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上海市師范大學(xué)附中2024年高三下第一次測(cè)試生物試題注意事項(xiàng)1.考生要認(rèn)真填寫考場(chǎng)號(hào)和座位序號(hào)。2.試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上,在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答;第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3.考試結(jié)束后,考生須將試卷和答題卡放在桌面上,待監(jiān)考員收回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.下列有關(guān)細(xì)胞核的敘述,正確的是()A.核被膜外層與光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相連B.核孔復(fù)合體是供蛋白質(zhì)、RNA自由出入的通道C.核仁是核糖體的兩個(gè)亞基組裝成核糖體的場(chǎng)所D.染色質(zhì)由DNA、蛋白質(zhì)和少量RNA組成,凝聚程度較低2.下列關(guān)于激素、抗體、酶和神經(jīng)遞質(zhì)的敘述,正確的是()A.酶、激素、抗體的化學(xué)本質(zhì)都是蛋白質(zhì)B.乙酰膽堿與特定分子結(jié)合后可在神經(jīng)元之間傳遞信息C.激素和抗體都具有特異性,都只能作用于特定的靶細(xì)胞D.激素、神經(jīng)遞質(zhì)均在細(xì)胞外發(fā)揮作用后被滅后3.篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后,若細(xì)菌能分解淀粉,培養(yǎng)平板經(jīng)稀碘液處理,會(huì)出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈(如圖),實(shí)驗(yàn)結(jié)果見下表。菌種菌落直徑:C(mm)透明圈直徑:H(mm)H/C細(xì)菌Ⅰ5.111.22.2細(xì)菌Ⅱ8.113.01.6有關(guān)本實(shí)驗(yàn)的敘述,錯(cuò)誤的是A.培養(yǎng)基除淀粉外還含有氮源等其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)B.篩選分解淀粉的細(xì)菌時(shí),菌液應(yīng)稀釋后涂布C.以上兩種細(xì)菌均不能將淀粉酶分泌至細(xì)胞外D.H/C值反映了兩種細(xì)菌分解淀粉能力的差異4.培育三倍體無籽西瓜的方法是()A.多倍體育種 B.單倍體育種C.雜交育種 D.誘變育種5.人體細(xì)胞內(nèi)染色體上某個(gè)基因遺傳信息傳遞的過程如下圖。下列敘述正確的是()A.過程a在不同時(shí)間段進(jìn)行時(shí)會(huì)選擇不同的模板鏈B.過程b可能剪切掉了RNA1中的部分脫氧核苷酸C.過程c中轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸的工具不能與終止密碼配對(duì)D.基因表達(dá)時(shí)a過程和c過程進(jìn)行的場(chǎng)所是相同的6.對(duì)下面柱形圖的相關(guān)含義敘述中,不正確的是()A.若Y表示細(xì)胞中有機(jī)物的含量,a、b、c、d表示四種不同物質(zhì),則b最有可能是蛋白質(zhì)B.若Y表示細(xì)胞干重的基本元素含量,則b、d分別表示氧元素、碳元素C.若Y表示一段時(shí)間后不同離子在培養(yǎng)液中所占原來的比例,則該培養(yǎng)液中培養(yǎng)的植物,其根細(xì)胞膜上a離子的載體多于c離子的載體D.若Y表示細(xì)胞液的濃度,a、b、c、d表示不同細(xì)胞,則在1.3Lg/mL蔗糖溶液中,發(fā)生質(zhì)壁分離的可能性大小為b<d<c<a7.下列有關(guān)植物生長(zhǎng)素生理作用的敘述,正確的是A.同一植物發(fā)育程度不同的細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)素的敏感性不同B.不同濃度生長(zhǎng)素對(duì)同種植物同一器官的作用效果不會(huì)相同C.根的向地性和莖的向光性都體現(xiàn)了生長(zhǎng)素作用的兩重性D.高濃度的生長(zhǎng)素通過對(duì)基因組表達(dá)的調(diào)控促進(jìn)植物的生長(zhǎng)8.