浙江省期中模擬卷01生物試題（解析版）

高級中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1浙江省期中模擬卷01一．選擇題（每題2分，共38分每題僅一個(gè)正確〖答案〗）1．生物技術(shù)是以現(xiàn)代生命科學(xué)理論為基礎(chǔ)，在個(gè)體、細(xì)胞及分子水平上研究及制造產(chǎn)品或改造動物、植物、微生物等，并使其具有所期望的品質(zhì)和特性。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．干細(xì)胞培養(yǎng)在臨床醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域前景廣泛，但也可能面臨安全性問題B．蛋白質(zhì)工程是在基因操作水平上改造或創(chuàng)造新的蛋白質(zhì)C．治療性克隆的研究與應(yīng)用必須受到相應(yīng)法律法規(guī)的規(guī)范限制D．生物武器主要影響人畜健康，對植物的影響不大〖答案〗D〖解析〗干細(xì)胞：動物或人體內(nèi)保留的具有分裂和分化能力的細(xì)胞，在一定的條件下，干細(xì)胞可以分化成其他類型的細(xì)胞。A、干細(xì)胞培養(yǎng)在臨床醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域前景廣泛，但可能存在安全性問題，A正確；B、蛋白質(zhì)工程通過設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)而對基因進(jìn)行操作來改造或創(chuàng)造新的蛋白質(zhì)，B正確；C、治療性克隆的研究與應(yīng)用必須受到相應(yīng)法律法規(guī)的規(guī)范限制，我國明令禁止生殖性克隆，C正確；D、生物武器對人畜、植物等均可能造成重大傷害，D錯(cuò)誤。故選D。2．臨床上常對羊水中胎兒脫落的細(xì)胞進(jìn)行染色體分析，得出染色體數(shù)量以及結(jié)構(gòu)變異的重要信息，輔助醫(yī)生產(chǎn)前診斷。具體操作步驟如下圖所示，下列選項(xiàng)中說法錯(cuò)誤的是（

）A．秋水仙素處理可使細(xì)胞周期停滯在中期，便于進(jìn)行染色體分析B．實(shí)驗(yàn)中低滲處理的目的是使細(xì)胞吸水膨脹，使染色體分散便于觀察C．細(xì)胞培養(yǎng)過程中需適時(shí)更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累過多危害細(xì)胞生長D．利用該技術(shù)能夠檢測鐮狀細(xì)胞貧血、唐氏綜合征等染色體異常遺傳病〖答案〗D〖解析〗有絲分裂中期，染色體形態(tài)穩(wěn)定、數(shù)目清晰，所以在進(jìn)行染色體分析時(shí)，通常選用處于有絲分裂中期的細(xì)胞，主要觀察染色體的形態(tài)和數(shù)目。A、秋水仙素可抑制分裂前期紡錘體的形成，使細(xì)胞不能分裂導(dǎo)致染色體數(shù)目加倍，故秋水仙素處理可使細(xì)胞周期停滯在中期，中期中的染色體形態(tài)穩(wěn)定、數(shù)目清晰，有利于進(jìn)行染色體分析，A正確；B、細(xì)胞在低滲溶液中會吸水，故實(shí)驗(yàn)中低滲處理的目的是使細(xì)胞吸水膨脹，使染色體分散便于觀察，B正確；C、細(xì)胞培養(yǎng)過程中需適時(shí)更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累過多危害細(xì)胞生長，C正確；D、利用該技術(shù)能夠檢測唐氏綜合征等染色體異常遺傳病，不能夠檢測鐮狀細(xì)胞貧血，因?yàn)殓牋罴?xì)胞貧血是基因突變導(dǎo)致的，D錯(cuò)誤。故選D。3．