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文檔簡介

第十單元現(xiàn)代生物科技專題

學(xué)案49基因工程

【考綱要求】1.基因工程誕生(I)o2.基因工程原理及技術(shù)(n)。3.基因

工程應(yīng)用(n)。4.蛋白質(zhì)工程(I)。

一、基因工程概念

基因工程:又叫做技術(shù)或技術(shù),是按照人們意愿,

把一種生物某種基因提取出來,加以,然后放到另一種生物

細(xì)胞里,地改造生物遺傳性狀。

二、基因工程操作工具

1.限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀",又稱為O

特點(diǎn):能夠識別DNA特定_____________,切開兩個之間

限制酶切割DNA產(chǎn)生末端有兩種形式:與o

2.DNA連接酶——“分子縫合針”

作用:將雙鏈_______“縫合”起來,恢復(fù)被限制酶切開兩個核甘酸

之間O

3.基因進(jìn)入受體細(xì)胞載體—“分子運(yùn)輸車”

⑴常用載體:O

⑵質(zhì)粒載體特點(diǎn):①能夠在細(xì)胞內(nèi)并穩(wěn)定保存。②具有一個

或多個,便于外源DNA片段插入其中。③具有特

殊,供重組DNA鑒定與選擇。

三、基因工程根本操作程序

第1頁

1.目基因獲?。孩艔闹蝎@取;(2)利用

擴(kuò)增目基因;⑶合成。

2.構(gòu)建(核心)

⑴目:使_______基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一

代,使目基因能夠表達(dá)與發(fā)揮作用。

3.將目基因?qū)胧荏w細(xì)胞(轉(zhuǎn)化)

⑴將目基因?qū)胫参锛?xì)胞:常用方法有法、基因槍法與

__________法。

⑵將目基因?qū)雱游锛?xì)胞:常用方法是_______法。

⑶將目基因?qū)胛⑸锛?xì)胞:受體細(xì)胞飛魄-

含耳5'麟陶洲,感受態(tài)細(xì)胞吸

收DNA分子

4.目基因_______與o

探究點(diǎn)一基因工程概念及操作工具

1.基因工程概念是什么?

2.完成理解基因工程操作工具比擬表:

限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶(分

工程運(yùn)載體(分子運(yùn)輸車)

(分子手術(shù)刀)子縫合針)

識別特定______序一般作用于兩能夠在宿主細(xì)胞中___

特性

列,并在條具有一樣并穩(wěn)定—;具有一個或

或條

__________切割______DNA分一個限制酶切位點(diǎn);具

DNA分子子有―基因

第2頁

提取—基因,切構(gòu)建重組DNA將_______轉(zhuǎn)移到宿主

作用

割—分子細(xì)胞中并大量復(fù)制

將DNA分子切成一樣黏性末端

結(jié)果DNA片段,產(chǎn)生之間形成形成重組_______

___末端_______鍵

思維拓展

1.對基因工程概念理解

基因拼接技術(shù)或DNA重

別名

組技術(shù)

操作環(huán)境生物體外

操作對象基因

操作水平DNA分子水平

剪切一拼接一導(dǎo)入一表

根本過程

達(dá)

結(jié)果人類需要基因產(chǎn)物

與雜交育種克制遠(yuǎn)緣雜交不親與障

相比礙

與誘變育種

定向改造生物性狀

相比

原理基因重組

2.在切割目基因與載體時要求用同一種限制酶,目是產(chǎn)生一樣黏性末

輛,kill。

第3頁

3.將一個基因從DNA分子上切割下來,需要2個限制酶,同時產(chǎn)生

4個黏性末端。

4.不同DNA分子用同一種限制酶切割產(chǎn)生黏性末端都一樣,同一個

DNA分子用不同限制酶產(chǎn)生黏性末端可能一樣。

避究例如1](2021?全國理綜D,5)以下表達(dá)符合基因工程概念是

()

A.B細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合,雜交瘤細(xì)胞中含有B細(xì)胞中抗體基因

B.將人干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌,獲得能產(chǎn)生人干擾

素菌株

C.用紫外線照射青霉菌,使其DNA發(fā)生改變,通過篩選獲得青霉素

高產(chǎn)菌株

D.自然界中天然存在噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌

DNA上

聽課記錄:

探究點(diǎn)二基因工程根本操作程序

1.完成基因工程根本操作流程圖:

2.完成目基因檢測與鑒定表,并加以理解、掌握:

類型步驟檢測內(nèi)容方法

分目基因是否插入受體_______________(D

第一步

子細(xì)胞染色體DNA上NA與DNA之間)