(10分)在科學(xué)研究過程中,下列做法不可行的是()A.以葉綠體作為標(biāo)志物可觀察細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)B.利用15N標(biāo)記的胸腺嘧啶研究基因的表達(dá)過程C.利用帶有熒光標(biāo)記的特定分子與基因結(jié)合將基因定位在染色體上D.以中央液泡大小和細(xì)胞液紫色深淺為標(biāo)志觀察洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞中質(zhì)壁分離的程度二、非選擇題9.(10分)下圖是綠色植物光合作用過程示意圖(字母代表物質(zhì))。請(qǐng)分析回答下列問題:(1)圖中A物質(zhì)最終被細(xì)胞利用的場(chǎng)所是_____________。(2)當(dāng)CO2供應(yīng)充足時(shí),突然停止光照,C3的含量將會(huì)______(填“上升”、“下降”或“不變”)。(3)若要分析該植物葉綠體中的色素種類,提取色素時(shí)常用到的提取液是_______。將裝有提取濾液的試管密封并置于適當(dāng)光照條件下幾分鐘后,試管內(nèi)氧氣的含量______(填“增加”、“減少”或“不變”)。10.(14分)水稻的育性由一對(duì)等位基因M、m控制,基因型為MM和Mm的個(gè)體可產(chǎn)生正常的雌、雄配子,基因型為mm的個(gè)體只能產(chǎn)生正常的雌配子,表現(xiàn)為雄性不育,基因M可使雄性不育個(gè)體恢復(fù)育性。通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)將基因M與雄配子致死基因A、藍(lán)色素生成基因D一起導(dǎo)入基因型為mm的個(gè)體中,并使其插入到一條不含m基因的染色體上,如下圖所示?;駾的表達(dá)可使種子呈現(xiàn)藍(lán)色,無基因D的種子呈現(xiàn)白色。該方法可以利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)大量培育不含轉(zhuǎn)基因成分的雄性不育個(gè)體。請(qǐng)回答問題:(1)基因型為mm的個(gè)體在育種過程中作為________(父本、母本),該個(gè)體與育性正常的非轉(zhuǎn)基因個(gè)體雜交,子代可能出現(xiàn)的因型為____________。(2)上圖所示的轉(zhuǎn)基因個(gè)體自交得到,請(qǐng)寫出遺傳圖解。____________(3)中雄性可育(能產(chǎn)生可育雌、雄配子)的種子顏色為_________。(4)個(gè)體之間隨機(jī)授粉得到種子,快速辨別雄性不育種子和轉(zhuǎn)基因雄性可育種子的方法是____________。11.(14分)甲醇酵母菌是基因工程中常用的受體菌,研究人員將人的膠原蛋白基因?qū)爰状冀湍妇胁⒊晒Ρ磉_(dá)?;卮鹣铝袉栴}。(1)獲取目的基因是實(shí)施基因工程的第一步,獲取目的基因的方法有_____、__________(答出兩種)。(2)要使膠原蛋白基因在甲醇酵母菌中表達(dá),需要先構(gòu)建基因表達(dá)載體而不是直接將基因?qū)胧荏w細(xì)胞,原因是_________________和_________________。(3)甲醇酵母菌可高效表達(dá)外源蛋白質(zhì)并分泌到細(xì)胞外,但自身蛋白質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中的很少,這一特點(diǎn)的優(yōu)點(diǎn)在于_____________,甲醇酵母菌分泌的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)與人的幾乎完全相同,從細(xì)胞結(jié)構(gòu)的角度分析,其原因可能是_______。(4)在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),用兩種不同的限制酶分別切割目的基因的兩端和質(zhì)粒,使目的基因和質(zhì)粒獲得不同的黏性末端,其目的是______________。12.菌根是真菌與植物根系的聯(lián)合體。真菌從土壤中吸取養(yǎng)分和水分供給植物,植物為真菌提供糖類等有機(jī)物。下表為不同溫度下菌根對(duì)玉米幼苗光合特性影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。