細(xì)胞被包埋后進(jìn)入緩慢生長狀態(tài)，次生代謝物的合成能力增強(qiáng)，因此在包埋之前應(yīng)使細(xì)胞的生長進(jìn)入與次生代謝有關(guān)的關(guān)鍵代謝階段。實(shí)驗(yàn)中分別將培養(yǎng)天數(shù)（胞齡）為14、15、17、18和21d的紫草細(xì)胞包埋于海藻膠中培養(yǎng)，一個(gè)周期后換新鮮培養(yǎng)基后再培養(yǎng)，共培養(yǎng)兩個(gè)周期，結(jié)果如下表所示。下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）胞齡/周期后色素產(chǎn)量/（mg/g*dw）92.1104.6110.5109.695.42個(gè)周期后色素總產(chǎn)量/（mg/g*dw）159.6196.9236208177.5A．胞齡的長短對紫草色素的合成及分泌具有明顯的影響B(tài)．胞齡為17d的細(xì)胞作為包埋細(xì)胞，紫草色素產(chǎn)量較高C．不同胞齡的細(xì)胞隨培養(yǎng)時(shí)間延長紫草素的產(chǎn)生速率均提高D．胞齡較長時(shí)，紫草素產(chǎn)量降低的原因可能是細(xì)胞已開始進(jìn)入或已進(jìn)入衰亡期〖答案〗C〖解析〗1、初生代謝是生物生長和生存所必需的代謝活動，因此在整個(gè)生命過程中它一直進(jìn)行著。初生代謝物有糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和核酸等。次生代謝不是生物生長所必需的，一般在特定的組織或器官中，并在一定的環(huán)境和時(shí)間條件下才進(jìn)行。次生代謝物是一類小分子有機(jī)化合物（如酚類、萜類和含氮化合物等），在植物抗病、抗蟲等方面發(fā)揮作用，也是很多藥物、香料和色素等的重要來源。2、分析題表可知，隨著胞齡的增加，1個(gè)周期后色素產(chǎn)量和2個(gè)周期后色素總產(chǎn)量先增加后減少，胞齡為17d時(shí)，1個(gè)周期后色素產(chǎn)量和2個(gè)周期后色素總產(chǎn)量均較高。A、根據(jù)題表可知，隨著胞齡的增加，1個(gè)周期后色素產(chǎn)量和2個(gè)周期后色素總產(chǎn)量先增加后減少，胞齡的長短對紫草色素的合成及分泌具有明顯的影響，A正確；B、題表可知，胞齡為17d時(shí)，1個(gè)周期后色素產(chǎn)量和2個(gè)周期后色素總產(chǎn)量均較高，B正確；C、不同胞齡的細(xì)胞隨培養(yǎng)時(shí)間延長紫草素的產(chǎn)生速率先升高后降低，C錯(cuò)誤；D、題干信息，細(xì)胞被包埋后進(jìn)入緩慢生長狀態(tài)，次生代謝物的合成能力增強(qiáng)；可見胞齡較長時(shí)，紫草素產(chǎn)量降低的原因可能是細(xì)胞已開始進(jìn)入或已進(jìn)入衰亡期，D正確。故選C。4．細(xì)菌中的芽孢桿菌較為耐高溫，是常見的蛋白酶產(chǎn)生菌。蛋白酶降解培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)可在菌落周圍形成透明圈。如圖是篩選蛋白酶高產(chǎn)菌株的過程。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．70~80℃水浴10分鐘的目的是殺死非芽孢菌B．在酒精燈火焰旁將樣品用無菌水稀釋并涂布接種C．以奶粉為唯一氮源的培養(yǎng)基能起到選擇作用D．通過透明圈與菌落直徑的比值大小可對產(chǎn)蛋白酶芽孢桿菌進(jìn)行鑒定〖答案〗D〖解析〗分析題圖所示過程從土壤中篩選能降解蛋白質(zhì)的細(xì)菌，實(shí)驗(yàn)流程：土壤取樣→樣品的稀釋→將稀釋液涂布到以奶粉為唯一氮源的培養(yǎng)基上→挑選能生長的菌落→鑒定。