止咳化痰顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

止咳化痰顆粒院內(nèi)制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究【摘要】目的：對止咳化痰顆粒進(jìn)行研究分析，建立其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法：本文使用薄層鑒別法，建立了止咳化痰顆粒中組成G、組成J、組成F和組成I共4種味藥的鑒別方法，并確定其色譜條件及其供試品的處理方法。其次，使用高效液相色譜法，建立了止咳化痰顆粒中甘草酸的含量測定方法，并進(jìn)行方法學(xué)考察。結(jié)果：從薄層鑒別結(jié)果可得，組成G、組成J、組成F和組成I的供試品色譜上，與相應(yīng)的對照品和對照藥材色譜中對應(yīng)位置上顯相同顏色或熒光的斑點(diǎn)，陰性對照均無干擾，專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性良好。含量測定中，3批止咳化痰顆粒的甘草酸的平均含量為1.09%，結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)初步建立了止咳化痰顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為本制劑的質(zhì)量控制與標(biāo)準(zhǔn)的建立提供科學(xué)可控的依據(jù)。【關(guān)鍵詞】止咳化痰顆粒；薄層色譜法；高效液相色譜法；含量測定；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)Studyonthequalitystandardofin-hospitalpreparationofcoughandphlegmreliefgranules[Abstract]Objective:Researchandanalysisofcoughandphlegmgranulestoestablishtheirqualitystandards.Methods:Firstly,athin-layeridentificationmethodwasestablishedforthefourflavorsofcompositionG,compositionJ,compositionFandcompositionIincoughandphlegmpellets,andtheirchromatographicconditionsweredeterminedwiththetreatmentmethodoftheirtestsamples.Secondly,themethodwasappliedtoestablishthedeterminationofglycyrrhetinicacidincoughandphlegmgranulesbyHPLC,andthemethodologicalinvestigationwascarriedout.Results:Fromtheresultsofthin-layeridentification,itwasobservedthatthechromatogramsofthetestsamplesofcompositionG,compositionJ,compositionFandcompositionIshowedspotsofthesamecolororfluorescenceatthecorrespondingtargetspotpositionsinthechromatogramsofthecorrespondingcontrolsandcontrolherbs,andthenegativecontrolswereallfreefrominterference,strongspecificityandgoodreproducibility.Inthecontentdetermination,theaveragecontentofglycyrrhetinicacidofthethreebatchesofcoughandphlegmgranulesgranuleswas1.09%,whichwashigherthantheminimumlimitofglycyrrhizicacidinthe2020versionofChinesePharmacopoeia.Conclusion:Thisexperimentestablishedaqualitystandardforcoughandphlegmgranules,whichprovidesascientificandcontrollablebasisforthequalitycontrolandestablishmentofstandardsforthispreparation.