蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)-等電點和膠體性質(zhì)

生物化學重慶醫(yī)藥高等?？茖W校佘玉罕蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)等電點（一）兩性解離-COOH-COO--H

++H+-COO--COOH-NH3+-NH2+H+-H

+-NH3+-NH2蛋白質(zhì)分子除兩端的氨基(-NH2)和羧基(-COOH)可解離外，氨基酸殘基側(cè)鏈中某些基團，也可解離成帶負電荷或正電荷的基團。一、兩性解離和等電點實質(zhì)：各種帶電基團得失氫離子(H

+

)的過程。各種蛋白質(zhì)的pI不同，多接近5.0。PrCOOHNH3+PrCOO-NH3+PrCOO-NH2+H+pH<pI陽離子pH>pI陰離子當?shù)鞍踪|(zhì)溶液處于某一pH時，蛋白質(zhì)解離成正、負離子的趨勢相等，即成為兼性離子，凈電荷為0，此時溶液的pH稱為蛋白質(zhì)的等電點(pI)。（二）等電點pH=pI兼性離子-H+-H++H+

在電場中，帶電顆粒向電性相反的電極移動的現(xiàn)象稱為電泳。如蛋白質(zhì)分子帶正電，向負極泳動；帶負電則向正極泳動。

應用pI-pH的關(guān)系所帶電荷電離基團移動方向pI-pH=0不帶電-不移動pI

-pH>0帶正電-NH3+向負極移動pI

-pH<0帶負電-COO-向正極移動電泳：練習：現(xiàn)有一含A、B、C，三種蛋白質(zhì)的混合樣品。其pI依次為4.5、10.2、9.2，在pH為8緩沖溶液中進行醋酸薄膜電泳分離，請在下圖中標示出點樣位置及電泳結(jié)果。＋－

解析：pH=8A蛋白：pI–pH=-3.5<0，帶“-”

，向正極移動；B蛋白：pI–pH=2.2>0，帶“+”

，向負極移動；C蛋白：pI–pH=1.2>0，帶“+”

，向負極移動；

因B>C，故B蛋白跑得更快。ACB練習：現(xiàn)有一含A、B、C、D、E，五種蛋白質(zhì)的混合樣品。其pI依次為4.5、10.2、9.2、8.6、5.2，在pH為8緩沖溶液中進行醋酸薄膜電泳分離，請在下圖中標示出點樣位置及電泳結(jié)果。＋－

ACBDE蛋白質(zhì)所帶電荷量越大，在電場中跑得越快；蛋白質(zhì)的分子量越大，在電場中跑得越慢。等電聚焦電泳：當?shù)鞍踪|(zhì)在其等電點時，凈電荷為零，在電場中不再移動。++－－－－+－－－－－5.06.07.0穩(wěn)定pH梯度5.06.07.0穩(wěn)定pH梯度通電++－－－－+－－－－－++－－－－+－－－－－++－－－－+－－－－－++－－－－+－－－－－蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)膠體性質(zhì)

一、蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)溶質(zhì)分子直徑與溶液真溶液膠體顆粒懸濁液

d<1nm1nm<d<100nmd>100nm蛋白質(zhì)的相對分子量1萬-100萬之間，分子量大。其分子直徑1-100nm之間，在膠體顆粒的范圍。因此具有膠體性質(zhì)。

蛋白質(zhì)具有膠體溶液的性質(zhì)：布朗運動、丁道爾現(xiàn)象、不能透過半透膜、具有吸附力等。穩(wěn)定因素：蛋白質(zhì)顆粒表面的水化膜和帶同種電荷，阻止分子間的聚集、沉淀。表面親水內(nèi)部疏水同種電荷表面親水內(nèi)部疏水同種電荷①透析：由于膠體溶液中的Pro不能通過半透膜，因此可以應用透析法將非蛋白的小分子雜質(zhì)除去。應用②蛋白質(zhì)的沉淀：破壞維持蛋白質(zhì)穩(wěn)定的2個因素之一（破壞同種電荷和水化膜），則導致蛋白質(zhì)溶液沉淀析出。（酸、堿液、脫水、鹽析、重金屬等）+H++H+pH=pIpH<pIp