組別光合作用速率(μmolCO2·m22·s-1)氣孔導(dǎo)度·(mmol·m-2·s-1)葉綠素相對(duì)含量25℃有菌根8.86239無菌根6.5623315℃有菌根6.45831無菌根3.842285℃有菌根4.04426無菌根1.41723氣孔導(dǎo)度是描述氣孔開放程度的量請(qǐng)回答下列問題:(1)本實(shí)驗(yàn)的自變量是_______________________________。(2)在光合作用中,CO2還原為糖的一系列反應(yīng)稱為__________循環(huán),CO2進(jìn)入該循環(huán)時(shí)首先與____________(寫中文名稱)結(jié)合,CO2進(jìn)入該循環(huán)后形成的第一個(gè)糖是____________。(3)15℃條件下,與無菌根玉米相比,有菌根玉米光合作用速率高,據(jù)表分析,其原因有①__________________________,促進(jìn)了光反應(yīng);②_________________________,促進(jìn)了碳反應(yīng)。(4)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:菌根能提高玉米的光合作用速率,在_______________條件下提高比例最大。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】
細(xì)胞核由核被膜、染色質(zhì)、核仁、核基質(zhì)等部分組成。核被膜是指包被細(xì)胞核的雙層膜,其外層與粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜相連;核被膜上有核孔復(fù)合體,是蛋白質(zhì)、RNA等大分子出人細(xì)胞核的通道;染色質(zhì)是細(xì)胞核中或粗或細(xì)的長(zhǎng)絲,由DNA和蛋白質(zhì)組成,細(xì)胞核所攜帶的遺傳信息就在染色質(zhì)的DNA分子中;細(xì)胞分裂過程中,染色質(zhì)凝聚成在光學(xué)顯微鏡下可以看到的染色體,染色體和染色質(zhì)成分相同,只是凝聚程度不同,是細(xì)胞分裂不同時(shí)期形狀各異的同一種物質(zhì);核仁是細(xì)胞核中呈圓形或橢圓形的結(jié)構(gòu),與核糖體的形成有關(guān)?!驹斀狻緼、核被膜外層與粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相連,A錯(cuò)誤;B、核孔復(fù)合體是供蛋白質(zhì)、RNA等生物大分子進(jìn)出的通道,但是具有選擇性,B錯(cuò)誤;C、核仁與核糖體的形成有關(guān),但是并不是核糖體組裝的場(chǎng)所,C錯(cuò)誤;D、染色質(zhì)凝聚程度較低,主要由DNA和蛋白質(zhì)組成,還含有少量的RNA,D正確。故選D。2、B【解析】
本題考查的知識(shí)點(diǎn)是激素、抗體、酶和神經(jīng)遞質(zhì)。酶是活細(xì)胞產(chǎn)生的,在細(xì)胞內(nèi)外都起作用,酶絕大多數(shù)是蛋白質(zhì),少數(shù)是RNA。神經(jīng)遞質(zhì):是指神經(jīng)末梢釋放的特殊化學(xué)物質(zhì),它能作用于支配的神經(jīng)元或效應(yīng)器細(xì)胞膜上的受體,從而完成信息傳遞功能。漿細(xì)胞產(chǎn)生的抗體與相應(yīng)的抗原發(fā)生特異性結(jié)合?!驹斀狻緼、酶是蛋白質(zhì)或RNA,只有部分激素的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)(如性激素屬于脂質(zhì)),抗體都是蛋白質(zhì),A錯(cuò)誤;B、乙酰膽堿與特定分子即突觸后膜上的受體結(jié)合后,能將化學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)變成電信號(hào),從而在神經(jīng)元之間傳遞信息,B正確;C、激素具有特異性,只是作用于靶細(xì)胞,但是有些激素的靶細(xì)胞是全身的組織細(xì)胞,如甲狀腺激素;抗體具有特異性,可以作用于抗原,而抗原不一定具有細(xì)胞結(jié)構(gòu),如某些大分子物質(zhì)也可以是抗原,C錯(cuò)誤;D、有些激素如性激素是在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用的,D錯(cuò)誤。故選B。3、C【解析】
