支原體及衣原體

關(guān)于支原體及衣原體支原體（mycoplasma）1.定義是一類缺乏細(xì)胞壁、呈高度多形性、能通過濾菌器、在無生命培養(yǎng)基中能生長繁殖的最小原核細(xì)胞型微生物。該微生物于1898年分離出來，1967年被正式命名為支原體。2.分類歸屬于柔膜體綱支原體目支原體科，下分四屬。與人類相關(guān)的是支原體屬（有119菌種），和脲原體屬（有7個菌種）。從人體中分離出來的有16個菌種，其中致病性支原體主要有肺炎支原體、人型支原體、生殖支原體、發(fā)酵支原體、穿透支原體、解脲脲原體和梨支原體。第2頁,共47頁，2024年2月25日，星期天柔膜體綱支原體目肺炎支原體，人型支原體，生殖支原體，穿透支原體，發(fā)酵支原體，梨支原體解脲尿原體支原體科無膽甾原體科螺原體科支原體屬脲原體屬第3頁,共47頁，2024年2月25日，星期天3.生物學(xué)性狀3.1

形態(tài)與結(jié)構(gòu)

?大小一般為0.2～0.5μm

?基因組為一環(huán)狀雙鏈DNA，分子量小

?無細(xì)胞壁可呈球形、桿形、絲狀和分枝狀等多種形態(tài)。

?Giemsa染色著色較好，呈淡紫色第4頁,共47頁，2024年2月25日，星期天3.生物學(xué)性狀第5頁,共47頁，2024年2月25日，星期天3.2結(jié)構(gòu)

?

內(nèi)外兩層為蛋白質(zhì)及糖類，中層為脂類（膽固醇為主），凡作用于膽固醇的物質(zhì)，如皂素、二性霉素B等均能破壞細(xì)胞膜致其死亡。細(xì)胞膜外有莢膜。

?

特殊的頂端結(jié)構(gòu)：粘附宿主上皮細(xì)胞表面，與支原體的致病有關(guān)。3.生物學(xué)性狀第6頁,共47頁，2024年2月25日，星期天3.2培養(yǎng)特性

?

培養(yǎng)基中需加入10～20%人或動物血清以提供膽固醇和其他長鏈脂肪酸。多數(shù)還需添加酵母浸液、組織浸液、核酸提取物和輔酶。

?

最適pH7.8～8.0之間，低于7.0則死亡，但解脲脲原體最適pH6.0～6.5。

?

兼性厭氧，多數(shù)在37℃微氧環(huán)境生長良好。

?固體培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)3~10天可生長直徑10~600μm的

“油煎蛋”樣菌落，低倍鏡觀察菌落呈圓形，中央致密隆起，外

周有顆粒包繞。

?

繁殖方式除了二分裂外，還有分節(jié)、出芽、斷裂和分枝等

方式。3.生物學(xué)特性第7頁,共47頁，2024年2月25日，星期天3.生物學(xué)性狀第8頁,共47頁，2024年2月25日，星期天3.生物學(xué)性狀第9頁,共47頁，2024年2月25日，星期天3.生物學(xué)性狀第10頁,共47頁，2024年2月25日，星期天3.生物學(xué)性狀3.3生化反應(yīng)

第11頁,共47頁，2024年2月25日，星期天3.4抗原結(jié)構(gòu)

?支原體的抗原主要來自細(xì)胞膜外層蛋白、構(gòu)成莢膜的肽聚糖和中層

脂類組成。其外層蛋白是型特異性抗原，具有免疫原性。?生長抑制試驗(yàn)（GIT）和代謝抑制試驗(yàn)（MIT）利用針對此抗原的型

特異性血清來抑制支原體在培養(yǎng)基上生長，可將支原體分成若干血

清型。

3.5抵抗力

?支原體無細(xì)胞壁，對理化因素抵抗力弱：

?不耐干燥、不耐熱，耐寒。

?對化學(xué)消毒劑敏感，但對堿、醋酸鉈、結(jié)晶紫有抵抗力。

?

對作用于細(xì)胞壁的青霉素類天然耐受，對干擾蛋白質(zhì)合成和

作用于DNA螺旋酶阻礙DNA合成的抗生素敏感。3.生物學(xué)特性第12頁,共47頁，2024年2月25日，星期天4.1致病物質(zhì)

?

粘附素：粘附到尿道和生殖道上皮細(xì)胞

?

莢膜或者微莢膜：具有抗吞噬作用?

毒性代謝產(chǎn)物：神經(jīng)毒素、磷脂酶C、核酸酶、過氧化氫和

超氧離離子均能引起宿主黏膜上皮細(xì)胞或紅細(xì)胞的病理損傷

?

超抗原：免疫調(diào)節(jié)

?