[Keywords]CoughandphlegmreliefgranulesThinlayerchromatog-raphyContentdeterminationQualitystandard目錄TOC\o"1-3"\h\u1前言 實(shí)驗(yàn)研究本課題以廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院治療止咳化痰的顆粒制劑作為研究對象，該顆粒處方是以臨床經(jīng)驗(yàn)方為基礎(chǔ)的。對止咳化痰顆粒進(jìn)行定性和定量的研究，制定科學(xué)可靠的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，使其能夠更好地符合用藥安全要求，并更好地應(yīng)用于治療疾病。本文將建立止咳化痰顆粒的薄層鑒別法以及含量測定法。2.1實(shí)驗(yàn)儀器與試劑2.1.1實(shí)驗(yàn)儀器本次實(shí)驗(yàn)所使用的實(shí)驗(yàn)儀器見表1。表SEQ表\*ARABIC1實(shí)驗(yàn)儀器名稱廠家Goodsee-Ⅱ型暗箱式薄層色譜攝影儀上海科哲生化科技有限公司DT600A型電子天平江蘇省常熟市意歐儀器儀表有限公司GZX-9140MB型電熱鼓風(fēng)干燥箱上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠KQ3200B型超聲波清洗器昆山市超聲儀器有限公司103B手提式高速粉碎機(jī)瑞安市永歷制藥機(jī)械有限公司HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋常州澳華儀器有限公司HH-S6恒溫水浴鍋鞏義市予華儀器有限公司KQ3200B型超聲波清洗器昆山市超聲儀器有限公司U3000型高效液相色譜儀賽默飛世爾科技公司BSA224S型分析天平賽多利斯科學(xué)儀器有限公司2.1.2實(shí)驗(yàn)試劑本次實(shí)驗(yàn)所使用的實(shí)驗(yàn)試劑見表2。表SEQ表\*ARABIC2實(shí)驗(yàn)試劑名稱純度廠家甲醇分析純天津市津東天正精細(xì)化學(xué)試劑廠乙醇分析純天津市富宇精細(xì)化工有限公司乙酸乙酯分析純天津市富宇精細(xì)化工有限公司石油醚分析純天津市津東天正精細(xì)化學(xué)試劑廠甲酸分析純天津市富宇精細(xì)化工有限公司氨水分析純天津市大茂化學(xué)試劑廠磷酸色譜純天津市富宇精細(xì)化工有限公司乙腈色譜純OCEANPAK2.2實(shí)驗(yàn)原料止咳化痰顆粒（批號：2021112901、2021112902、2021112903）。薄層鑒別使用的對照藥材見表3。表SEQ表\*ARABIC3對照藥材及批號對照藥材批號廠家組成G121046-201607中國食品藥品檢定研究院組成J120904-202021中國食品藥品檢定研究院組成F121124-201608中國食品藥品檢定研究院組成I121123-201806中國食品藥品檢定研究院甘草酸銨對照品（批號110731-202021，純度96.2%），采購于中國食品藥品檢定研究院。2.3薄層鑒別方法及結(jié)果2.3.1組成G供試品溶液的制備：取止咳化痰顆粒5.00g，放入具塞錐形瓶中，加入30mL甲醇，進(jìn)行30分鐘的超聲處理，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0mL使溶解，再加入氨水，將pH值調(diào)整到11~12。用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20mL，將乙酸乙酯液合并，蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液。對照藥材溶液的制備：取組成G的對照藥材1.00g，同組成G供試品制備方法制成對照藥材溶液。陰性對照溶液的制備：按處方劑量，稱取除組成G以外的原料藥，按止咳化痰顆粒的制備工藝進(jìn)行制備。取缺組成G陰性樣品5.00g，同組成G供試品制備方法制成缺組成G陰性對照溶液。鑒定法：吸取上述組成G的供試品溶液5μL、對照藥材溶液2μL、陰性對照溶液5μL，分別點(diǎn)于同一個(gè)硅膠G薄層板上，使用石油醚－乙酸乙酯－甲酸（4:2:0.1）作為展開劑，展開并取出，晾干后置于紫外光燈（365nm）下進(jìn)行檢視。