版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
第十單元現(xiàn)代生物科技專題
學(xué)案49基因工程
【考綱要求】1.基因工程誕生(I)o2.基因工程原理及技術(shù)(n)。3.基因
工程應(yīng)用(n)。4.蛋白質(zhì)工程(I)。
一、基因工程概念
基因工程:又叫做技術(shù)或技術(shù),是按照人們意愿,
把一種生物某種基因提取出來,加以,然后放到另一種生物
細(xì)胞里,地改造生物遺傳性狀。
二、基因工程操作工具
1.限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀",又稱為O
特點(diǎn):能夠識別DNA特定_____________,切開兩個之間
限制酶切割DNA產(chǎn)生末端有兩種形式:與o
2.DNA連接酶——“分子縫合針”
作用:將雙鏈_______“縫合”起來,恢復(fù)被限制酶切開兩個核甘酸
之間O
3.基因進(jìn)入受體細(xì)胞載體—“分子運(yùn)輸車”
⑴常用載體:O
⑵質(zhì)粒載體特點(diǎn):①能夠在細(xì)胞內(nèi)并穩(wěn)定保存。②具有一個
或多個,便于外源DNA片段插入其中。③具有特
殊,供重組DNA鑒定與選擇。
三、基因工程根本操作程序
第1頁
1.目基因獲?。孩艔闹蝎@取;(2)利用
擴(kuò)增目基因;⑶合成。
2.構(gòu)建(核心)
⑴目:使_______基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一
代,使目基因能夠表達(dá)與發(fā)揮作用。
3.將目基因?qū)胧荏w細(xì)胞(轉(zhuǎn)化)
⑴將目基因?qū)胫参锛?xì)胞:常用方法有法、基因槍法與
__________法。
⑵將目基因?qū)雱游锛?xì)胞:常用方法是_______法。
⑶將目基因?qū)胛⑸锛?xì)胞:受體細(xì)胞飛魄-
含耳5'麟陶洲,感受態(tài)細(xì)胞吸
收DNA分子
4.目基因_______與o
探究點(diǎn)一基因工程概念及操作工具
1.基因工程概念是什么?
2.完成理解基因工程操作工具比擬表:
限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶(分
工程運(yùn)載體(分子運(yùn)輸車)
(分子手術(shù)刀)子縫合針)
識別特定______序一般作用于兩能夠在宿主細(xì)胞中___
特性
列,并在條具有一樣并穩(wěn)定—;具有一個或
或條
__________切割______DNA分一個限制酶切位點(diǎn);具
件
DNA分子子有―基因
第2頁
提取—基因,切構(gòu)建重組DNA將_______轉(zhuǎn)移到宿主
作用
割—分子細(xì)胞中并大量復(fù)制
將DNA分子切成一樣黏性末端
結(jié)果DNA片段,產(chǎn)生之間形成形成重組_______
___末端_______鍵
思維拓展
1.對基因工程概念理解
基因拼接技術(shù)或DNA重
別名
組技術(shù)
操作環(huán)境生物體外
操作對象基因
操作水平DNA分子水平
剪切一拼接一導(dǎo)入一表
根本過程
達(dá)
結(jié)果人類需要基因產(chǎn)物
與雜交育種克制遠(yuǎn)緣雜交不親與障
相比礙
與誘變育種
定向改造生物性狀
相比
原理基因重組
2.在切割目基因與載體時要求用同一種限制酶,目是產(chǎn)生一樣黏性末
輛,kill。
第3頁
3.將一個基因從DNA分子上切割下來,需要2個限制酶,同時產(chǎn)生
4個黏性末端。
4.不同DNA分子用同一種限制酶切割產(chǎn)生黏性末端都一樣,同一個
DNA分子用不同限制酶產(chǎn)生黏性末端可能一樣。
避究例如1](2021?全國理綜D,5)以下表達(dá)符合基因工程概念是
()
A.B細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合,雜交瘤細(xì)胞中含有B細(xì)胞中抗體基因
B.將人干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌,獲得能產(chǎn)生人干擾