該選擇培養(yǎng)基上的唯一碳源是淀粉,只有能利用淀粉的微生物才能存活,微生物分解淀粉后,會(huì)產(chǎn)生透明圈?!驹斀狻颗囵B(yǎng)基一般含有碳源、氮源、水、無機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子等成分,A正確;篩選淀粉分解菌時(shí),需要對(duì)菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,再將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),B正確;由題意可知,以上兩種菌均會(huì)產(chǎn)生透明圈,說明兩種菌均可以產(chǎn)生淀粉酶并分泌到細(xì)胞外分解淀粉,C錯(cuò)誤;淀粉分解菌的H/C越大,說明其產(chǎn)生的淀粉酶分解的淀粉相對(duì)越多,可說明該淀粉分解菌分解淀粉的能力越強(qiáng),D正確。因此,本題答案選C。4、A【解析】
三倍體無籽西瓜的培育過程:二倍體西瓜在幼苗期用秋水仙素處理,使其染色體數(shù)目加倍形成四倍體西瓜作為母本,然后與二倍體西瓜父本進(jìn)行雜交,將種子種植后獲得三倍體西瓜作為母本,用二倍體西瓜作為父本提供花粉刺激母本植株結(jié)出無籽西瓜?!驹斀狻扛鶕?jù)以上分析可知,培育三倍體無籽西瓜主要利用了二倍體西瓜被秋水仙素的處理,使染色體數(shù)目加倍的變化,利用了染色體數(shù)目變異的原理,屬于多倍體育種的方法。綜上所述,A正確,B、C、D錯(cuò)誤。故選A。5、C【解析】
分析圖示,過程a是轉(zhuǎn)錄,過程b是對(duì)RNA1進(jìn)行加工剪切,過程c是翻譯,據(jù)此答題?!驹斀狻緼、過程a是轉(zhuǎn)錄,需要的模板鏈?zhǔn)窃摶蛑械囊粭l鏈,這條鏈不會(huì)因?yàn)闀r(shí)間不同而發(fā)生變化,A錯(cuò)誤;B、過程b是對(duì)RNA1進(jìn)行加工剪切,剪切掉的應(yīng)該是一些核糖核苷酸,不是脫氧核苷酸,B錯(cuò)誤;C、過程c是翻譯,轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸的工具是tRNA,它們不能與終止密碼配對(duì),正是這個(gè)原因,當(dāng)核糖體讀取到終止密碼時(shí),肽鏈合成結(jié)束,C正確;D、人體細(xì)胞中染色體上的基因在表達(dá)時(shí),a過程在細(xì)胞核中進(jìn)行,c過程在細(xì)胞質(zhì)中的核糖體上進(jìn)行,場(chǎng)所是不相同的,D錯(cuò)誤。故選C?!军c(diǎn)睛】此題考查遺傳的分子基礎(chǔ),側(cè)重考查理解能力和信息能力。6、B【解析】
當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時(shí),細(xì)胞液中的水分就透過原生質(zhì)層進(jìn)入到外界溶液中,由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的伸縮性大,當(dāng)細(xì)胞不斷失水時(shí),液泡逐漸縮小,原生質(zhì)層就會(huì)與細(xì)胞壁逐漸分離開來,即發(fā)生了質(zhì)壁分離。當(dāng)細(xì)胞液的濃度大于外界溶液的濃度時(shí),外界溶液中的水分就透過原生質(zhì)層進(jìn)入到細(xì)胞液中,液泡逐漸變大,整個(gè)原生質(zhì)層就會(huì)慢慢地恢復(fù)成原來的狀態(tài),即發(fā)生了質(zhì)壁分離復(fù)原?!驹斀狻緼、若Y表示細(xì)胞中有機(jī)物的含量,b有機(jī)物最多,b最有可能是蛋白質(zhì),A正確;
B、若Y表示細(xì)胞干重的元素含量,則b、d分別表示碳元素、氧元素,B錯(cuò)誤;
C、若Y表示一段時(shí)間后不同離子在培養(yǎng)液中所占原來的比例,則某種離子所占比例越多,表示培養(yǎng)植物吸收越少,進(jìn)而推斷其根細(xì)胞膜上該離子的載體越少,所以結(jié)合圖分析可知,植物根細(xì)胞膜上a離子的載體多于c離子的載體,C正確;
D、若Y表示細(xì)胞液的濃度,a、b、c、d表示不同細(xì)胞,由于b細(xì)胞的細(xì)胞液濃度最大,a細(xì)胞液濃度最小,則在1.3g/mL蔗糖溶液中,發(fā)生質(zhì)壁分離的可能性大小為b<d<c<a,D正確。
故選B?!军c(diǎn)睛】本題綜合考查組成細(xì)胞的元素在干重和鮮重中的不同,以及細(xì)胞質(zhì)壁分離與質(zhì)壁分離復(fù)原現(xiàn)象及其原因。7、A【解析】
