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崗位演練微孔濾膜過濾除微生物1任務(wù)三人干擾素α2b包涵體的處理查閱資料,了解微濾法應(yīng)用于濾除微生物生產(chǎn)的實(shí)例。查閱設(shè)計(jì)《微孔濾膜過濾除微生物操作記錄》,在任務(wù)實(shí)施過程中同步填寫。無菌環(huán)境下,取無菌0.22μm微孔濾器過濾除菌,培養(yǎng)濾過液,用于驗(yàn)證除菌效果。設(shè)計(jì)實(shí)操設(shè)計(jì)(一)任務(wù)描述2(二)實(shí)訓(xùn)材料1.材料、試劑2%葡萄糖溶液、肉湯蛋白胨平板、注射器、0.22μm微孔濾膜過濾器及水系濾膜(也可用市售0.22μm獨(dú)立包裝無菌濾頭,常稱為針頭濾器)、玻璃刮棒、玻璃培養(yǎng)皿等。2.儀器設(shè)備超凈工作臺(tái)、高溫濕熱滅菌器等。3(三)實(shí)訓(xùn)操作0504030201待濾溶液的制備組裝、滅菌連接壓濾無菌檢查2%葡萄糖溶液,盛裝于玻培養(yǎng)皿,常溫敞口置于室內(nèi)6h以上。0.22μm水系微孔濾膜潤(rùn)濕后裝入過濾器。0.11MPa,121.5℃與其他器具滅菌20min后待用。吸取待濾溶液約1.5mL,將不加裝針頭的注射器連接于滅菌微孔濾膜過濾器入口。將待濾溶液均勻加壓,過濾至無菌的潔凈空平板中。避免壓破濾膜或注射器與過濾器斷開。吸取除菌濾液0.1mL,于肉湯蛋白胨平板涂布均勻,37℃,24h。4(三)實(shí)訓(xùn)操作0706清洗清場(chǎng)
檢查、整理各項(xiàng)記錄。規(guī)范地存放生產(chǎn)用試劑,清洗器具,維護(hù)設(shè)備,處置廢物和廢液,清潔、消毒工作臺(tái)和潔凈室。最后,填寫清場(chǎng)合格證。棄去塑料濾器上的微孔濾膜,將塑料濾器清洗干凈,備用。清洗操作所用器具,以75%乙醇溶液擦拭操作臺(tái)面。5(四)任務(wù)分析與總結(jié)(1)該任務(wù)中運(yùn)用了哪種膜分離技術(shù),生產(chǎn)中還有哪些常用的膜分離技術(shù),請(qǐng)簡(jiǎn)述各種膜分離技術(shù)的特點(diǎn)及應(yīng)用。(2)為什么整個(gè)操作過程,都需要在無菌條件下,還要嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作?為什么要做陰性對(duì)照和陽性對(duì)照?(3)該任務(wù)中所使用微孔濾膜過濾器的過濾體積有限,無法用于生產(chǎn)。在藥物生產(chǎn)中采用什么樣的微濾設(shè)備與裝置,如何驗(yàn)證微濾效果。(4)選擇題。如以膜分離技術(shù)對(duì)發(fā)酵液中固形物、溶質(zhì)和溶劑進(jìn)行分離,先后采用以下各種膜分離技術(shù),所能截留的物質(zhì)有:微濾截留(
),超濾截留(
),納濾截留(
),反滲透截留(
)。A.溶解性物質(zhì)C.單糖、氨基酸等可溶性有機(jī)小分子物質(zhì)B.微粒、細(xì)菌D
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