素菌株
C.用紫外線照射青霉菌,使其DNA發(fā)生改變,通過篩選獲得青霉素
高產(chǎn)菌株
D.自然界中天然存在噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌
DNA上
聽課記錄:
探究點(diǎn)二基因工程根本操作程序
1.完成基因工程根本操作流程圖:
2.完成目基因檢測與鑒定表,并加以理解、掌握:
類型步驟檢測內(nèi)容方法
分目基因是否插入受體_______________(D
第一步
子細(xì)胞染色體DNA上NA與DNA之間)
水目基因是否轉(zhuǎn)錄出_______雜交技術(shù)
第二步
平mRNA(DNA與mRNA之間)
第4頁
蛋白質(zhì)分子雜交
目基因是否翻譯出蛋
第三步(_____________雜交
白質(zhì)
法)
___水
——法或—法
平鑒定
思維拓展
1.在整個工程中,只有第三步將目基因?qū)胧荏w細(xì)胞過程中不發(fā)生
堿基互補(bǔ)配對,其他步驟均發(fā)生配對。
2.切割質(zhì)粒與目基因限制酶必須是同一種酶,以獲得一樣黏性末端,
利于基因表達(dá)載體構(gòu)建。
3.插入目基因只是構(gòu)造基因局部,其表達(dá)需要調(diào)控序列,因而用作
載體質(zhì)粒插入部位前須有啟動子,后須有終止子。
4.PCR技術(shù)與DNA復(fù)制比擬
PCR技術(shù)DNA復(fù)制
原
DNA雙鏈復(fù)制(堿基互補(bǔ)配對)
理
相
原
同四種游離脫氧核甘酸
料
點(diǎn)
條
模板、ATP、酶等
件
不解
DNA在高溫下變性解旋解旋酶催化
同旋
第5頁
點(diǎn)方
式
場
體外復(fù)制主要在細(xì)胞核內(nèi)
所
熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq細(xì)胞內(nèi)含有DNA聚
酶
酶)合酶
結(jié)在短時間內(nèi)形成大量
形成整個DNA分子
果DNA片段
豚究例如2](2021?浙江卷,6)將ada(腺甘酸脫氨酶基因)通過質(zhì)
粒pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)腺甘酸脫氨酶。以下表達(dá)錯誤是
()
A.每個大腸桿菌細(xì)胞至少含一個重組質(zhì)粒
B.每個重組質(zhì)粒至少含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點(diǎn)
C.每個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點(diǎn)至少插入一個ada
D.每個插入ada至少表達(dá)一個腺甘酸脫氨酶分子
聽課記錄:
探究點(diǎn)三基因工程應(yīng)用
完成基因工程應(yīng)用表格,了解應(yīng)用成果。
轉(zhuǎn)基因生物目基因成果舉例
植抗蟲基因:Bt毒蛋
抗蟲轉(zhuǎn)基因植抗蟲水稻、抗蟲棉、
物白基因、蛋白酶抑
物抗蟲玉米
基制劑基因、淀粉酶
第6頁
因抑制劑基因、植物
工凝集素基因
程抗——基因:病毒
外殼蛋白基因、病
抗病毒煙草、抗病
抗病轉(zhuǎn)基因植毒復(fù)制酶基因;抗
毒小麥、抗病毒番
物——基因:幾丁質(zhì)
茄、抗病毒甜椒
酶基因、抗毒素合
成基因
抗逆轉(zhuǎn)基因:滲透
抗鹽堿與抗干旱煙
抗逆轉(zhuǎn)基因植壓調(diào)節(jié)基因、抗凍
草、抗寒番茄、抗
物蛋白基因、抗除草
______大豆與玉米
劑基因
優(yōu)良性狀基因:提
高必需氨基酸含量
高_(dá)_____玉米、耐
蛋白質(zhì)編碼基因、
儲存番茄、新花色
轉(zhuǎn)基因植物控制番茄成熟基
矮牽牛
因、與花青素代謝
有關(guān)基因
動提高生長速度轉(zhuǎn)基因綿羊、轉(zhuǎn)基
基因
物轉(zhuǎn)基因動物因鯉魚
基生產(chǎn)藥物藥用蛋白基因+乳
—生物反響器
因轉(zhuǎn)基因動物腺蛋白基因啟動子
第7頁
工改善畜產(chǎn)品品質(zhì)乳汁中含乳糖較少
________基因
程轉(zhuǎn)基因動物轉(zhuǎn)基因牛
外源抗原決定基因
利用克隆技術(shù)培育
