天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)省公開(kāi)課一等獎(jiǎng)全國(guó)示范課微課金獎(jiǎng)?wù)n件

天然藥品化學(xué)試驗(yàn)棗莊學(xué)院生命科學(xué)系天然藥品化學(xué)試驗(yàn)棗莊學(xué)院生命科學(xué)系王占一助教第1頁(yè)試驗(yàn)一槐米中蘆丁提取工藝第2頁(yè)一、試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)

①經(jīng)過(guò)蘆丁提取與精制掌握堿-酸法提取黃酮類化合物原理及操作。②經(jīng)過(guò)蘆丁檢識(shí)，了解黃酮類化合物定性研究普通程序和方法。

第3頁(yè)二、試驗(yàn)原理

對(duì)酸性、堿性或兩性化合物，可加入酸或堿以調(diào)整溶液PH值，改變分子存在狀態(tài)（游離型或離解型），從而改變?nèi)芙舛榷鴮?shí)現(xiàn)分離。包含酸/堿法、堿/酸法。第4頁(yè)一些酚酸性類物質(zhì)如黃酮、蒽醌類等用堿性水從藥材中提出后，加酸調(diào)至酸性，酚酸性成份能夠從水中析出。（堿/酸法）第5頁(yè)三、試驗(yàn)儀器與試驗(yàn)材料

1、試驗(yàn)儀器玻璃棒布氏漏斗濾紙

電子天平電熱套燒杯2、試驗(yàn)材料槐花米石灰乳硼砂鹽酸水PH試紙第6頁(yè)四、試驗(yàn)方法1.槐米藥材判定與前處理2.槐米中黃酮類化合物提?。ㄒ?jiàn)下列圖）第7頁(yè)蘆丁提取與分離流程圖第8頁(yè)五、試驗(yàn)指導(dǎo)

1．本試驗(yàn)講解關(guān)鍵點(diǎn)及注意事項(xiàng)①蘆丁提取方法，重點(diǎn)介紹堿-酸法原理及注意事項(xiàng)。②調(diào)溫電熱套使用說(shuō)明：使用方法：接通電源，電源指示燈亮，然后打開(kāi)調(diào)壓旋鈕開(kāi)關(guān)，調(diào)整使用中，加熱套功率伴隨調(diào)整方位變動(dòng)，產(chǎn)生不一樣功率，工作電壓表也伴隨顯示不一樣示數(shù)。順時(shí)針調(diào)整會(huì)逐步增大功率，增加使用溫度，不然反之。第9頁(yè)③調(diào)溫電熱套使用注意事項(xiàng)：1）第一次使用時(shí)，電熱套內(nèi)芯會(huì)出現(xiàn)煙霧，那是玻璃絲外表油脂在揮發(fā)。通電數(shù)次后就不會(huì)出現(xiàn)這種現(xiàn)象，即可正常使用。2）本產(chǎn)品遇潮后要遲緩升溫，使其干燥后即可恢復(fù)良好絕緣性能。3）如長(zhǎng)時(shí)間不用請(qǐng)放于干燥通風(fēng)處。第10頁(yè)2．試驗(yàn)匯報(bào)要求①槐米藥材判定和前處理方法。②堿-酸法提取蘆丁原理及提取工藝流程。第11頁(yè)3．思索題①中藥材前處理普通分為哪幾個(gè)程序？②在蘆丁提取工藝中，為何加石灰水而不是加氫氧化鉀？③在蘆丁提取工藝中，為何要加入硼砂水溶液？第12頁(yè)六、參考書(shū)1.吳立軍主編《天然藥品化學(xué)》（第五版），人民衛(wèi)生出版社，年2.梁敬鈺主編《天然藥品化學(xué)試驗(yàn)與指導(dǎo)》，中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，年3.蔡少青主編《生藥學(xué)》（第五版），人民衛(wèi)生出版社，年4.崔福德主編《藥劑學(xué)》（第六版），人民衛(wèi)生出版社，年第13頁(yè)試驗(yàn)二槐米水提物濃縮和干燥工藝第14頁(yè)一、試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)