在供試品色譜中，與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，呈現(xiàn)出相同顏色的斑點(diǎn)，且陰性對照無干擾（見圖1）。20211129012.20211129023.20211129034~5.對照藥材6~7.陰性對照圖1止咳化痰顆粒中組成G的薄層鑒別圖譜展開環(huán)境的耐用性考察①不同展開溫度的考察：按2.3.1（4）項(xiàng)的鑒別法，分別置于4℃、25℃和40℃的溫度條件下展開，結(jié)果顯示，不同的展開溫度對組成G的薄層鑒別無明顯影響（見圖2）。（a）（b）（c）20211129012.20211129023.20211129033.止咳化痰顆粒C4~5.對照藥材6~7.陰性對照(a)4℃(b)25℃(c)40℃圖2止咳化痰顆粒中組成G的薄層鑒別圖譜②不同相對濕度的考察：按2.3.1（4）項(xiàng)的鑒別法，于室溫（25℃）下，在不同的相對濕度（18%、32%、58%、72%）環(huán)境下，展開，結(jié)果顯示，不同相對濕度對組成G薄層鑒別無明顯影響（見圖3）。

（a）（b）（c）（d）20211129012.20211129023.20211129034~5.對照藥材6~7.陰性對照(a)18%(b)32%(c)58(d)72%圖3止咳化痰顆粒中組成G的薄層鑒別圖譜2.3.2組成J供試品溶液的制備：取止咳化痰顆粒5.00g，放入具塞錐形瓶中，加入30mL甲醇，進(jìn)行30分鐘的超聲處理，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0mL使溶解，再加入氨水，將pH值調(diào)整到11~12，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20mL，將乙酸乙酯液合并蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液。對照藥材溶液的制備：取組成J的對照藥材1.00g，同組成J供試品制備方法制成對照藥材溶液。陰性對照溶液的制備：按處方劑量，稱取除組成J以外的原料藥，按止咳化痰顆粒的制備工藝進(jìn)行制備。取缺組成J陰性樣品5.00g，同組成J供試品制備方法制成缺組成J陰性對照溶液鑒定法：吸取上述組成J的供試品溶液5μL、對照藥材溶液2μL、陰性對照溶液5μL，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板，以石油醚－乙酸乙酯－甲酸（4:2:0.1）為展開劑，展開并取出，晾干后置紫外光燈（365nm）下進(jìn)行檢視。在供試品色譜中，與對照藥材色譜相對應(yīng)的位置上，呈現(xiàn)出相同顏色的斑點(diǎn)，且陰性對照無干擾（見圖4）。

20211129012.20211129023.20211129034~5.對照藥材6~7.陰性對照圖4止咳化痰顆粒中組成J的薄層鑒別圖譜展開環(huán)境的耐用性考察①不同溫度的考察：按2.3.2（4）項(xiàng)的鑒別法，分別置于4℃、25℃和40℃條件下展開，結(jié)果顯示，不同的展開溫度對組成J的薄層鑒別無明顯影響（見圖5）。（a）（b）（c）20211129012.20211129023.20211129033.止咳化痰顆粒C4~5.對照藥材6~7.陰性對照(a)4℃(b)25℃(c)40℃圖5止咳化痰顆粒中組成J的薄層鑒別圖譜②不同相對濕度的考察：按2.3.2（4）項(xiàng)的鑒別法，于室溫（25℃）下，在不同的相對濕度（18%、32%、58%、72%）環(huán)境下，展開，結(jié)果顯示，不同相對濕度對組成J薄層鑒別無明顯影響（見圖6）。

（a）（b）（c）（d）20211129012.20211129023.20211129034~5.對照藥材6~7.陰性對照(a)18%(b)32%(c)58%(d)72%圖6止咳化痰顆粒中組成J的薄層鑒別圖譜2.3.3組成F和組成I供試品溶液的制備：取止咳化痰顆粒5.00g，放入具塞錐形瓶中，加入乙醇30mL，超聲處理30min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液。對照藥材溶液的制備：取組成F和組成I的對照藥材1.00g，分別按組成F和組成I供試品制備方法法制成對照藥材溶液。陰性對照溶液的制備：按處方劑量，稱取除組成F和組成I以外的原料藥，按止咳化痰顆粒的制備工藝進(jìn)行制備。取缺組成F和組成I的陰性樣品5.00g，按組成F和組成I供試品制備方法制成缺組成F和組成I的陰性對照溶液。鑒定法：吸取上述組成F和組成I的供試品溶液2μL、組成F的對照藥材溶液5μL、組成I的對照藥材溶液2μL、陰性對照溶液5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚－乙酸乙酯－甲酸（5:2.5:0.1）作為展開劑，展開并取出，晾干后置紫外光燈（365nm）下進(jìn)行檢視。在供試品色譜中，與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，呈現(xiàn)出了相同顏色的斑點(diǎn)，且陰性對照無干擾（見圖7）。