水目基因是否轉(zhuǎn)錄出_______雜交技術(shù)

第二步

平mRNA(DNA與mRNA之間)

第4頁

蛋白質(zhì)分子雜交

目基因是否翻譯出蛋

第三步(_____________雜交

白質(zhì)

法)

___水

——法或—法

平鑒定

思維拓展

1.在整個工程中,只有第三步將目基因?qū)胧荏w細(xì)胞過程中不發(fā)生

堿基互補(bǔ)配對,其他步驟均發(fā)生配對。

2.切割質(zhì)粒與目基因限制酶必須是同一種酶,以獲得一樣黏性末端,

利于基因表達(dá)載體構(gòu)建。

3.插入目基因只是構(gòu)造基因局部,其表達(dá)需要調(diào)控序列,因而用作

載體質(zhì)粒插入部位前須有啟動子,后須有終止子。

4.PCR技術(shù)與DNA復(fù)制比擬

PCR技術(shù)DNA復(fù)制

DNA雙鏈復(fù)制(堿基互補(bǔ)配對)

同四種游離脫氧核甘酸

點(diǎn)

模板、ATP、酶等

不解

DNA在高溫下變性解旋解旋酶催化

同旋

第5頁

點(diǎn)方

體外復(fù)制主要在細(xì)胞核內(nèi)

熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq細(xì)胞內(nèi)含有DNA聚

酶)合酶

結(jié)在短時間內(nèi)形成大量

形成整個DNA分子

果DNA片段

豚究例如2](2021?浙江卷,6)將ada(腺甘酸脫氨酶基因)通過質(zhì)

粒pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)腺甘酸脫氨酶。以下表達(dá)錯誤是

()

A.每個大腸桿菌細(xì)胞至少含一個重組質(zhì)粒

B.每個重組質(zhì)粒至少含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點(diǎn)

C.每個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點(diǎn)至少插入一個ada

D.每個插入ada至少表達(dá)一個腺甘酸脫氨酶分子

聽課記錄:

探究點(diǎn)三基因工程應(yīng)用

完成基因工程應(yīng)用表格,了解應(yīng)用成果。

轉(zhuǎn)基因生物目基因成果舉例

植抗蟲基因:Bt毒蛋

抗蟲轉(zhuǎn)基因植抗蟲水稻、抗蟲棉、

物白基因、蛋白酶抑

物抗蟲玉米

基制劑基因、淀粉酶

第6頁

因抑制劑基因、植物

工凝集素基因

程抗——基因:病毒

外殼蛋白基因、病

抗病毒煙草、抗病

抗病轉(zhuǎn)基因植毒復(fù)制酶基因;抗

毒小麥、抗病毒番

物——基因:幾丁質(zhì)

茄、抗病毒甜椒

酶基因、抗毒素合

成基因

抗逆轉(zhuǎn)基因:滲透

抗鹽堿與抗干旱煙

抗逆轉(zhuǎn)基因植壓調(diào)節(jié)基因、抗凍

草、抗寒番茄、抗

物蛋白基因、抗除草

______大豆與玉米

劑基因

優(yōu)良性狀基因:提

高必需氨基酸含量

高_(dá)_____玉米、耐

蛋白質(zhì)編碼基因、

儲存番茄、新花色

轉(zhuǎn)基因植物控制番茄成熟基

矮牽牛

因、與花青素代謝

有關(guān)基因

動提高生長速度轉(zhuǎn)基因綿羊、轉(zhuǎn)基

基因

物轉(zhuǎn)基因動物因鯉魚

基生產(chǎn)藥物藥用蛋白基因+乳

—生物反響器

因轉(zhuǎn)基因動物腺蛋白基因啟動子

第7頁

工改善畜產(chǎn)品品質(zhì)乳汁中含乳糖較少

________基因

程轉(zhuǎn)基因動物轉(zhuǎn)基因牛

外源抗原決定基因

利用克隆技術(shù)培育

作器官移植供體表達(dá)——因子或除

沒有免疫排斥反響

轉(zhuǎn)基因動物去供體——決定基

豬器官

基治療______免疫缺

體外基因治療腺甘酸脫氨酶基因

因陷癥

治治療囊性纖維化病治療______囊性纖

體內(nèi)基因治療

療基因維化病

思維拓展基因治療是治療人類遺傳病根本方法,但由于尚未全面了

解基因調(diào)控機(jī)制與疾病分子機(jī)理,基因治療只處于初期臨床試驗(yàn)階段。

【探究例如3](2021?上海綜合能力測試)運(yùn)用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培養(yǎng)單細(xì)