A、同一植物發(fā)育程度不同的細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)素的敏感性不同,幼嫩的細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)素敏感,老細(xì)胞則比較遲鈍,A項(xiàng)正確;B、生長(zhǎng)素對(duì)植物的生長(zhǎng)效應(yīng)表現(xiàn)出兩重性,即低濃度促進(jìn)生長(zhǎng),高濃度抑制生長(zhǎng),在促進(jìn)效應(yīng)從小變大再變小的過程中可能有兩種濃度對(duì)生長(zhǎng)的促進(jìn)效應(yīng)是相同的,B項(xiàng)錯(cuò)誤;C、將植物平放后,根向地生長(zhǎng),是因?yàn)檫h(yuǎn)地側(cè)生長(zhǎng)素濃度低,促進(jìn)生長(zhǎng),近地側(cè)生長(zhǎng)素濃度高,抑制生長(zhǎng),體現(xiàn)了生長(zhǎng)素生理作用的兩重性。而莖的向光性中背光側(cè)和向光側(cè)均為促進(jìn)作用,未體現(xiàn)生長(zhǎng)素生理作用的兩重性,故C項(xiàng)錯(cuò)誤;D、高濃度的生長(zhǎng)素通過對(duì)基因組表達(dá)的調(diào)控抑制植物的生長(zhǎng),D項(xiàng)錯(cuò)誤。故選A。8、B【解析】
用熒光染料標(biāo)記特定分子與基因結(jié)合將基因定位在染色體上;葉綠體主要分布于綠色植物的葉肉細(xì)胞,呈綠色,扁平的橢球形或球形,散布于細(xì)胞質(zhì)中,可用高倍顯微鏡觀察其形態(tài)和分布;DNA和RNA的主要區(qū)別是五碳糖和含氮堿基的不同,RNA中特有的成分有核糖和尿嘧啶?!驹斀狻緼、葉綠體含有光合色素,光鏡下容易觀察,存在于細(xì)胞質(zhì)中,可以通過觀察葉綠體的運(yùn)動(dòng)間接反映細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)速率和方向,A正確;B、基因的表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯,所需的原料為核糖核苷酸和氨基酸,不需要脫氧核苷酸,故不能用15N標(biāo)記的胸腺嘧啶研究基因的表達(dá)過程,B錯(cuò)誤;C、用帶有熒光標(biāo)記的特定分子與基因結(jié)合,再經(jīng)過熒光顯示,可以確定基因在染色體上的位置,C正確;D、質(zhì)壁分離過程中,中央液泡縮小、細(xì)胞液紫色變深,D正確。故選B。二、非選擇題9、線粒體內(nèi)膜上升無水乙醇不變【解析】
分析題圖:反應(yīng)Ⅰ為光反應(yīng),反應(yīng)Ⅱ?yàn)榘捣磻?yīng),A為氧氣,B為[H],C為ADP,D為ATP?!驹斀狻浚?)圖中A物質(zhì)為水光解產(chǎn)生的O2,在有氧呼吸第三階段與還原氫結(jié)合生成水,場(chǎng)所是線粒體內(nèi)膜。
(2)當(dāng)CO2供應(yīng)充足時(shí),突然停止光照,導(dǎo)致光反應(yīng)產(chǎn)生的[H]和ATP減少,C3被還原的量減少,而短時(shí)間內(nèi)二氧化碳的固定速率不變,所以C3的含量將會(huì)上升。(3)提取植物葉綠體中色素常用到的提取液是無水乙醇。將裝有提取濾液的試管密封并置于適當(dāng)光照條件下幾分鐘后,由于色素提取液中的光合色素不能獨(dú)立進(jìn)行光合作用,因此試管中的O2含量不變?!军c(diǎn)睛】本題考查了光合作用的有關(guān)知識(shí),意在考查考生理解色素的提取和分離,把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力,屬于中檔題。10、母本Mm、mm藍(lán)色根據(jù)種子顏色辨別(或:雄性不育種子為白色,轉(zhuǎn)基因雄性可育種子為藍(lán)色)【解析】
根據(jù)題干信息分析,水稻的育性由一對(duì)等位基因M、m控制,基因型為MM和Mm的個(gè)體可產(chǎn)生正常的雌、雄配子,而基因型為mm的個(gè)體雄性不育,只能產(chǎn)生正常的雌配子;基因M可使雄性不育個(gè)體恢復(fù)育性,基因A為雄配子致死基因,基因D控制藍(lán)色素形成。據(jù)圖分析,轉(zhuǎn)基因個(gè)體細(xì)胞中,將A、D、M導(dǎo)入m基因所在染色體的同一條非同源染色體上,該個(gè)體的基因型為ADMmm?!驹斀狻浚?)由于基因型為mm的個(gè)體雄性不育,因此其在育種過程中只能作為母本;該個(gè)體與育性正常的非轉(zhuǎn)基因個(gè)體(MM或Mm)雜交,子代可能出現(xiàn)的因型為Mm、mm。