其它：如穿透支原體粘附侵入CD4＋T細(xì)胞引起損傷

4.致病性第13頁,共47頁，2024年2月25日，星期天4.致病性4.2所致疾病第14頁,共47頁，2024年2月25日，星期天4.3

免疫性?體液免疫：抗膜蛋白的抗體包括IgM、IgG和SIgA?細(xì)胞免疫：主要是特異性CD4＋Th1

細(xì)胞分泌細(xì)胞因子4.致病性第15頁,共47頁，2024年2月25日，星期天

?

肺炎支原體是目前所能確定引起人類呼吸道感染性疾病的唯一支原體，主要引起人類支原體肺炎。肺炎支原體第16頁,共47頁，2024年2月25日，星期天?0.2～0.3μm，高度多形性，如球形、球桿狀、棒狀、分枝狀和絲狀；?初次分離應(yīng)在含血清和新鮮酵母浸出液的培養(yǎng)基中，一般10天左右長出菌落；多次傳代后生長加快，菌落呈“油煎蛋”狀；?能發(fā)酵葡萄糖，不能利用精氨酸與尿素，對豚鼠紅細(xì)胞產(chǎn)生β溶血環(huán)；?對美藍(lán)、醋酸鉈、青霉素不敏感。1.生物學(xué)性狀第17頁,共47頁，2024年2月25日，星期天?

2.1主要經(jīng)飛沫傳播，但大多數(shù)發(fā)生于夏末秋初，1～15歲人群發(fā)病率較高，嬰兒發(fā)病率最高。?

2.2含特殊的頂端結(jié)構(gòu)：P1表面蛋白（170kDa）和P30（32kDa）為主要的粘附蛋白，使肺炎支原體黏附于呼吸道上皮。

肺炎支原體具有超抗原作用，能刺激炎癥細(xì)胞在感染部位釋放大量的淋巴因子（如TNF-α、IL-1、IL-6）引起組織損傷。

莢膜

毒性代謝產(chǎn)物2.致病性第18頁,共47頁，2024年2月25日，星期天?原發(fā)性非典型性肺炎（primaryatypicalpneumonia）（間質(zhì)性肺炎），臨床以咳嗽、發(fā)熱、頭痛、咽痛和肌肉痛為主，有時并發(fā)支氣管肺炎、皮疹、心血管和神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。還可引起咽喉炎、鼻炎、中耳炎和氣管炎等3.所致疾病第19頁,共47頁，2024年2月25日，星期天?血清特異性IgM、IgG及SIgA和致敏的淋巴細(xì)胞；?呼吸道局部黏膜產(chǎn)生的SIgA對防止再感染有較強(qiáng)保護(hù)作用；?出現(xiàn)IgE介導(dǎo)的I型超敏反應(yīng)，促使哮喘病急性發(fā)作4.免疫性第20頁,共47頁，2024年2月25日，星期天?標(biāo)本采集咽拭子去患者咽部分泌物或痰標(biāo)本于培養(yǎng)基培養(yǎng)

分離鑒定1~2w取菌落生化鑒定（分離陽性率低）（形態(tài)、糖發(fā)酵、溶血性、紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)）

生長抑制試驗(yàn)GIT

代謝抑制試驗(yàn)MIT?冷凝集試驗(yàn)?PCR：從痰標(biāo)本中檢測支原體核酸16SrRNA或P1蛋白基因?ELISA:

抗體檢測

抗原檢測

4.微生物學(xué)檢查第21頁,共47頁，2024年2月25日，星期天?大環(huán)內(nèi)酯類藥物?

喹諾酮類藥物5.治療第22頁,共47頁，2024年2月25日，星期天

?

脲原體屬中只有解脲脲原體是致病支原體，主要引起人類生殖道感染。解脲脲原體第23頁,共47頁，2024年2月25日，星期天?形態(tài)：0.5～0.3μm，單個或成雙排列固體培養(yǎng)：48h后長出直徑15～30μm“油煎蛋”狀菌落。?

最適pH為5.5～6.5。?生化反應(yīng)：分解尿素，不分解糖類和精氨

酸，液體培養(yǎng)基中分解尿素產(chǎn)生氨?抵抗力：對1:2000醋酸鉈不敏感?抗原：MB抗原是其主要膜抗原，將解脲脲原體分為A、B兩大群。14個血清型。1.生物學(xué)性狀第24頁,共47頁，2024年2月25日，星期天?

-粘附于宿主細(xì)胞表面，引起細(xì)胞膜損傷；?