胞“工程硅藻”,可把光合作用合成有機(jī)物以脂質(zhì)形式儲存起來???/p>

學(xué)家方案在海水中大量培養(yǎng)“工程硅藻",捕撈后從中提煉“生物柴

油"。與礦物柴油相比,使用這種“生物柴油”優(yōu)點(diǎn)是()

①可再生②不顯著增加碳排放③不排放含硫廢氣

④不會對生態(tài)環(huán)境造成負(fù)面影響

A.①②③B.①③④

C.①②④D.②③④

聽課記錄:

探究點(diǎn)四蛋白質(zhì)工程

第8頁

1.蛋白質(zhì)工程概念

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子構(gòu)造規(guī)律及其與生物功能關(guān)系作為根

底,通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋

白質(zhì)進(jìn)展改造,或制造一種新蛋白質(zhì),以滿足人類生產(chǎn)與生活需求。

2.蛋白質(zhì)工程過程填充

蛋白質(zhì)工程過程:其根本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)一設(shè)計(jì)預(yù)期蛋

白質(zhì)-推測應(yīng)有序列一找到相對應(yīng)

序列()o其流程圖如下:

思維拓展

1.對蛋白質(zhì)工程概念應(yīng)從以下幾個方面理解

⑴蛋白質(zhì)工程根底:蛋白質(zhì)分子構(gòu)造規(guī)律及其與生物功能關(guān)系;⑵

蛋白質(zhì)工程實(shí)質(zhì):改造控制該蛋白質(zhì)合成基因;⑶蛋白質(zhì)工程產(chǎn)物:

產(chǎn)生新蛋白質(zhì),是自然界所沒有。

2.蛋白質(zhì)工程是在基因工程根底上,延伸出來第二代基因工程。因

為對現(xiàn)有蛋白質(zhì)改造或制造新蛋白質(zhì),必須通過基因修飾或基因合成

實(shí)現(xiàn)。

【探究例如4】以下關(guān)于蛋白質(zhì)工程說法正確是()

A.蛋白質(zhì)工程以基因工程為根底

B.蛋白質(zhì)工程就是酶工程延伸

C.蛋白質(zhì)工程就是用蛋白酶對蛋白質(zhì)進(jìn)展改造

D.蛋白質(zhì)工程只能生產(chǎn)天然蛋白質(zhì)

聽課記錄:

第9頁

題組一基因工程及根本操作

1.(2021?四川卷,5)北極比目魚中有抗凍基因,其編碼抗凍蛋白具

有11個氨基酸重復(fù)序列,該序列重復(fù)次數(shù)越多,抗凍能力越強(qiáng)。以

下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株過程示意圖,有關(guān)表達(dá)正確是()

A.過程①獲取目基因,可用于基因工程與比目魚基因組測序

B.將多個抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達(dá)新基因,不能得到抗凍

性增強(qiáng)抗凍

蛋白

C.過程②構(gòu)成重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因,需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)展篩

D.應(yīng)用DNA探針技術(shù),可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目基因存

在及其完全表達(dá)

2.以下圖為DNA分子在不同酶作用下所發(fā)生變化,圖中依次表示限

制酶、DNA聚合酶、DNA連接酶、解旋酶作用正確順序是()

A.①②③④B.①②④③C.①④②③D.①④③②

3.以下關(guān)于基因工程表達(dá),不正確是(多項(xiàng)選擇)()

A.基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因?yàn)槟炕?/p>

B.細(xì)菌質(zhì)粒是基因工程常用運(yùn)載體

C.通常用一種限制性核酸內(nèi)切酶處理含目基因DNA,用另一種處理

運(yùn)載體DNA

D.為培育成抗除草劑作物新品種,導(dǎo)入抗除草劑基因時只能以受精

卵為受體

第10頁

題組二基因工程應(yīng)用及蛋白質(zhì)工程

4.(2021?鎮(zhèn)江質(zhì)檢)科學(xué)家將干擾素基因進(jìn)展定點(diǎn)突變導(dǎo)入大

腸桿菌表達(dá),使干擾素第十七位半胱氨酸,改變成絲氨酸,結(jié)果

大大提高了B-干擾素抗病毒活性,并且提高了儲存穩(wěn)定性。該生物

技術(shù)為()

A.蛋白質(zhì)工程B.基因工程

C.基因突變D.細(xì)胞工程

5.以下關(guān)于基因工程及其應(yīng)用表達(dá)正確是()

A.假設(shè)要生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因抗病水稻,可先將目基因?qū)氪竽c桿菌中,再