20211129012.20211129023.20211129034~5.組成F對照藥材6~7.組成I對照藥材8~9.缺組成F和組成I陰性對照圖7止咳化痰顆粒中組成F和組成I的薄層鑒別圖譜展開環(huán)境的耐用性考察①不同溫度的考察：按2.3.3（4）項(xiàng)的鑒別法，分別置于溫度為4℃、25℃和40℃條件下展開，結(jié)果顯示，不同的展開溫度對組成F和組成I的薄層鑒別無明顯影響（見圖8）。（a）（b）（c）20211129012.20211129023.20211129034~5.組成F對照藥材6~7.組成I對照藥材8~9.缺組成F和組成I陰性對照(a)4℃(b)25℃(c)40℃圖8止咳化痰顆粒中組成F和組成I的薄層鑒別圖譜②不同相對濕度的考察：按2.3.3（4）項(xiàng)的鑒別法，于室溫（25℃）下，在不同的相對濕度（18%、32%、58%、72%）環(huán)境下，展開，結(jié)果顯示，不同相對濕度對組成F和組成I的薄層鑒別無明顯影響（見圖9）。

（a）（b）（c）（d）20211129012.20211129023.20211129034~5.組成F對照藥材6~7.組成I對照藥材8~9.缺組成F和組成I陰性對照(a)18%(b)32%(c)58%(d)72%圖9止咳化痰顆粒中組成F和組成I的薄層鑒別圖譜2.3.4小結(jié)本實(shí)驗(yàn)考查了止咳化痰顆粒中組成G、組成J、組成F和組成I的薄層鑒別方法，從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可得，止咳化痰顆粒中上述組成藥味的薄層鑒別呈現(xiàn)出清晰的特征斑點(diǎn)，方法具有較強(qiáng)的專屬性和良好的重現(xiàn)性，且陰性對照均無干擾，而在不同溫度、濕度條件下展開，鑒別的結(jié)果均無明顯影響，適宜作為本顆粒劑的定性質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。2.4含量測定的方法及結(jié)果2.4.1色譜條件色譜柱：PhenomenonLuna-C18(2)100A4.6mm×250mm，5μm；流動(dòng)相：乙腈（A）-0.05%磷酸溶液，洗脫程序：0~25min：35%～47%A。流速為1mL/min，柱溫25℃，檢測波長為237nm。對照品溶液進(jìn)樣量為10ul，供試品為20ul。2.4.2溶液的配制（1）對照品溶液的制備取甘草酸銨對照品適量，精密稱定，加70%乙醇制成0.13mg/mL的溶液，即得。（2）供試品溶液的制備取本品顆粒2g，精密稱定并置于具塞錐形瓶中，加入50%甲醇25mL，稱重，超聲處理30min，取出后稱重，以50%甲醇補(bǔ)足重量，濾過，取續(xù)濾液，即得。2.4.3方法學(xué)考察（1）專屬性試驗(yàn)精密吸取空白溶液、標(biāo)準(zhǔn)品溶液各10μL，供試品溶液、陰性對照溶液各20μL，分別注入高效液相色譜儀，按2.4.1項(xiàng)的色譜條件進(jìn)行測定，結(jié)果表明，陰性對照無干擾（見圖10）。1.甘草酸A.標(biāo)準(zhǔn)品溶液B.供試品溶液C.陰性對照液D.空白溶液圖10止咳化痰顆粒的專屬性考察HPLC圖（2）線性范圍考察分別精密吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液1、3、5、7、10、15μL，依次注入高效液相色譜儀，按2.4.1項(xiàng)的色譜條件進(jìn)行測定。以標(biāo)準(zhǔn)品溶液的進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，所對應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（見圖11）。線性回歸方程為：y=7.8304x-0.0287，r=0.9999。結(jié)果表明，甘草酸的進(jìn)樣量在0.13～1.95μg范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。