A、細(xì)菌中的芽孢桿菌較為耐高溫，70~80℃水浴10分鐘的目的是殺死非芽孢菌，A正確；B、為防止雜菌污染，在酒精燈火焰旁將樣品用無菌水稀釋并涂布接種，B正確；C、蛋白酶降解培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)可在菌落周圍形成透明圈，奶粉富含蛋白質(zhì)，以奶粉為唯一氮源的培養(yǎng)基能起到選擇作用，C正確；D、通過透明圈與菌落直徑的比值大小，可對產(chǎn)蛋白酶芽孢桿菌降解蛋白質(zhì)的能力進(jìn)行比較，D錯(cuò)誤。故選D。5．東南景天中的HMA3基因能編碼Cd（鎘）轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，Cd轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白能將土壤中的Cd吸收進(jìn)體內(nèi)，現(xiàn)欲將東南景天中的HMA3基因轉(zhuǎn)入欒樹，以增強(qiáng)欒樹對Cd的富集能力，從而有效治理Cd污染，科研人員利用下圖結(jié)構(gòu)構(gòu)建重組DNA，圖1為HMA3基因所在DNA示意圖，圖2為質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖，下列敘述正確的是（

）A．欲獲取HMA3基因，可用引物1、引物2進(jìn)行PCR循環(huán)至少2輪獲得B．用凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)物，引物1、引物2擴(kuò)增的產(chǎn)物可得3條條帶C．構(gòu)建含HMA3和GFP基因的重組質(zhì)粒，需在引物上添加BglⅡ和HindⅢ的識別序列D．用含潮霉素的培養(yǎng)基篩選受體細(xì)胞，能生長的為含重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞〖答案〗C〖解析〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測與鑒定。A、欲獲取HMA3基因，可用引物1、引物2進(jìn)行PCR循環(huán)至少3輪獲得，A錯(cuò)誤；B、用凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)物，引物1、引物2擴(kuò)增的產(chǎn)物可能會得到引物帶、引物二聚體帶、目的擴(kuò)增產(chǎn)物帶和非目的擴(kuò)增產(chǎn)物帶等多條不同的條帶，B錯(cuò)誤；C、構(gòu)建含HMA3和GFP基因的重組質(zhì)粒時(shí)，需要有啟動子和終止子序列，又不破壞GFP基因，因此需要在引物上添加BglⅡ和HindⅢ的識別序列，C正確；D、用含潮霉素的培養(yǎng)基篩選受體細(xì)胞，能生長的為含重組質(zhì)?；虿缓亟M質(zhì)粒的受體細(xì)胞，這兩種都有可能，D錯(cuò)誤。故選C。6．為探究辣椒素和辣椒水對腸道微生物的影響，某研究小組選擇標(biāo)準(zhǔn)辣椒素溶液（SC組）和含等量辣椒素的辣椒水（PE組）進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，部分結(jié)果如下圖所示。不同時(shí)間段各組培養(yǎng)液辣椒素含量變化（mg/L）組別0h6h12h24hPE組1．121．000．320SC組1．121．0000下列有關(guān)敘述中錯(cuò)誤的是（