①學(xué)習(xí)應(yīng)用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮提取液原理及操作。②學(xué)習(xí)應(yīng)用水域鍋干燥藥品濃縮液基本操作。第15頁(yè)二、試驗(yàn)原理

1.蒸發(fā)濃縮可在沸點(diǎn)或低于沸點(diǎn)時(shí)進(jìn)行，又可在減壓或常壓下進(jìn)行，為提升蒸發(fā)效率，生產(chǎn)上蒸發(fā)濃縮均采取沸騰蒸發(fā)。2.干燥過(guò)程分成兩階段，恒速階段和降速階段。在恒速階段，干燥速率與物料濕含量無(wú)關(guān)；而在降速階段，干燥速率近似地與物料濕含量成正比。第16頁(yè)三、試驗(yàn)儀器與試驗(yàn)材料

1、試驗(yàn)儀器旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器恒溫水浴鍋燒杯坩堝玻璃棒試劑瓶2、試驗(yàn)材料槐米水提液鹽酸PH試紙濾紙滑石粉第17頁(yè)四、試驗(yàn)方法1、槐米藥材提取液減壓濃縮工藝流程，采取旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀對(duì)提取液進(jìn)行濃縮。2、槐米藥材濃縮液常壓干燥工藝流程，選取水浴鍋對(duì)濃縮液進(jìn)行干燥。第18頁(yè)五、試驗(yàn)指導(dǎo)

1．本試驗(yàn)講解關(guān)鍵點(diǎn)及注意事項(xiàng)①旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀基本操作方法：1）用膠管與冷凝水龍頭連接，用真空膠管與真空泵相聯(lián)。

2）先將水注入加熱槽。最好用純水，自來(lái)水要放置1-2天再用。

3）調(diào)正主機(jī)角度：只要松開(kāi)主機(jī)和立柱連結(jié)螺釘。主機(jī)即可在0-45度之間任意傾斜。

第19頁(yè)4）接通冷凝水，接通電源220V/50Hz，與主機(jī)連接上蒸發(fā)瓶（不要放手），打開(kāi)真空泵使之達(dá)一定真空度松開(kāi)手。

5）調(diào)正主機(jī)高度：按壓下位于加熱槽底部壓桿，左右調(diào)整弧度使之到達(dá)適當(dāng)位置后手離壓桿即可到達(dá)所需高度。

第20頁(yè)6）打開(kāi)調(diào)速開(kāi)關(guān)，綠燈亮，調(diào)整其左側(cè)旁轉(zhuǎn)速旋鈕，蒸發(fā)瓶開(kāi)始轉(zhuǎn)動(dòng)。打開(kāi)調(diào)溫開(kāi)關(guān)，綠燈亮，調(diào)整其左側(cè)旁調(diào)溫旋鈕，加熱槽開(kāi)始自動(dòng)溫控加熱，儀器進(jìn)入試運(yùn)行。溫度與真空度一到所要求范圍，即能蒸發(fā)溶劑到接收瓶。

7）蒸發(fā)完成，首先關(guān)閉調(diào)速開(kāi)關(guān)及調(diào)溫開(kāi)關(guān)，按壓下壓桿使主機(jī)上升，然后關(guān)閉真空泵，并打開(kāi)冷凝器上方放空閥，使之與大氣相通，取下蒸發(fā)瓶，蒸發(fā)過(guò)程結(jié)束。

第21頁(yè)

②旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀操作注意事項(xiàng)：

1）玻璃件應(yīng)輕拿輕放，洗凈烘干。

2）加熱槽應(yīng)先注水后通電，不許無(wú)水干燒。

3）所用磨口儀器安裝前需均勻涂少許真空脂。

4）珍貴溶液應(yīng)先做模擬試驗(yàn)。確認(rèn)本儀器適用后再轉(zhuǎn)入正常使用。

5）準(zhǔn)確水溫用溫度計(jì)直接測(cè)量。

6）工作結(jié)束，關(guān)閉開(kāi)關(guān)，拔下電源插頭。第22頁(yè)③水浴鍋基本操作方法：1）往鍋內(nèi)注入潔凈水，水位最少達(dá)電熱管上方1cm處；2）接通電源，打開(kāi)開(kāi)關(guān)開(kāi)始加熱；3）旋轉(zhuǎn)溫度調(diào)整旋鈕，使旋鈕上刻度線指向工作所需溫度刻度；4）工作完成將水放干。第23頁(yè)④水浴鍋使用注意事項(xiàng)：1）用前必須先注入水，最低水位不得低于電熱管以上1cm，水位過(guò)低會(huì)造成電熱管表面溫度過(guò)高而燒毀；使用過(guò)程要隨時(shí)注意水位；2）假如需用沸水浴，加水量不宜過(guò)多，以免沸騰時(shí)濺出；第24頁(yè)3）未加水到適當(dāng)位置前，切勿接通電源；4）溫度控制器不可隨意拆卸；5）外殼必須接地；6）控制箱內(nèi)部應(yīng)保持干燥，以防因受潮而造成漏電；應(yīng)隨時(shí)注意水箱是否有滲漏現(xiàn)象。第25頁(yè)2．試驗(yàn)匯報(bào)要求

①旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀基本操作方法及注意事項(xiàng)。

②水浴鍋基本操作方法及注意事項(xiàng)。第26頁(yè)3．思索題①中藥材提取液濃縮普通有那些方法，采取減壓濃縮有什么好處？②中藥材濃縮液干燥普通有那些方法，對(duì)于受熱易分解或變質(zhì)化合物應(yīng)采取那些辦法？第27頁(yè)六、參考書(shū)1.吳立軍主編《天然藥品化學(xué)》（第五版），人民衛(wèi)生出版社，年2.梁敬鈺主編《天然藥品化學(xué)試驗(yàn)與指導(dǎo)》，中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，年3.崔福德主編《藥劑學(xué)》（第六版），人民衛(wèi)生出版社，年第28頁(yè)試驗(yàn)三蘆丁粗提物顯色反應(yīng)和PC判別第29頁(yè)一、試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)

①學(xué)習(xí)黃酮類化合物理化性質(zhì)和慣用顯色方法。

②學(xué)習(xí)用紙色譜法分離和判定黃酮類化合物混合液。第30頁(yè)二、試驗(yàn)原理

黃酮類化合物顏色反應(yīng)多與分子中酚－OH及γ－吡喃酮環(huán)相關(guān)。色原酮2-苯基色原酮第31頁(yè)紙色譜法可視為溶質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間連續(xù)分配(萃取)過(guò)程。因?yàn)榻M分在兩相間分配系數(shù)不一樣，因而隨展開(kāi)劑遷移速度不一樣而到達(dá)分離目標(biāo)。第32頁(yè)三、試驗(yàn)儀器與試驗(yàn)材料

1、試驗(yàn)儀器滴管試管比色管紫外分辨儀玻璃棒2、試驗(yàn)材料乙醇0.1%NAOH10%NAOHFeCl3新華1號(hào)層析濾紙25%醋酸水溶液硫酸鋁試劑鋅粒氨水濾紙第33頁(yè)四、試驗(yàn)方法1.HCl-Zn粉反應(yīng)：在樣品乙醇或甲醇溶液中加入少許鎂粉振搖，再滴加幾滴濃鹽酸。（必要時(shí)在水浴上加熱）2.鋁鹽反應(yīng)：在樣品乙醇或甲醇溶液中加入幾滴AL2（SO4）3試劑，觀察顏色改變，并在紫外燈下觀察有沒(méi)有熒光現(xiàn)象。

