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第第頁土壤有效硅試劑盒說明書土壤有效硅試劑盒說明書微量法100T/96S注意:正式測定之前選擇23個預(yù)期差別大的樣本做猜測定。測定意義:硅元素是一種十分緊要的植物營養(yǎng)元素,土壤中有效硅含量影響著植物的光合作用、呼吸作用以及對逆境的抗性。測定原理:硅酸根與鉬酸銨在弱酸條件下生成硅鉬酸,可被還原劑還原成硅鉬藍(lán),在700nm有特征汲取峰。自備試驗用品及儀器:天平、常溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀。試劑構(gòu)成和配制:提取液:液體105mL×1瓶,4℃保管。試劑一:液體4mL×1瓶,4℃保管。試劑二:液體4mL×1瓶,4℃保管。試劑三:液體4mL×1瓶,4℃保管。試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保管。臨用前加入4mL試劑四溶劑充分溶解。試劑四溶劑:液體4mL×1瓶,4℃保管。樣本處理:新鮮土樣風(fēng)干,過20目篩,依照土壤質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5的比例(建議稱取約0.2g土樣,加入1mL提取液),振蕩提取1h,10000g,25℃離心10min,取上清液待測。測定操作表:空白管測定管樣本(μL)40提取液(μL)40試劑一(μL)4040混勻,35℃,15min試劑二(μL)4040混勻,25℃,10min試劑三(μL)4040試劑四(μL)4040充分混勻,25℃靜置30min于微量石英比色皿/96孔板,蒸餾水調(diào)零,測定700nm處吸光值A(chǔ),分別記為A空白管和A測定管,△A=A測定管A空白管計算公式:a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.0933x0.0523,R2=0.9992有效硅含量(mg/kg)=(△A+0.0523)÷0.0933×V反總÷(W×V樣÷V樣總)=53.6×(△A+0.0523)÷WV反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.04mL;V樣總:加入提取液體積,1mL,W:樣本質(zhì)量,gb.用96孔板測定的計算公式如下標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.0467x0.0523,R2=0.9992有效硅含量(mg/kg)=(△A+0.0523)÷0.0467×V反總÷(W×V樣÷V樣總)=107.2×(△A+0.0523)÷WV反總:反應(yīng)總體積,0.
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