圖11標(biāo)準(zhǔn)曲線（3）精密度試驗(yàn)精密吸取對照品溶液10μL，按照2.4.1項(xiàng)的色譜條件，重復(fù)測定對照品樣本6次，計(jì)算峰面積RSD=0.56%，表明實(shí)驗(yàn)儀器的精密度良好（見表4）。表SEQ表\*ARABIC4精密度試驗(yàn)的測定結(jié)果樣品編號進(jìn)樣量（μL）峰面積（mAU*min）平均峰面積(mAU*min)RSD%1109.4569.4390.562109.4363109.5224109.3575109.4276109.438（4）穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取同一批次的供試品溶液20μL，在靜置0、3、6、9、12、24h時(shí)，按2.4.1項(xiàng)的色譜條件進(jìn)樣分析，計(jì)算甘草酸含量RSD=1.27%，說明樣品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定性良好（見表5）。表SEQ表\*ARABIC5穩(wěn)定性試驗(yàn)的測定結(jié)果樣品編號峰面積（mAU*min）含量（mg/g）平均含量（mg/g）RSD%112.1271.031.021.28212.0191.02312.1311.03411.8521.01511.9751.02611.7471.00（5）重復(fù)性試驗(yàn)精密稱取同一個(gè)批次的樣品6份，每份2g，按2.4.2項(xiàng)下供試品制備方法制備溶液，精密吸取供試品溶液20μL，按照2.4.1項(xiàng)的色譜條件進(jìn)行測定，計(jì)算甘草酸含量RSD=0.7%，表明實(shí)驗(yàn)方法重復(fù)性良好（見表6）。表SEQ表\*ARABIC6重復(fù)性試驗(yàn)的測定結(jié)果樣品號取樣量（g）峰面積（mAU*min)含量（mg/g）平均含量（mg/g）RSD%12.002112.1201.031.020.722.003213.0591.0232.001513.1001.0342.001913.0671.0252.000413.2271.0462.000112.9461.01（6）加樣回收試驗(yàn)稱取止咳化痰顆粒粉末6份，每份1g，分別加入標(biāo)準(zhǔn)液適量，按2.4.2項(xiàng)下供試品制備方法制備，依次連續(xù)注入高效液相色譜儀中，按2.4.1項(xiàng)的色譜條件進(jìn)行測定，結(jié)果計(jì)算甘草酸的平均加樣回收率為97.54%，RSD=3.18%，平均回收率在95.0%～100.0%內(nèi)，表明實(shí)驗(yàn)方法的準(zhǔn)確性良好（見表7）。表SEQ表\*ARABIC7加樣回收試驗(yàn)的測定結(jié)果樣品號峰面積（mAU*min）樣品量（mg）加入量（mg）測定值（mg）回收率（%）平均回收率（%）RSD%112.6281.080.9101.9898.8497.543.18212.4741.080.9101.9696.20312.6811.080.9101.9999.75412.2311.080.9101.9292.02512.7271.080.9101.99100.54612.5721.080.9101.9797.882.4.4樣品含量測定精密吸取供試品溶液20μL，注入高效液相色譜儀，按2.4.1項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)樣測定，計(jì)算樣品中甘草酸的含量（見表8）。表SEQ表\*ARABIC8止咳化痰感顆粒樣品中甘草酸的含量測定結(jié)果批號取樣量（g）峰面積（mAU*min）含量（mg/g）平均含量（mg/g）RSD%20211129012.001813.7141.071.080.722.002713.9161.092.000613.7681.0820211129022.001015.5791.221.252.922.001316.4771.292.002415.8141.2420211129032.000111.9440.940.952.301.992711.9240.941.990612.3800.972.4.5小結(jié)由上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果可得，3批止咳化痰顆粒中，甘草酸的含量均值為1.09mg/g，每袋的凈含量以15g計(jì)，則甘草酸含量為16.35mg/袋。2020版《中國藥典》對甘草酸的最低含量限度規(guī)定為不少于2.0%，按處方量投料，以60%的轉(zhuǎn)移率計(jì)算，得樣品的甘草酸含量不得少于9.81mg/袋。因此，實(shí)驗(yàn)中測得的含量均值16.35mg/袋符合要求，且該指標(biāo)成分含量較高，穩(wěn)定性好，適宜作為該止咳化痰顆粒院內(nèi)制劑的含量測定質(zhì)控指標(biāo)。

