開(kāi)放傷口還是閉合傷口。九、生殖道標(biāo)本采集規(guī)范生殖道標(biāo)本的采集方法推薦使用男性或女性專(zhuān)用拭子。男性前列腺：用肥皂和水清洗陰莖頭，通過(guò)直腸按摩前列腺，用無(wú)菌拭子收集液體或使液體進(jìn)入無(wú)菌管內(nèi)。男性尿道：用泌尿生殖道拭子插入尿道腔2