作器官移植供體表達(dá)——因子或除
沒有免疫排斥反響
轉(zhuǎn)基因動物去供體——決定基
豬器官
因
基治療______免疫缺
體外基因治療腺甘酸脫氨酶基因
因陷癥
治治療囊性纖維化病治療______囊性纖
體內(nèi)基因治療
療基因維化病
思維拓展基因治療是治療人類遺傳病根本方法,但由于尚未全面了
解基因調(diào)控機(jī)制與疾病分子機(jī)理,基因治療只處于初期臨床試驗(yàn)階段。
【探究例如3](2021?上海綜合能力測試)運(yùn)用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培養(yǎng)單細(xì)
胞“工程硅藻”,可把光合作用合成有機(jī)物以脂質(zhì)形式儲存起來???/p>
學(xué)家方案在海水中大量培養(yǎng)“工程硅藻",捕撈后從中提煉“生物柴
油"。與礦物柴油相比,使用這種“生物柴油”優(yōu)點(diǎn)是()
①可再生②不顯著增加碳排放③不排放含硫廢氣
④不會對生態(tài)環(huán)境造成負(fù)面影響
A.①②③B.①③④
C.①②④D.②③④
聽課記錄:
探究點(diǎn)四蛋白質(zhì)工程
第8頁
1.蛋白質(zhì)工程概念
蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子構(gòu)造規(guī)律及其與生物功能關(guān)系作為根
底,通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋
白質(zhì)進(jìn)展改造,或制造一種新蛋白質(zhì),以滿足人類生產(chǎn)與生活需求。
2.蛋白質(zhì)工程過程填充
蛋白質(zhì)工程過程:其根本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)一設(shè)計(jì)預(yù)期蛋
白質(zhì)-推測應(yīng)有序列一找到相對應(yīng)
序列()o其流程圖如下:
思維拓展
1.對蛋白質(zhì)工程概念應(yīng)從以下幾個方面理解
⑴蛋白質(zhì)工程根底:蛋白質(zhì)分子構(gòu)造規(guī)律及其與生物功能關(guān)系;⑵
蛋白質(zhì)工程實(shí)質(zhì):改造控制該蛋白質(zhì)合成基因;⑶蛋白質(zhì)工程產(chǎn)物:
產(chǎn)生新蛋白質(zhì),是自然界所沒有。
2.蛋白質(zhì)工程是在基因工程根底上,延伸出來第二代基因工程。因
為對現(xiàn)有蛋白質(zhì)改造或制造新蛋白質(zhì),必須通過基因修飾或基因合成
實(shí)現(xiàn)。
【探究例如4】以下關(guān)于蛋白質(zhì)工程說法正確是()
A.蛋白質(zhì)工程以基因工程為根底
B.蛋白質(zhì)工程就是酶工程延伸
C.蛋白質(zhì)工程就是用蛋白酶對蛋白質(zhì)進(jìn)展改造
D.蛋白質(zhì)工程只能生產(chǎn)天然蛋白質(zhì)
聽課記錄:
第9頁
題組一基因工程及根本操作
1.(2021?四川卷,5)北極比目魚中有抗凍基因,其編碼抗凍蛋白具
有11個氨基酸重復(fù)序列,該序列重復(fù)次數(shù)越多,抗凍能力越強(qiáng)。以
下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株過程示意圖,有關(guān)表達(dá)正確是()
A.過程①獲取目基因,可用于基因工程與比目魚基因組測序
B.將多個抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達(dá)新基因,不能得到抗凍
性增強(qiáng)抗凍
蛋白
C.過程②構(gòu)成重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因,需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)展篩
選
D.應(yīng)用DNA探針技術(shù),可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目基因存
在及其完全表達(dá)