3結(jié)論與討論3.1薄層鑒別本實(shí)驗(yàn)對止咳化痰顆粒的薄層鑒別方法進(jìn)行研究，確定考察指標(biāo)，從提取條件、展開劑類型及配比的方面進(jìn)行選擇和優(yōu)化，通過方法學(xué)考察最終建立專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好、陰性對照均無干擾的薄層色譜條件與其供試品處理方法。在止咳化痰顆粒的10味處方藥材中，組成G、組成J、組成F和組成I的考察結(jié)果較為理想，供試品色譜中與對照藥材色譜相對應(yīng)的位置上，顯相同顏色的清晰的斑點(diǎn)，且該斑點(diǎn)位置陰性對照無干擾，專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性良好，適合作為本顆粒制劑的薄層鑒別質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。本次薄層鑒別的研究，使用的是各組成所對應(yīng)的對照藥材作為定性參考依據(jù)，但并未選擇藥典的提取方法以及薄層鑒別條件。由于顆粒處方的復(fù)雜性以及制備工藝的影響，藥典上多為單味藥的鑒別方法，對復(fù)方顆粒的成分鑒別有一定難度，實(shí)驗(yàn)中使用藥典提取方法制備的供試品展開后的清晰斑點(diǎn)較少，不利于質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)的研究。比如組成G，藥典上主要檢測的是揮發(fā)油成分，而本顆粒制備工藝為水提法，揮發(fā)油成分難以檢測，因此沒有選用藥典的鑒別方法。組成J以藥典的展開劑展開時(shí)，相較最終選擇的展開劑系統(tǒng)，斑點(diǎn)拖尾較明顯，且斑點(diǎn)主要集中在溶劑前沿處。組成F藥典中使用的是聚酰胺薄膜，但實(shí)驗(yàn)室中只有硅膠G薄層板，因此沒使用藥典上的方法進(jìn)行鑒別。最終各組成的薄層鑒別方法，是在參考藥典的方法的基礎(chǔ)上，再根據(jù)其他文獻(xiàn)資料進(jìn)行調(diào)整和優(yōu)化后，根據(jù)供試品與對照藥材相對應(yīng)的斑點(diǎn)以及陰性對照缺少的斑點(diǎn)所建立的。在對組成G的薄層鑒別研究中，發(fā)現(xiàn)在該展開劑系統(tǒng)的條件下，供試品與對照藥材色譜中，有2陰性對照均無干擾的顏色相同的斑點(diǎn)，但在使用另一個(gè)展開劑系統(tǒng)后，其中一個(gè)位置的斑點(diǎn)并沒有顯現(xiàn)出來，后期應(yīng)對組成G薄層色譜圖中顯現(xiàn)的各斑點(diǎn)具體代表什么成分進(jìn)行深入研究，優(yōu)化色譜條件，建立更準(zhǔn)確的鑒別方法。此外，在本次薄層鑒別的研究中，有使用自制的薄層板以及在外購入的薄層板，發(fā)現(xiàn)在同一展開劑條件下，使用在外購入的薄層板對結(jié)果觀察會(huì)更清晰可靠，而使用自制的薄層板點(diǎn)樣展開后，與使用購買的薄層板相比，相鄰斑點(diǎn)間的分離度較差，拖尾現(xiàn)象較為明顯，對目標(biāo)斑點(diǎn)的觀察有一定的干擾。除了上述提及的4種組成外，在對其余組成進(jìn)行薄層鑒別的條件摸索過程中，因提取方法不適宜或展開劑系統(tǒng)不合適，尚未找到目標(biāo)斑點(diǎn)圓潤清晰的薄層色譜條件以及供試品處理方法。例如從組成A、組成B、組成C和組成E的薄層鑒別結(jié)果中發(fā)現(xiàn)，均出現(xiàn)了特征斑點(diǎn)顯色不明顯的現(xiàn)象，組成H的對照藥材色譜則未呈現(xiàn)出明顯的斑點(diǎn)，上述情況可能與未找到合適的顯色方式或提取方法有關(guān)。后續(xù)對組成E的顯色方式進(jìn)行了考察，但所選擇的顯色劑均無法成功辨別該成分的特征斑點(diǎn)，可能是所選擇的顯色劑并不適用于所提取出的組成E的特征的物質(zhì)的鑒別。在對組成D的薄層鑒別中發(fā)現(xiàn)，本次實(shí)驗(yàn)中選擇的展開方式下，斑點(diǎn)拖尾較為嚴(yán)重，且陰性對照出現(xiàn)了干擾，可能是分離度太小以致斑點(diǎn)重合。