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1塑料和其他無(wú)孔材料表面抗菌活性的測(cè)定本文件規(guī)定了經(jīng)抗菌處理的塑料材料和其他無(wú)孔產(chǎn)品(包本文件不涉及光催化材料及制品(ISO274測(cè)試結(jié)果應(yīng)包括對(duì)本文件的引用和試驗(yàn)條件。利用本文件所測(cè)試的結(jié)果是在本文件規(guī)定的試驗(yàn)條進(jìn)行抗菌試驗(yàn)需要最小劑量的抗菌劑(化學(xué)品)溶入到接種菌液中。ISO7218食品和動(dòng)物飼料的微生物學(xué)微生物檢驗(yàn)通則(Microbiologyoffoodandanimalfeedingstuffs—Generalrequirementsandguidanceformi3.1下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。材料或制品表面抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的功能或抗菌劑抑制材料或制品表面細(xì)菌繁殖的效果。3.2抗菌劑(antibacterialagent)通過(guò)表面抗菌處理或添加到材料或制品而抑制細(xì)菌在其表面生長(zhǎng)的23.3抗菌活性值(antibacterialactivity)3.4經(jīng)過(guò)抗菌處理后的制品和未經(jīng)抗菌處理后的制品在接種細(xì)菌培養(yǎng)后,得到的活菌數(shù)的對(duì)數(shù)的差抗菌效果(antibacterialeffectiv4.1試驗(yàn)細(xì)菌b)大腸桿菌(Escherichiacoli)a中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心(CGMCC)是WFCC成員,與金黃色葡萄球菌ATCC6538P等同的國(guó)內(nèi)菌株號(hào)為CGMCC1.2910,與大腸桿菌ATCC4.2試劑、培養(yǎng)基與溶液4.2.1非離子表面活性劑非離子表面活性劑為聚氧乙烯山梨醇酐單油酸酯4.2.2生物材料3——卵磷脂;——D-葡萄糖;——酵母膏;——牛肉膏(見附錄A);——蛋白胨(見附錄A);——酪蛋白胨;——大豆蛋白胨;——胰蛋白胨。4.2.3培養(yǎng)基通則應(yīng)用下列專用培養(yǎng)基。如采用商品培養(yǎng)基,應(yīng)按照制造商的說(shuō)明書1/500營(yíng)養(yǎng)肉湯營(yíng)養(yǎng)瓊脂在電爐上或浸入沸水水浴鍋中加熱攪拌,直至瓊脂溶解。用氫氧化鈉溶液或鹽酸將pH值調(diào)整在6.8~平板計(jì)數(shù)瓊脂斜面培養(yǎng)基卵磷脂吐溫大豆酪蛋白培養(yǎng)液(SCD4磷酸鹽緩沖液將34.0g磷酸二氫鉀放入1000ml容量瓶中,磷酸鹽緩沖生理鹽水5.1干熱滅菌器:溫度保持在(160~180)℃,溫度波動(dòng)不超過(guò)±2℃。5.2高壓蒸汽滅菌鍋:溫度保持在121℃±2℃,壓力保持在103kPa±5kPa。5.3帶攪拌的加熱電爐或水浴鍋。5.5天平:精度±0.01g。5.8漩渦攪拌器。5.9超聲波清洗器。55.13培養(yǎng)皿:直徑90mm~100mm,滅菌后使用。5.14紗布或脫脂棉。5.16制備培養(yǎng)基所需要的加塞錐形瓶或培養(yǎng)基瓶。6.1干熱滅菌6.3玻璃器皿的準(zhǔn)備6.4菌種的保藏7.1細(xì)菌預(yù)培養(yǎng)7.2試樣的制備6制備抗菌處理和未經(jīng)抗菌處理的試樣,試樣尺寸為(50±2)mm×(50±2)mm,試樣厚度不超7.3接種液的準(zhǔn)備7.4試樣接種77.5接種試樣的培養(yǎng)的抗菌效果。在相關(guān)方同意的條件下,也可采用其他培養(yǎng)溫度。如使用的不是(35±1)℃7.6試樣上的細(xì)菌回收87.7平板培養(yǎng)法測(cè)定活菌數(shù)N=(1000×C×D×Ⅴ)/A 8.2試驗(yàn)有效的條件8.2.2未經(jīng)抗菌處理試樣接種后立即測(cè)得的細(xì)菌數(shù)的對(duì)數(shù)值應(yīng)該滿足式(2)要求:9(Lmax?Lmin)/(Lmean)≤0.2···························································(2)Lmax——試樣上最大活菌數(shù)的常用對(duì)數(shù);Lmin——試樣上最小活菌數(shù)的常用對(duì)數(shù);Lmean——試樣上活菌數(shù)平均值的常用對(duì)數(shù)。8.2.3未經(jīng)抗菌處理的試樣接種后立即測(cè)得的活菌平均數(shù)應(yīng)在6.2×103cfu/cm2~2.5×104cf8.3抗菌活性值的計(jì)算R=(Ut?U0)?(At?U0)=Ut?At R——抗菌活性值;U0——未經(jīng)抗菌處理試樣接種后立即回收的8.4抗菌效果9重復(fù)性與再現(xiàn)性a)注明采用本文件;c)覆蓋膜的聚合物類型、尺寸、形狀和厚d)試驗(yàn)用菌種和菌株號(hào),如采用其他菌種必須說(shuō)明原i)若采用了不同于本文件的一些操作,如試樣清洗方法的變更、惰性增稠劑的使用、所用中和j)實(shí)驗(yàn)室的名稱等識(shí)別資料及及實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人的姓名A.21/500營(yíng)養(yǎng)肉湯(1/500NB)的化學(xué)成分GB/T31402—XXXX/ISO22196:2011這些數(shù)據(jù)是用本方法獲得的重復(fù)性和再現(xiàn)性的實(shí)例,但不能用于判定不同實(shí)驗(yàn)室的測(cè)試結(jié)樣品包含涂了水溶性丙烯酸樹脂涂層的PET膜。在涂丙有時(shí),空白對(duì)照膜和未經(jīng)處理的材料(0ppm)上的細(xì)菌存活率存在很大差異??赡軣o(wú)法制備真正的基材,而不是沒有添加劑的基材。因此,在某些情R1L3L3aS1a3a13面,與e2相比,VR×VS和VR×VL×VS沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。所以這兩個(gè)R1L3VR+VL(一階誤差3a試樣,VS1aS3a2)=[V(e2’)/3]1/2=(0.0228/3)1/2=0.08711)-V(e2’)]1/3}1/2=[(0.2997-0.228)/3]1/2=0.304R′=×100U'3個(gè)未經(jīng)抗菌處理試樣接種24h后回收的平均菌數(shù),單位為CFU/cm2;GB/T31402—XXXX/ISO22196:2011[2]GB/T19276.1水性培養(yǎng)液中材料最終需氧生物分解能力的測(cè)定采用測(cè)定密閉呼吸計(jì)中需氧[3]GB/T19276.2水性培養(yǎng)液[4]GB/T19277受控堆肥條件下材料最終需氧生物分解能力的測(cè)定采用測(cè)定釋放的二
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