2.以下圖為DNA分子在不同酶作用下所發(fā)生變化,圖中依次表示限
制酶、DNA聚合酶、DNA連接酶、解旋酶作用正確順序是()
A.①②③④B.①②④③C.①④②③D.①④③②
3.以下關(guān)于基因工程表達(dá),不正確是(多項(xiàng)選擇)()
A.基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因?yàn)槟炕?/p>
B.細(xì)菌質(zhì)粒是基因工程常用運(yùn)載體
C.通常用一種限制性核酸內(nèi)切酶處理含目基因DNA,用另一種處理
運(yùn)載體DNA
D.為培育成抗除草劑作物新品種,導(dǎo)入抗除草劑基因時只能以受精
卵為受體
第10頁
題組二基因工程應(yīng)用及蛋白質(zhì)工程
4.(2021?鎮(zhèn)江質(zhì)檢)科學(xué)家將干擾素基因進(jìn)展定點(diǎn)突變導(dǎo)入大
腸桿菌表達(dá),使干擾素第十七位半胱氨酸,改變成絲氨酸,結(jié)果
大大提高了B-干擾素抗病毒活性,并且提高了儲存穩(wěn)定性。該生物
技術(shù)為()
A.蛋白質(zhì)工程B.基因工程
C.基因突變D.細(xì)胞工程
5.以下關(guān)于基因工程及其應(yīng)用表達(dá)正確是()
A.假設(shè)要生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因抗病水稻,可先將目基因?qū)氪竽c桿菌中,再
轉(zhuǎn)入水稻細(xì)胞
B.用氨基酸序列推測合成目基因與原基因編碼區(qū)中外顯子一致
C.用DNA探針能檢測飲用水中重金屬物質(zhì)含量
D.作為運(yùn)載體要有多種限制酶切點(diǎn),但對一種限制酶而言,最好只
有一個切點(diǎn)
6.(2021?南師大附中學(xué)情分析)蛋白質(zhì)工程中,直接需要進(jìn)展操作
對象是()
A.氨基酸構(gòu)造B.蛋白質(zhì)空間構(gòu)造
C.肽鏈構(gòu)造D.基因構(gòu)造
7.科學(xué)家將動物體內(nèi)能夠合成胰島素基因與大腸桿菌DNA分子重
組,并且在大腸桿菌體內(nèi)表達(dá)成功。請據(jù)圖答復(fù)以下問題:
(1)圖中①DNA是以為模板,形成單鏈DNA,在酶
作用下合成雙鏈DNA,從而獲得了所需要基因。
第11頁
⑵圖中②代表是____________,在它作用下將質(zhì)粒(DNA)切
出________末端。
⑶圖中④表示將o⑤表示DNA隨大腸桿
菌繁殖而進(jìn)展________o
⑷采用蛋白質(zhì)工程可以對胰島素進(jìn)展改造,使之起效時間縮短,保證
餐后血糖頂峰與血液中胰島素頂峰一致。如果你是科研工作者,請寫
出研制速效胰島素思路。
⑸以下關(guān)于蛋白質(zhì)工程說法不正確是()
A.蛋白質(zhì)工程能將人抗體某些區(qū)段替代鼠單克隆抗體區(qū)段,降低鼠
單克隆抗體免疫原性
B.蛋白質(zhì)工程可對酶催化活性、底物專一性、抗氧化性、熱變性、
堿變性等加以改變
C.理論上通過對關(guān)鍵氨基酸置換與增刪是進(jìn)展蛋白質(zhì)工程唯一方法
D.蛋白質(zhì)工程崛起主要是工業(yè)生產(chǎn)與根底理論研究需要
題組三綜合題
8.(2021?安徽理綜,31II)家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。
將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng),可提取干擾素用于制藥。
⑴進(jìn)展轉(zhuǎn)基因操作前,需用酶短時處理幼蠶組織,以便獲得
單個細(xì)胞。
⑵為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá),需要把來自cDNA文庫干
擾素基因片段正確插入表達(dá)載體與之間。
⑶采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。該P(yáng)CR
第12頁
反響體系主要成分應(yīng)包含:擴(kuò)增緩沖液(含Mg2+)、水、4種脫氧核糖
核甘酸、模板DNA、與