）A．接種腸道微生物之前，需先對含辣椒素的培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌B．可用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)不同時(shí)間段各組腸道微生物的數(shù)量C．據(jù)圖推測，培養(yǎng)過程中腸道微生物可利用辣椒素進(jìn)行細(xì)胞代謝D．據(jù)圖推測，辣椒水和辣椒素對腸道微生物的繁殖均具有促進(jìn)作用〖答案〗D〖解析〗微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟。稀釋涂布平板法可以用來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。A、接種微生物之前，需先對含辣椒素的培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌，保證無雜菌污染，A正確；B、稀釋涂布平板法既可以分離微生物也可以統(tǒng)計(jì)微生物的數(shù)量，所以可用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)不同時(shí)間段各組腸道微生物的種類和數(shù)量，B正確；C、由圖2可知，培養(yǎng)過程中，PE組和SC組的辣椒素含量逐漸下降，直至降到0，故推測腸道微生物可利用辣椒素進(jìn)行細(xì)胞代謝，C正確；D、據(jù)圖1推測，與對照組相比，培養(yǎng)到6h時(shí)，辣椒水和辣椒素對腸道微生物的繁殖具有抑制作用，但培養(yǎng)到12h時(shí)，實(shí)驗(yàn)組的腸道微生物數(shù)量高于對照組；結(jié)合圖2，推測出辣椒水和辣椒素對腸道微生物的繁殖具有先抑制、再促進(jìn)的作用，D錯(cuò)誤。故選D。根據(jù)以下材料回答下列7、8小題：乳酸菌在乳中生長發(fā)酵乳糖產(chǎn)生乳酸．其產(chǎn)酸力是乳酸菌的重要特性。研究表明產(chǎn)酸力與菌株的β-半乳糖苷酶的活性相關(guān)，該酶基因位于質(zhì)粒上，乳糖代謝由質(zhì)?？刂?。通過誘變可以獲得乳糖代謝障礙突變體。突變的部位和數(shù)量影響對乳糖的利用能力。研究人員以LactobacillusbulgaricusB-3為出發(fā)菌株采用紫外線或亞硝基胍進(jìn)行誘變選育獲得高產(chǎn)酸的乳酸菌。乳酸菌乳糖發(fā)酵能力的檢測方法通常有兩種：一、接種于MRS液體培養(yǎng)基（脫脂乳液體培養(yǎng)基），通過凝乳速度快慢來判斷，凝乳速度越快，發(fā)酵乳糖能力越強(qiáng)；二、接種于含ONPG（鄰-硝基酚-β-半乳糖苷）的平面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基中出現(xiàn)β-半乳糖苷酶，會顯黃色。7．下列關(guān)于誘變育種過程中使用的培養(yǎng)基的敘述，正確的是（

）A．滅菌后調(diào)整培養(yǎng)基pH至中性偏堿B．對菌種產(chǎn)酸能力的測定還可利用添加了CaCO3的固體平面培養(yǎng)基C．含ONPG的培養(yǎng)基從功能上分屬于選擇培養(yǎng)基D．對培養(yǎng)基的滅菌通常采用高壓蒸汽滅菌法，有條件的可采用干熱滅菌法效果更佳8．對所獲得的高產(chǎn)酸菌株進(jìn)行遺傳穩(wěn)定性檢測，是菌株應(yīng)用于發(fā)酵工程前的必須過程。下列關(guān)于菌株遺傳穩(wěn)定性的敘述，錯(cuò)誤的是（

）A．含突變基因的質(zhì)?？截悢?shù)改變是引起產(chǎn)酸能力改變的原因之一B．實(shí)驗(yàn)過程需要對菌種進(jìn)行多次傳代培養(yǎng)C．含ONPG的培養(yǎng)基上菌落直徑與黃色圈直徑比值小說明β-半乳糖苷酶的活性強(qiáng)或數(shù)量多D．培養(yǎng)時(shí)需在搖床上進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，以確保培養(yǎng)液中有較高的溶解氧〖答案〗7．B8．D〖解析〗7．