轉(zhuǎn)入水稻細(xì)胞

B.用氨基酸序列推測合成目基因與原基因編碼區(qū)中外顯子一致

C.用DNA探針能檢測飲用水中重金屬物質(zhì)含量

D.作為運(yùn)載體要有多種限制酶切點(diǎn),但對一種限制酶而言,最好只

有一個切點(diǎn)

6.(2021?南師大附中學(xué)情分析)蛋白質(zhì)工程中,直接需要進(jìn)展操作

對象是()

A.氨基酸構(gòu)造B.蛋白質(zhì)空間構(gòu)造

C.肽鏈構(gòu)造D.基因構(gòu)造

7.科學(xué)家將動物體內(nèi)能夠合成胰島素基因與大腸桿菌DNA分子重

組,并且在大腸桿菌體內(nèi)表達(dá)成功。請據(jù)圖答復(fù)以下問題:

(1)圖中①DNA是以為模板,形成單鏈DNA,在酶

作用下合成雙鏈DNA,從而獲得了所需要基因。

第11頁

⑵圖中②代表是____________,在它作用下將質(zhì)粒(DNA)切

出________末端。

⑶圖中④表示將o⑤表示DNA隨大腸桿

菌繁殖而進(jìn)展________o

⑷采用蛋白質(zhì)工程可以對胰島素進(jìn)展改造,使之起效時間縮短,保證

餐后血糖頂峰與血液中胰島素頂峰一致。如果你是科研工作者,請寫

出研制速效胰島素思路。

⑸以下關(guān)于蛋白質(zhì)工程說法不正確是()

A.蛋白質(zhì)工程能將人抗體某些區(qū)段替代鼠單克隆抗體區(qū)段,降低鼠

單克隆抗體免疫原性

B.蛋白質(zhì)工程可對酶催化活性、底物專一性、抗氧化性、熱變性、

堿變性等加以改變

C.理論上通過對關(guān)鍵氨基酸置換與增刪是進(jìn)展蛋白質(zhì)工程唯一方法

D.蛋白質(zhì)工程崛起主要是工業(yè)生產(chǎn)與根底理論研究需要

題組三綜合題

8.(2021?安徽理綜,31II)家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。

將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng),可提取干擾素用于制藥。

⑴進(jìn)展轉(zhuǎn)基因操作前,需用酶短時處理幼蠶組織,以便獲得

單個細(xì)胞。

⑵為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá),需要把來自cDNA文庫干

擾素基因片段正確插入表達(dá)載體與之間。

⑶采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。該P(yáng)CR

第12頁

反響體系主要成分應(yīng)包含:擴(kuò)增緩沖液(含Mg2+)、水、4種脫氧核糖

核甘酸、模板DNA、與

⑷利用生物反響器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時,貼壁生長細(xì)胞會產(chǎn)生接觸抑制。

通常將多孔中空薄壁小玻璃珠放入反響器中,這樣可以

增加培養(yǎng)細(xì)胞數(shù)量,也有利于空氣交換。

9.干擾素是病毒侵入人體后由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生一種免疫活性物質(zhì),它

具有廣譜抗病毒作用。利用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)干擾素流程如下:

⑴過程①產(chǎn)生物質(zhì)A是_____,cDNA文庫(大于/小于)人基

因組文庫。

⑵過程④用到工具酶是,過程⑤需先用

處理受體細(xì)胞,過程⑥通常采用技術(shù)o

⑶過程⑧與⑨關(guān)鍵技術(shù)分別是_______、o

⑷基因工程核心步驟是圖中(填標(biāo)號)。

學(xué)案49基因工程

課前準(zhǔn)備區(qū)

一、基因拼接DNA重組修飾改造定向

二、L限制酶核昔酸序列核甘酸磷酸二酯鍵黏性末端平末

場上山

2.DNA片段磷酸二酯鍵3.(1)質(zhì)粒(2)①自我復(fù)制②限制酶切

割位點(diǎn)③標(biāo)記基因

三、1.⑴基因文庫(2)PCR技術(shù)(3)人工

第13頁

2.基因表達(dá)載體⑴目⑵標(biāo)記RNA聚合終止鑒別篩選

3.⑴農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化花粉管通道⑵顯微注射⑶感受態(tài)4.檢測

鑒定

課堂活動區(qū)

探究點(diǎn)一

1.按照人們愿望,進(jìn)展嚴(yán)格設(shè)計(jì),并通過體外DNA重組與轉(zhuǎn)基因等

技術(shù),賦予生物以新遺傳特性,從而創(chuàng)造出更符合人們需要新生物類

型或生物產(chǎn)品,又叫DNA重組技術(shù)。

2.核甘酸特定位點(diǎn)黏性末端復(fù)制保存多標(biāo)記目運(yùn)