由于時(shí)間關(guān)系，均未對上述猜想進(jìn)行進(jìn)一步驗(yàn)證，因此后期應(yīng)繼續(xù)對這些組成進(jìn)行研究，可從展開劑系統(tǒng)、顯色方式以及提取方式進(jìn)行進(jìn)一步考察，完善止咳化痰顆粒的薄層鑒別質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。3.2含量測定止咳化痰顆粒中甘草酸的含量測定使用的是高效液相色譜法，對其方法學(xué)研究是從樣品的專屬性、線性范圍、精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性和加樣回收率等多個(gè)方面進(jìn)行的。2020版《中國藥典》對甘草酸的最低含量限度規(guī)定為不少于2.0%，按處方量投料，以60%的轉(zhuǎn)移率計(jì)算，得樣品的指標(biāo)成分含量不得少于9.81mg/袋。本次實(shí)驗(yàn)的3批小試止咳化痰顆粒中甘草酸的含量均值為16.35mg/袋，符合要求。從結(jié)果可得，該指標(biāo)成分含量較高，穩(wěn)定性好，適宜作為止咳化痰顆粒院內(nèi)制劑的含量測定質(zhì)控指標(biāo)。此外，葦莖雖為止咳化痰顆粒的君藥，但因其在藥典中未收錄，沒有對其含量測定的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，且暫未找到其對照品，因此并未選其作為此次含量測定的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)研究。3.3總結(jié)目前對于止咳化痰顆粒醫(yī)院制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究，在薄層鑒別研究中，初步建立了組成G、組成J、組成F和組成I的薄層鑒別方法，方法的專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好，且陰性對照均無干擾，適合作為本制劑定性鑒別方法。在含量測定研究中，建立了止咳化痰顆粒中甘草酸的含量測定方法，從3批小試止咳化痰顆粒中甘草酸的含量測定結(jié)果分析可知，小試止咳化痰顆粒中該成分含量高，穩(wěn)定性好，適宜作為止咳化痰顆粒中的成分定量分析。本文研究了止咳化痰顆粒醫(yī)院制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為其在臨床的應(yīng)用上提供了科學(xué)可行的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。該研究方法具有準(zhǔn)確性、高效性，結(jié)果重現(xiàn)性好、穩(wěn)定性高，同時(shí)所需的分析時(shí)間較短，從而顯著提高了實(shí)驗(yàn)的效率，減少了實(shí)驗(yàn)試劑等的消耗，為進(jìn)一步完善止咳化痰顆粒醫(yī)院制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)奠定了基礎(chǔ)。目前中試顆粒還未安排生產(chǎn)，故本文只是利用小試顆粒進(jìn)行初步研究，并不具有全面性和絕對的可靠性。后續(xù)會(huì)繼續(xù)利用中試顆粒加以驗(yàn)證，并按藥典顆粒劑項(xiàng)下的各項(xiàng)指標(biāo)要求進(jìn)行全面研究，以累積更為穩(wěn)定、可靠的數(shù)據(jù)，建立更具代表性的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，從而為止咳化痰顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供更科學(xué)可靠的依據(jù)。參考文獻(xiàn)李婧辰.我國40歲及以上人群咳嗽、咳痰現(xiàn)況及影響因素研究[D].中國疾病預(yù)防控制中心，2017.國家食品藥品監(jiān)督管理局．醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑注冊管理辦法（試行）[S].2005.胡曉陽，田宇詩，穆濱，等.中醫(yī)藥治療慢性咳嗽的研究進(jìn)展[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2021，49(05):111-116.劉柏勝.