⑷利用生物反響器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時,貼壁生長細(xì)胞會產(chǎn)生接觸抑制。
通常將多孔中空薄壁小玻璃珠放入反響器中,這樣可以
增加培養(yǎng)細(xì)胞數(shù)量,也有利于空氣交換。
9.干擾素是病毒侵入人體后由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生一種免疫活性物質(zhì),它
具有廣譜抗病毒作用。利用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)干擾素流程如下:
⑴過程①產(chǎn)生物質(zhì)A是_____,cDNA文庫(大于/小于)人基
因組文庫。
⑵過程④用到工具酶是,過程⑤需先用
處理受體細(xì)胞,過程⑥通常采用技術(shù)o
⑶過程⑧與⑨關(guān)鍵技術(shù)分別是_______、o
⑷基因工程核心步驟是圖中(填標(biāo)號)。
學(xué)案49基因工程
課前準(zhǔn)備區(qū)
一、基因拼接DNA重組修飾改造定向
二、L限制酶核昔酸序列核甘酸磷酸二酯鍵黏性末端平末
場上山
2.DNA片段磷酸二酯鍵3.(1)質(zhì)粒(2)①自我復(fù)制②限制酶切
割位點(diǎn)③標(biāo)記基因
三、1.⑴基因文庫(2)PCR技術(shù)(3)人工
第13頁
2.基因表達(dá)載體⑴目⑵標(biāo)記RNA聚合終止鑒別篩選
3.⑴農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化花粉管通道⑵顯微注射⑶感受態(tài)4.檢測
鑒定
課堂活動區(qū)
探究點(diǎn)一
1.按照人們愿望,進(jìn)展嚴(yán)格設(shè)計(jì),并通過體外DNA重組與轉(zhuǎn)基因等
技術(shù),賦予生物以新遺傳特性,從而創(chuàng)造出更符合人們需要新生物類
型或生物產(chǎn)品,又叫DNA重組技術(shù)。
2.核甘酸特定位點(diǎn)黏性末端復(fù)制保存多標(biāo)記目運(yùn)
載體目基因黏性磷酸二酯DNA
探究例如1B[基因工程是指按照人們愿望,進(jìn)展嚴(yán)格設(shè)計(jì),并通
過體外DNA重組與轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生物以新遺傳特性,進(jìn)而創(chuàng)
造出更符合人們需要新生物類型與生物產(chǎn)品。B細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合,
屬于細(xì)胞工程;用紫外線照射青霉菌,使其DNA發(fā)生改變,進(jìn)而篩
選出青霉素高產(chǎn)菌株,屬于人工誘變;自然界中天然存在噬菌體自行
感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上,并沒有進(jìn)展人為加工,不屬
于基因工程。]
探究點(diǎn)二
1.mRNAPCR基因組文庫cDNA文庫構(gòu)建基因表達(dá)載體
目基因
2.DNA分子雜交技術(shù)核酸分子抗原一抗體個體侵染感染
探究例如2C[大腸桿菌成功表達(dá)出腺甘酸脫氨酶,說明這些大腸
第14頁
桿菌都至少含有一個重組質(zhì)粒,A項(xiàng)正確;作為載體條件為至少含有
一個或多個酶切位點(diǎn),所以作為載體質(zhì)粒至少含有一個限制性核酸內(nèi)
切酶識別位點(diǎn),B項(xiàng)正確;作為基因表達(dá)載體應(yīng)包括目基因、啟動子、
終止子、標(biāo)記基因四局部,但并不是每個酶切位點(diǎn)都至少插入一個
ada,C項(xiàng)錯誤;由于這些目基因成功表達(dá),所以每個ada至少表達(dá)
一個腺甘酸脫氨酶分子,D項(xiàng)正確。]
探究點(diǎn)三
病毒真菌除草劑改進(jìn)品質(zhì)賴氨酸外源生長激素乳腺腸
乳糖酶調(diào)節(jié)抗原復(fù)合型遺傳性
探究例如3A
探究點(diǎn)四
2.構(gòu)造氨基酸脫氧核昔酸基因轉(zhuǎn)錄翻譯氨基酸分子
設(shè)計(jì)