第34頁(yè)3.FeCl3反應(yīng)：在樣品乙醇或甲醇溶液中加入幾滴FeCl3試劑，觀察顏色改變。

4.性試劑顯色反應(yīng)：在樣品乙醇或甲醇溶液中加入幾滴NAOH試劑，觀察顏色改變。

5.紙色譜（PC）:支持劑為新華1號(hào)層析濾紙；流動(dòng)相為25%醋酸水溶液；顯色劑為氨水。第35頁(yè)五、試驗(yàn)指導(dǎo)

1．本試驗(yàn)講解關(guān)鍵點(diǎn)及注意事項(xiàng)①試管及滴定管常規(guī)操作方法。

②紫外燈下觀察熒光現(xiàn)象基本操作方法及注意事項(xiàng)。

③層析紙條應(yīng)預(yù)防污染，其工作部分不能用手觸及。

④點(diǎn)樣毛細(xì)管不要弄錯(cuò)。先在碎濾紙上進(jìn)行點(diǎn)樣練習(xí)，樣點(diǎn)與樣點(diǎn)和邊緣與樣點(diǎn)之間應(yīng)有同等寬度間隙。第36頁(yè)⑤紙層析紙條和層析管均要垂直安放，層析管可置于試管架上或自由夾固定，紙條不能觸及管壁。樣點(diǎn)與展開(kāi)劑液面最少相距0.5cm。

⑥層析完成，取出紙條時(shí)，不要忘記馬上在溶劑前沿處劃記號(hào)。樣點(diǎn)至溶劑前沿距離以7～8cm為宜。

⑦用電吹風(fēng)顯色時(shí)，不可太近或過(guò)熱，以免影響斑點(diǎn)及其顏色觀察。第37頁(yè)2．試驗(yàn)匯報(bào)要求①向供試液中加入顯色試劑后顏色改變，以及有沒(méi)有熒光反應(yīng)。

②紙色譜法分離化合物基本操作方法，以及色譜圖分析。第38頁(yè)3．思索題①黃酮類化合物顯色反應(yīng)有哪些，在物質(zhì)判定中有何用途？②應(yīng)用紙色譜分離黃酮類化合物，怎樣能做到使斑點(diǎn)清晰？③紙層析時(shí)，樣點(diǎn)不能接觸或浸入到展開(kāi)劑液面以下，為何？④色譜分離技術(shù)中，Rf值計(jì)算有何意義，本試驗(yàn)中Rf值大約是多少？第39頁(yè)六、參考書(shū)1.吳立軍主編《天然藥品化學(xué)》（第五版），人民衛(wèi)生出版社，年2.梁敬鈺主編《天然藥品化學(xué)試驗(yàn)與指導(dǎo)》，中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，年3.李發(fā)美主編《分析化學(xué)》（第六版），人民衛(wèi)生出版社，年第40頁(yè)試驗(yàn)四六味地黃丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究第41頁(yè)一、試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)

①學(xué)習(xí)中藥質(zhì)量控制方法，中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制訂方法。②學(xué)習(xí)六味地黃丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制訂依據(jù)。③學(xué)習(xí)試驗(yàn)用硅膠板鋪板技術(shù)。第42頁(yè)二、試驗(yàn)原理

六味地黃丸

【處方】

熟地黃184g

山茱萸(制)92g

牡丹皮69g

山藥92g

茯苓69g

澤瀉69g

蜂蜜(煉)550g滑石粉石蠟油---------------------------------------------------------------1000g第43頁(yè)【質(zhì)量要求】1）水分2）重量差異3）裝量差異4）溶散時(shí)限5）微生物程度【判別】取本品乙醚提取液作為供試品溶液，另取丹皮對(duì)照藥材作成對(duì)照品溶液，照薄層色譜法(中國(guó)藥典年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn)，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜對(duì)應(yīng)位置上，顯相同藍(lán)褐色斑點(diǎn)。