關(guān)于咳嗽的中醫(yī)藥辨治的體會(huì)[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2011，30(20):16.陳凱，梁翠菲.咳嗽的全科診斷策略[J].中國全科醫(yī)學(xué)，2021，24(13):1707-1710+1716.X.-Y.Hu,R.-Y.Xia,MichaelMoore,etal.UseofantibioticsandothertreatmentsinChineseadultswithacutecough:Anonlinesurvey[J].IntegrativeMedicineResearch,2023,12(1):100920.W.-R.Jiang,J.-X.Qi,X.Li,etal.Post-infectiouscoughofdifferentsyndromestreatedbytraditionalChinesemedicines:Areview[J].ChineseHerbalMedicines,2022,14(04):494-510.劉露露，曹文富，程序，等.慢性咳嗽中醫(yī)治療研究進(jìn)展綜述[J].實(shí)用中醫(yī)藥雜志，2022，38(11):2031-2033.張曉娜，葉放，陳瀟穎.國醫(yī)大師周仲瑛基于中醫(yī)學(xué)“整體觀”思想辨治慢性咳嗽經(jīng)驗(yàn)[J].中國中醫(yī)藥信息雜志，2023:1-4.任桂梅，張華.咳嗽痰多用藥之巧[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，1998(06):33.余剛，李昌崇，張海鄰.慢性咳嗽對生活質(zhì)量的影響[J].中華哮喘雜志（電子版），2009，3(01):71-75.程秀琴.止咳、化痰藥物用藥調(diào)查與分析[J].中國藥業(yè)，1997(10):46.張英姿.急性上呼吸道感染咳嗽合理用藥治療效果分析[J].中國社區(qū)醫(yī)師，2021，37(11):67-68.劉國君，牛麗穎，王鑫國.金麻杏片化痰止咳平喘作用研究[J].河北中醫(yī)，2012，34(07):1068-1070.邱美玲.千金葦莖湯合桑白皮湯對慢性阻塞性肺疾病急性加重期（痰熱壅肺證）的臨床療效觀察及對降鈣素原的影響[D].黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，2022.高浩學(xué)，丁安偉，唐于平，等.葦莖的化學(xué)成分、藥理作用與臨床應(yīng)用研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐，2009，23(03):75-78.關(guān)建新，伊明洋，李海霞，等.千金葦莖湯治療呼吸系統(tǒng)疾病的相關(guān)研究進(jìn)展[J/OL].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2023:1-16.霍文杰，丁青，劉曉霞，等.基于差向異構(gòu)體分離的桃仁配方顆粒中苦杏仁苷含量測定[J].中國現(xiàn)代中藥，2020，22(12):2090-2093.張妍妍，韋建華，盧澄生，等.桃仁化學(xué)成分、藥理作用及質(zhì)量標(biāo)志物的預(yù)測分析[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2022，40(01):234-241.李曉凱，顧坤，梁慕文，等.薏苡仁化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].中草藥，2020，51(21):5645-5657.X.-J.Gong,Y.-R.Bao,Y.-P.Diao,etal,AdlayseedinhibitsgrowthofH22allografts,HepG2andSMMC-7721humanhepatomacellsinvitroandinvivo[J].AsianJournalofChemistry,2012,24(2):128.鞏曉杰，滕建業(yè).藥食兩用中藥薏苡仁研究進(jìn)展[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2013，9(08):74-75.劉靜，劉向國，李國強(qiáng)，等.冬瓜子飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中藥材，2012，35(12):1939-19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