A、乳酸菌（細(xì)菌）適宜pH為中性偏堿性，配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先調(diào)pH再滅菌，防止調(diào)pH時(shí)造成雜菌污染，A錯(cuò)誤；B、乳酸菌是一種厭氧型細(xì)菌，實(shí)驗(yàn)室常利用溶鈣圈法對產(chǎn)酸菌進(jìn)行篩選，其原理是產(chǎn)酸菌產(chǎn)生的酸性物質(zhì)和CaCO3反應(yīng)而出現(xiàn)的溶解圈（透明圈），另外，CaCO3還可中和產(chǎn)生的酸，維持培養(yǎng)基pH值相對穩(wěn)定，B正確；C、分析題意“接種于含ONPG（鄰-硝基酚-β-半乳糖苷）的平面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基中出現(xiàn)β-半乳糖苷酶，會顯黃色”，由此可知，含ONPG的培養(yǎng)基從功能上分屬于鑒別培養(yǎng)基，C錯(cuò)誤；D、干熱滅菌多用于耐熱器皿滅菌，例如移液管和玻璃平皿等、玻璃試管或者金屬器皿等等，培養(yǎng)基中含有大量的液體成分，因此不能用干熱滅菌法，D錯(cuò)誤。故選B。8．A、分析題意“乳酸菌的產(chǎn)酸力與菌株的β-半乳糖苷酶的活性相關(guān)，該酶基因位于質(zhì)粒上，乳糖代謝由質(zhì)?？刂?。通過誘變可以獲得乳糖代謝障礙突變體，突變的部位和數(shù)量影響對乳糖的利用能力”，因此含突變基因的質(zhì)粒拷貝數(shù)改變是引起產(chǎn)酸能力改變的原因之一，A正確；B、本實(shí)驗(yàn)是為了通過人工誘變獲得高產(chǎn)酸的乳酸菌，隨著菌種的誘變篩選和多次傳代培養(yǎng)，菌種本身所具有的優(yōu)良的遺傳性狀可能得到延續(xù)，更有可能篩選出高產(chǎn)酸的乳酸菌，B正確；C、分析題意“接種于含ONPG（鄰-硝基酚-β-半乳糖苷）的平面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基中出現(xiàn)β-半乳糖苷酶，會顯黃色”，故含ONPG的培養(yǎng)基上菌落直徑與黃色圈直徑比值小說明β-半乳糖苷酶的活性強(qiáng)或數(shù)量多，C正確；D、乳酸菌屬于厭氧微生物，故不需要保持培養(yǎng)液中有較高的溶解氧，D錯(cuò)誤。故選D。9．某植物的野生型和突變型植株雜交，F(xiàn)1均為野生型，F(xiàn)1自交所得F2中絕大部分植株與野生型相似（包括野生型、介于野生型與突變型之間的“過渡類型”），以+表示，少部分植株與突變型相似，以P表示。研究發(fā)現(xiàn)，兩表型相關(guān)基因的堿基序列一致，長度均為2.4kb，將此片段用限制酶PstI完全酶切結(jié)果如下圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．據(jù)題意推測，限制酶PstI可能對甲基化敏感B．2.2kb和0.9kb條帶是“過渡類型”的酶切產(chǎn)物C．圖2中P的①②位點(diǎn)可能均發(fā)生了甲基化D．該植株的表觀遺傳現(xiàn)象是可以穩(wěn)定遺傳的〖答案〗D〖解析〗表觀遺傳是指DNA序列不發(fā)生變化，但基因的表達(dá)卻發(fā)生了可遺傳的改變，即基因型未發(fā)生變化而表現(xiàn)型卻發(fā)生了改變，如DNA的甲基化，甲基化的基因不能與RNA聚合酶結(jié)合，故無法進(jìn)行轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mRNA，也就無法進(jìn)行翻譯，最終無法合成相應(yīng)蛋白，從而抑制了基因的表達(dá)。A、據(jù)題意可知突變型基因序列不能夠限制酶PstI酶切，由此推測，限制酶PstI可能對甲基化敏感，A正確；B、根據(jù)題圖可知，野生型基因序列酶切產(chǎn)物是1.5kb和0.7kb，因此2.2kb和0.9kb條帶是“過渡類型”的酶切產(chǎn)物，B正確；C、據(jù)題意可知突變型基因序列不能夠限制酶PstI酶切，圖2中P的①②位點(diǎn)可能均發(fā)生了甲基化，C正確；D、根據(jù)題意無法判斷該植株的表觀遺傳現(xiàn)象是可以穩(wěn)定遺傳的，D錯(cuò)誤。