載體目基因黏性磷酸二酯DNA

探究例如1B[基因工程是指按照人們愿望,進(jìn)展嚴(yán)格設(shè)計(jì),并通

過體外DNA重組與轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生物以新遺傳特性,進(jìn)而創(chuàng)

造出更符合人們需要新生物類型與生物產(chǎn)品。B細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合,

屬于細(xì)胞工程;用紫外線照射青霉菌,使其DNA發(fā)生改變,進(jìn)而篩

選出青霉素高產(chǎn)菌株,屬于人工誘變;自然界中天然存在噬菌體自行

感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上,并沒有進(jìn)展人為加工,不屬

于基因工程。]

探究點(diǎn)二

1.mRNAPCR基因組文庫cDNA文庫構(gòu)建基因表達(dá)載體

目基因

2.DNA分子雜交技術(shù)核酸分子抗原一抗體個體侵染感染

探究例如2C[大腸桿菌成功表達(dá)出腺甘酸脫氨酶,說明這些大腸

第14頁

桿菌都至少含有一個重組質(zhì)粒,A項(xiàng)正確;作為載體條件為至少含有

一個或多個酶切位點(diǎn),所以作為載體質(zhì)粒至少含有一個限制性核酸內(nèi)

切酶識別位點(diǎn),B項(xiàng)正確;作為基因表達(dá)載體應(yīng)包括目基因、啟動子、

終止子、標(biāo)記基因四局部,但并不是每個酶切位點(diǎn)都至少插入一個

ada,C項(xiàng)錯誤;由于這些目基因成功表達(dá),所以每個ada至少表達(dá)

一個腺甘酸脫氨酶分子,D項(xiàng)正確。]

探究點(diǎn)三

病毒真菌除草劑改進(jìn)品質(zhì)賴氨酸外源生長激素乳腺腸

乳糖酶調(diào)節(jié)抗原復(fù)合型遺傳性

探究例如3A

探究點(diǎn)四

2.構(gòu)造氨基酸脫氧核昔酸基因轉(zhuǎn)錄翻譯氨基酸分子

設(shè)計(jì)

探究例如4A[蛋白質(zhì)工程以基因工程為根底,又稱為第二代基因

工程。蛋白質(zhì)工程不僅能生產(chǎn)天然蛋白質(zhì),還可以定向改造控制蛋白

質(zhì)合成相應(yīng)基因中脫氧核甘酸序列或人工合成所需要自然界原本不存

在基因片段,從而合成自然界中原本不存在蛋白質(zhì)。]

構(gòu)建知識網(wǎng)絡(luò)

DNA連接酶基因表達(dá)載體檢測鑒定

課后練習(xí)區(qū)

1.B[因?yàn)橐环N氨基酸可能對應(yīng)多種密碼子、真核生物體內(nèi)基因含

有內(nèi)含子等因素,導(dǎo)致逆轉(zhuǎn)錄合成目基因與原基因有較大差異,所以

第15頁

人工合成目基因不能用于比目魚基因組測序,A選項(xiàng)錯誤;抗凍蛋白

11個氨基酸重復(fù)序列重復(fù)次數(shù)越多,抗凍能力越強(qiáng),并不是抗凍基因

編碼區(qū)重復(fù)次數(shù)越多抗凍能力越強(qiáng),抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成新

基因已不是原來抗凍基因,因此不能得到抗凍性增強(qiáng)抗凍蛋白,B選

項(xiàng)正確;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目基因?qū)胫参锛?xì)胞最常用方法,不是為

了篩選含有標(biāo)記基因質(zhì)粒,C選項(xiàng)錯誤;應(yīng)用DNA探針技術(shù),可以

檢測轉(zhuǎn)基因植物中目基因存在,但不能完成對目基因表達(dá)檢測,D選

項(xiàng)錯誤。]

2.C[限制酶可在特定位點(diǎn)對DNA分子進(jìn)展切割;DNA聚合酶在

DNA分子復(fù)制時將脫氧核甘酸連接成脫氧核甘酸鏈;DNA連接酶可

將限制酶切開磷酸二酯鍵連接在一起;解旋酶作用是將DNA雙鏈解

開螺旋,為復(fù)制或轉(zhuǎn)錄提供模板。]

3.ACD[基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因;質(zhì)粒是基因

工程常用運(yùn)載體;通常用同一種限制酶切割目基因與運(yùn)載體,以獲得

一樣黏性末端;受體細(xì)胞可以是受精卵,也可以是體細(xì)胞。]

4.A[基因工程是通過對基因操作,將符合人們需要目

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