(2)上圖所示的轉(zhuǎn)基因個(gè)體基因型為ADMmm,可以產(chǎn)生m、ADMm兩種雌配子,但是只能產(chǎn)生m一種雄配子,因此后代的基因型為ADMmm、mm,遺傳圖解如圖所示:(3)根據(jù)以上分析已知,中雄性可育的基因型為ADMmm,因此其種子的顏色為藍(lán)色。(4)根據(jù)以上分析已知,中雄性可育的基因型為ADMmm,雌性的基因型為ADMmm、mm,隨機(jī)交配產(chǎn)生的后代中雄性可育的基因型為AADDMMmm(藍(lán)色)、ADMmm(藍(lán)色),雄性不育的基因型為mm(白色),因此可以根據(jù)后代種子的顏色快速辨別雄性不育種子和轉(zhuǎn)基因雄性可育種子?!军c(diǎn)睛】本題考查學(xué)生對(duì)遺傳規(guī)律的掌握和運(yùn)用,解答本題的難點(diǎn)是首先學(xué)生需要根據(jù)題干信息和圖示分析雄性不育個(gè)體和正常個(gè)體的基因型,并能根據(jù)各基因的作用判斷不同個(gè)體能產(chǎn)生的配子類型,對(duì)學(xué)生的信息分析能力有較高的要求。11、從基因文庫(kù)中獲取人工合成目的基因無表達(dá)所需的啟動(dòng)子目的基因無復(fù)制原點(diǎn)(目的基因不能在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在)便于目的蛋白的分離和純化甲醇酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化、防止目的基因與質(zhì)粒反向連接【解析】
基因工程是狹義的遺傳工程,基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因(即目的基因)在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定高效地表達(dá)。為了實(shí)現(xiàn)基因工程的目標(biāo),通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細(xì)胞等基本要素,并按照一定的程序進(jìn)行操作,它包括目的基因的獲得、重組DNA的形成,重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞也稱(宿主)細(xì)胞、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞和目的基因的表達(dá)等幾個(gè)方面?;虮磉_(dá)載體的構(gòu)建(即目的基因與運(yùn)載體結(jié)合)是實(shí)施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。其構(gòu)建目的是使目的基因能在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時(shí),使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用?!驹斀狻浚?)獲取目的基因是實(shí)施基因工程的第一步,獲取目的基因的方法有從基因文庫(kù)中獲?。康幕蛐蛄形粗?、人工合成(目的基因序列已知)。(2)單獨(dú)的目的基因容易丟失,且目的基因的表達(dá)需要啟動(dòng)子和終止子,目的基因的復(fù)制需要復(fù)制原點(diǎn),因此要使膠原蛋白基因在甲醇薛母菌中表達(dá),需要先構(gòu)建基因表達(dá)載體而不是直接將基因?qū)胧荏w細(xì)胞。(3)甲醇酵母菌可高效表達(dá)外源蛋白質(zhì)并分泌到細(xì)胞外,但自身蛋白質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中的很少,這樣分泌到細(xì)胞外的蛋白主要是我們需要的目的蛋白,這一特點(diǎn)的優(yōu)點(diǎn)在于便于目的蛋白的分離和純化。甲醇酵母菌分泌的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)與人的幾乎完全相同,從細(xì)胞結(jié)構(gòu)的角度分析,其原因可能是甲醇酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,可以對(duì)表達(dá)出的蛋白質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步的加工、運(yùn)輸。(4)
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