探究例如4A[蛋白質(zhì)工程以基因工程為根底,又稱為第二代基因
工程。蛋白質(zhì)工程不僅能生產(chǎn)天然蛋白質(zhì),還可以定向改造控制蛋白
質(zhì)合成相應(yīng)基因中脫氧核甘酸序列或人工合成所需要自然界原本不存
在基因片段,從而合成自然界中原本不存在蛋白質(zhì)。]
構(gòu)建知識網(wǎng)絡(luò)
DNA連接酶基因表達(dá)載體檢測鑒定
課后練習(xí)區(qū)
1.B[因?yàn)橐环N氨基酸可能對應(yīng)多種密碼子、真核生物體內(nèi)基因含
有內(nèi)含子等因素,導(dǎo)致逆轉(zhuǎn)錄合成目基因與原基因有較大差異,所以
第15頁
人工合成目基因不能用于比目魚基因組測序,A選項(xiàng)錯誤;抗凍蛋白
11個氨基酸重復(fù)序列重復(fù)次數(shù)越多,抗凍能力越強(qiáng),并不是抗凍基因
編碼區(qū)重復(fù)次數(shù)越多抗凍能力越強(qiáng),抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成新
基因已不是原來抗凍基因,因此不能得到抗凍性增強(qiáng)抗凍蛋白,B選
項(xiàng)正確;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目基因?qū)胫参锛?xì)胞最常用方法,不是為
了篩選含有標(biāo)記基因質(zhì)粒,C選項(xiàng)錯誤;應(yīng)用DNA探針技術(shù),可以
檢測轉(zhuǎn)基因植物中目基因存在,但不能完成對目基因表達(dá)檢測,D選
項(xiàng)錯誤。]
2.C[限制酶可在特定位點(diǎn)對DNA分子進(jìn)展切割;DNA聚合酶在
DNA分子復(fù)制時將脫氧核甘酸連接成脫氧核甘酸鏈;DNA連接酶可
將限制酶切開磷酸二酯鍵連接在一起;解旋酶作用是將DNA雙鏈解
開螺旋,為復(fù)制或轉(zhuǎn)錄提供模板。]
3.ACD[基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因;質(zhì)粒是基因
工程常用運(yùn)載體;通常用同一種限制酶切割目基因與運(yùn)載體,以獲得
一樣黏性末端;受體細(xì)胞可以是受精卵,也可以是體細(xì)胞。]
4.A[基因工程是通過對基因操作,將符合人們需要目
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 2025年北師大版選修5歷史上冊階段測試試卷含答案
- 2025年湘師大新版七年級語文上冊階段測試試卷
- 2025年人教A版八年級生物上冊月考試卷
- 2025年浙教新版九年級生物下冊月考試卷含答案
- 二零二五美容院美容院連鎖品牌授權(quán)與區(qū)域保護(hù)合同3篇
- 二零二五版環(huán)保型建材模具研發(fā)生產(chǎn)合作合同4篇
- 二零二五年度高端嬰幼兒配方奶粉銷售代理合同3篇
- 二零二五年度黨政機(jī)關(guān)異地培訓(xùn)酒店預(yù)訂服務(wù)合同2篇
- 二零二五年民房買賣合同附屬設(shè)施租賃服務(wù)協(xié)議4篇
- 2025年度磨工職業(yè)發(fā)展規(guī)劃與勞動合同實(shí)施計(jì)劃4篇
- 2024年09月2024興業(yè)銀行總行崗測評筆試歷年參考題庫附帶答案詳解
- 山東省煙臺市招遠(yuǎn)市2024-2025學(xué)年九年級上學(xué)期期末考試英語(筆試)試題(含答案)
- 駱駝祥子讀書筆記一至二十四章
- 2025年方大萍安鋼鐵招聘筆試參考題庫含答案解析
- 2024年醫(yī)師定期考核臨床類考試題庫及答案(共500題)
- 2025年電力工程施工企業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略和經(jīng)營計(jì)劃
- 2022年公務(wù)員多省聯(lián)考《申論》真題(安徽C卷)及答案解析
- 大型活動保安培訓(xùn)
- 2024年大學(xué)本科課程教育心理學(xué)教案(全冊完整版)
- 信息系統(tǒng)運(yùn)維服務(wù)類合同6篇
- 江蘇省七市2025屆高三最后一卷物理試卷含解析
評論
0/150
提交評論