第44頁(yè)三、試驗(yàn)儀器與試驗(yàn)材料

1、試驗(yàn)儀器索氏提取器旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器燒杯漏斗展開(kāi)缸顯色瓶超聲波提取器玻璃棒試劑瓶電子天平錐形瓶研缽玻璃板布氏漏斗真空泵抽濾瓶

2、試驗(yàn)材料六味地黃丸牡丹皮乙醚丙酮氯化鐵顯色劑硅膠濾紙環(huán)己烷醋酸乙酯乙醇乙酸CMC-Na玻璃板

第45頁(yè)四、試驗(yàn)方法（1）取本品20丸，在電子天平下分別稱取各丸質(zhì)量，統(tǒng)計(jì)，求出平均值，并計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。（2）硅膠G薄層板制備1.CMC－Na溶液配置：普通其濃度為0.3～0.5％，依據(jù)自己經(jīng)驗(yàn)而定（我習(xí)慣用0.4％）。詳細(xì)方法以下：先將預(yù)用水加熱至60~70℃，然后加入CMC－Na，邊加邊攪拌，使之溶解，即得。

第46頁(yè)2.與硅膠混合：CMC－Na溶液與硅膠百分比為3：1。詳細(xì)方法以下：先將CMC－Na溶液倒入自動(dòng)攪拌器或研缽中，然后加入硅膠，攪勻即可。若是在研缽中研磨，按一個(gè)方向研磨，自下而上，然后自上而下，以趕盡氣泡為佳。

第47頁(yè)3.鋪板：手動(dòng)或機(jī)械。手動(dòng)鋪出板薄厚與所加混合后硅膠量相關(guān)，而機(jī)械鋪出板薄厚與機(jī)械所選取鋼板相關(guān)，可依據(jù)需要來(lái)定。此過(guò)程中最關(guān)鍵是板子邊緣鋪得好壞，手動(dòng)鋪板一定要將玻璃板邊緣硅膠涂勻（我習(xí)慣用兩頭掂法，即板下方中間墊一物體，兩頭懸空，兩手均勻掂動(dòng)）。而機(jī)械鋪板要注意板與板之間平整性，或者由高到低排列。

第48頁(yè)

4.晾干：自然晾干。

5.活化：將晾干板子在105℃烘箱中干燥30min，取出，放入干燥器中，備用。第49頁(yè)（3）取本品9g，研碎，加硅藻土4g，研勻。加乙醚120ml，用索氏提取器低溫回流提取2小時(shí)，濾過(guò)，濾液揮去乙醚，殘?jiān)颖?ml使溶解，作為供試品溶液。另取丹皮10g，加乙醚20ml在超聲波提取器上震蕩提取30分鐘，濾過(guò)，濾液揮去乙醚，殘?jiān)颖?ml使溶解，作為供試品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn)，吸收上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷一醋酸乙酯(3∶1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以鹽酸酸性5％三氯化鐵乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清楚。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜對(duì)應(yīng)位置上，顯相同藍(lán)褐色斑點(diǎn)。

第50頁(yè)五、試驗(yàn)指導(dǎo)

1．本試驗(yàn)講解關(guān)鍵點(diǎn)及注意事項(xiàng)

①中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制訂及研究方法中各個(gè)細(xì)節(jié)問(wèn)題。②電子天平常規(guī)操作方法。③索氏提取器基本操作方法及注意事項(xiàng)。④硅膠板制作基本步驟和注意事項(xiàng)。第51頁(yè)⑤薄層板應(yīng)預(yù)防污染，其工作部分不能用手觸及。⑥點(diǎn)樣毛細(xì)管不要弄錯(cuò)。先在廢板上進(jìn)行點(diǎn)樣練習(xí)。點(diǎn)樣

除另有要求外，用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣于薄層板上，普通為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊2.0cm，樣點(diǎn)直徑及點(diǎn)間距離同紙色譜法,點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