-產(chǎn)生毒性代謝產(chǎn)物如NH3，對宿主細(xì)胞有急性毒性作用；?-磷脂酶損傷宿主的細(xì)胞膜。2.致病機(jī)制第25頁,共47頁，2024年2月25日，星期天?通常寄居在人的泌尿生殖道粘膜，引起非淋菌性尿道炎，也能引起盆腔等部位的感染。?還可通過胎盤感染胎兒，出現(xiàn)早產(chǎn)和死胎。也能引起婦女不孕不育癥。?常與衣原體、淋球菌合并感染?可通過兩性傳播，是引起性傳播疾病的病原體之一。3.所致疾病第26頁,共47頁，2024年2月25日，星期天?接種液體培養(yǎng)基，分解尿素產(chǎn)堿，酚紅指示劑由橘黃色變?yōu)榧t色；再取0.2ml培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于固體培養(yǎng)基，在5%CO2和90%N2的環(huán)境中經(jīng)37℃培養(yǎng)24～48h，用低倍鏡觀察菌落，進(jìn)一步鑒定需用特異抗血清做GIT與MIT。?PCR4.微生物學(xué)檢查第27頁,共47頁，2024年2月25日，星期天?加強(qiáng)宣傳教育，注意性衛(wèi)生，切斷傳播途徑。?四環(huán)素類（紅霉素、多西環(huán)素、阿奇霉素等）、

喹諾酮類藥物治療，但有耐藥株產(chǎn)生。5.防治第28頁,共47頁，2024年2月25日，星期天衣原體沙眼衣原體肺炎衣原體第29頁,共47頁，2024年2月25日，星期天衣原體（chlamydia）1.定義衣原體是一類嚴(yán)格真核細(xì)胞內(nèi)寄生，具有獨(dú)特發(fā)育周期，并能通過細(xì)菌濾器的原核細(xì)胞型微生物，可引起人和家畜的衣原體病。2.分類衣原體目分為衣原體科，副衣原體科，西門坎氏菌科和石德菌科4科，衣原體科下分衣原體和嗜衣原體屬。對人類致病的是衣原體屬的沙眼衣原體，嗜衣原體屬的肺炎衣原體和鸚鵡熱衣原體這三個菌種。第30頁,共47頁，2024年2月25日，星期天第31頁,共47頁，2024年2月25日，星期天?

G-，圓形或橢圓形體?具有細(xì)胞壁，其組成與G-菌相似?有獨(dú)特的發(fā)育周期，二分裂方式繁殖?獨(dú)立的酶系統(tǒng)，但不能產(chǎn)生代謝能量，嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生?對多種抗生素敏感?有核糖體，基因組有DNA和RNA共同特征第32頁,共47頁，2024年2月25日，星期天?

3.1獨(dú)特的發(fā)育周期原體（elementarybody，EB）小而致密，成熟型，高度易感性；網(wǎng)狀體（reticulatebody，RB）大而疏松，繁殖型，不具感染性。3.生物學(xué)性狀第33頁,共47頁，2024年2月25日，星期天包涵體（inclusion)：是衣原體在細(xì)胞空泡內(nèi)繁殖過程中所形成的集團(tuán)形態(tài)，內(nèi)含無數(shù)子代原體和正在分裂的網(wǎng)狀體。3.生物學(xué)性狀第34頁,共47頁，2024年2月25日，星期天?3.2培養(yǎng)特性專性細(xì)胞內(nèi)寄生，可在雞胚卵黃囊中以及Hela細(xì)胞、HL等細(xì)胞中繁殖生長。?3.3抗原結(jié)構(gòu)

根據(jù)細(xì)胞壁的成分不同分為：

屬特異性抗原脂多糖種特異性抗原外膜蛋白型特異性抗原外膜蛋白可變區(qū)氨基酸序列不同?3.4抵抗力

對熱敏感，耐寒耐干燥對甲醛、酒精等常用消毒劑敏感，紫外線可迅速滅活多種抗生素可抑制繁殖3.生物學(xué)性狀第35頁,共47頁，2024年2月25日，星期天?4.1

致病物質(zhì)內(nèi)毒素樣物質(zhì)——抑制細(xì)胞代謝，破壞細(xì)胞

主要外膜蛋白——與吸附、侵入宿主細(xì)胞及阻止吞噬體和溶酶體融合有關(guān)

熱休克蛋白——肉芽腫性炎癥、瘢痕形成4.致病性與免疫性第36頁,共47頁，2024年2月25日，星期天4.致病性與免疫性?

4.2所致疾病?

4.3免疫性細(xì)胞免疫與體液免疫，細(xì)胞免疫為主第37頁,共47頁，2024年2月25日，星期天?直接涂片鏡檢采用Giemsa、碘液或熒光抗體染色鏡檢，檢查上皮細(xì)胞內(nèi)有無包涵體。?分離培養(yǎng)接種雞胚卵黃囊、小鼠或傳代細(xì)胞?核酸檢測5.微生物學(xué)檢查第38頁,共47頁，2024年2月25日，星期天第39頁,共47頁，2024年2月25日，星期天第40頁,共47頁，2024年2月25日，星期天沙眼衣原體Chlamydiatrachomatis

傳染源：人沙眼生物型、LGV性病淋巴肉芽腫生物型、鼠生物型

沙眼生物型湯飛凡，1955，雞胚卵黃囊接種法首次分離對人不致病第41頁,共47頁，2024年2月25日，星期天沙眼眼---眼，眼---手---眼:

沙眼生物型A、B、Ba和C血清型感染眼結(jié)