故選D。10．馬鈴薯抗?。ˋ）對易感病（a）為顯性，塊莖大（B）對塊莖?。╞）為顯性。現(xiàn)利用品系甲（Aabb）和品系乙（aaBb）培育抗病塊莖大的新品種?？茖W(xué)家利用了以下兩種途徑進(jìn)行培育。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．目標(biāo)品系M和目標(biāo)品系N的染色體組數(shù)相同B．目標(biāo)品系M和目標(biāo)品系N的核DNA數(shù)相同C．目標(biāo)品系M和目標(biāo)品系N的相關(guān)基因組成相同D．目標(biāo)品系M和目標(biāo)品系N的表型不一定相同〖答案〗C〖解析〗分析題意可知，目標(biāo)品系M是用品系甲（Aabb）和品系乙（aaBb）雜交獲取子一代經(jīng)過秋水仙素獲得的四倍體，有純合子也有雜合子。目標(biāo)品系N是用品系甲（Aabb）和品系乙（aaBb）的原生質(zhì)體融合而形成雜種細(xì)胞發(fā)育而來的四倍體，都是雜合子。A、目標(biāo)品系M和目標(biāo)品系N都為四倍體，染色體組數(shù)相同，A正確；B、目標(biāo)品系M和目標(biāo)品系N都為四倍體，二者的核DNA數(shù)相同，B正確；CD、根據(jù)試題分析，目標(biāo)品系M有純合子也有雜合子，而目標(biāo)品系N的是雜合子，二者相關(guān)基因組成不一定相同，二者的表型不一定相同，C錯(cuò)誤、D正確。故選C。11．甲胎蛋白（AFP）與肝癌的發(fā)生密切相關(guān)，臨床上主要利用甲胎蛋白作為原發(fā)性肝癌的血清標(biāo)志物，用于其診斷及療效監(jiān)測，某研究小組為制備抗AFP的單克隆抗體，其設(shè)計(jì)流程如圖所示，其中雜交瘤細(xì)胞可以利用HAT培養(yǎng)基篩選（HAT培養(yǎng)基是含次黃嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶的選擇培養(yǎng)基）。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．過程①需要用HAT培養(yǎng)基和檢測的抗原多次篩選B．過程②中會表現(xiàn)出細(xì)胞貼壁生長和接觸抑制現(xiàn)象C．克隆培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的關(guān)鍵是單個(gè)雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)而來D．雜交瘤細(xì)胞多次傳代培養(yǎng)后，用AFP檢測可能會表現(xiàn)陰性反應(yīng)〖答案〗B〖解析〗雜交瘤細(xì)胞同時(shí)具有骨髓瘤細(xì)胞和漿細(xì)胞的特點(diǎn)，既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生特定的抗體；雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的單克隆抗體能準(zhǔn)確地識別抗原的細(xì)微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大量制備。A、根據(jù)題意，過程①需要用HAT培養(yǎng)基和檢測的抗原多次篩選，選出雜交瘤細(xì)胞，A正確；B、因過程②是雜交瘤細(xì)胞的生長過程，能無限增殖，沒有貼壁生長和接觸抑制現(xiàn)象，B錯(cuò)誤；C、克隆培養(yǎng)的本義就是單細(xì)胞繁殖系，故克隆培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的關(guān)鍵是單個(gè)雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)而來，C正確；D、雜交瘤細(xì)胞多次傳代培養(yǎng)后，也可能會發(fā)生染色體丟失等變異，因此用AFP檢測可能會表現(xiàn)陰性反應(yīng)，D正確。故選B。12．為利用鏈霉菌生產(chǎn)藥物A，研究者構(gòu)建重組DNA并導(dǎo)入鏈霉菌。重組DNA含啟動子P、藥物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因）。培養(yǎng)和篩選過程如下圖所示。下列敘述不正確的是（

）A．導(dǎo)入成功的鏈霉菌細(xì)胞內(nèi)可能發(fā)生基因重組B．誘變處理使培養(yǎng)液中的鏈霉菌產(chǎn)生不同突變C．卡那霉素抗性強(qiáng)弱可反映藥物A基因的表達(dá)量D．生產(chǎn)藥物A最適合選用培養(yǎng)基b上的菌株〖答案〗D〖解析〗基因工程的原理是基因重組，基因工程的基本操作程序?yàn)椋耗康幕虻暮Y選與獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，目的基因的檢測與鑒定。A、重組DNA含啟動子P、藥物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因），導(dǎo)入受體細(xì)胞中，目的基因會插入到受體細(xì)胞的基因組中，發(fā)生的可遺傳變異類型為基因重組，A正確；B、誘變處理所依據(jù)的原理是基因突變，基因突變是不定向的，所以誘變處理使培養(yǎng)液中的鏈霉菌產(chǎn)生不同突變，B正確；C、藥物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因）共用一個(gè)啟動子，二者共表達(dá)，所以卡那霉素抗性強(qiáng)弱可反映藥物A基因的表達(dá)量，C正確；D、誘變處理后將菌液稀釋后涂布，在含不同濃度卡那霉素的培養(yǎng)基上各接種等量同一稀釋度的培養(yǎng)液，應(yīng)該選擇含卡那霉素濃度最高的培養(yǎng)基上所長出的菌落，其生產(chǎn)藥物A的能力也較強(qiáng)，D錯(cuò)誤。故選D。13．蘇云金桿菌是殺滅玉米螟的重要生物，滅蚊球孢菌具有殺滅蚊子的效能，某人將這兩種菌的原生質(zhì)體融合獲得既能殺蚊又能殺螟的新菌株，過程見下圖。微生物原生質(zhì)體的獲得等過程和植物的類似。下列敘述正確的是（

）A．①試管中加入PEG的目的是誘導(dǎo)A、B原生質(zhì)體融合及細(xì)胞壁再生B．圖中過程與植物體細(xì)胞雜交過程相比，誘導(dǎo)融合的方法、所依據(jù)的原理均完全相同C．離心洗滌后向培養(yǎng)液中加入的酶可能是溶菌酶，目的是溶解細(xì)菌的細(xì)胞壁以獲得原生質(zhì)體D．圖中的甲實(shí)驗(yàn)和乙實(shí)驗(yàn)是指滅蚊實(shí)驗(yàn)和殺滅玉米螟實(shí)驗(yàn)，獲得的融合株染色體數(shù)目加倍〖答案〗C〖解析〗題圖分析：圖中①為誘導(dǎo)蘇云金桿菌和滅蚊球孢菌的原生質(zhì)體融合的過程，②為篩選雜種融合體。A、①試管中加入PEG的目的是誘導(dǎo)A、B原生質(zhì)體融合，PEG不具有誘導(dǎo)細(xì)胞壁再生的作用，A錯(cuò)誤；B、圖中為細(xì)菌細(xì)胞的雜交過程，與植物體細(xì)胞雜交過程相比，誘導(dǎo)融合的方法不完全相同，所依據(jù)的原理均為細(xì)胞膜具有一定的流動性的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，B錯(cuò)誤；C、離心洗滌后向培養(yǎng)液中加入的酶可能是溶菌酶，溶菌酶可溶解細(xì)菌的細(xì)胞壁，以獲得原生質(zhì)體，C正確；D、圖中的甲實(shí)驗(yàn)和乙實(shí)驗(yàn)是指個(gè)體水平上進(jìn)行滅蚊實(shí)驗(yàn)和殺滅玉米螟實(shí)驗(yàn)；獲得的融合株由兩種細(xì)菌融合而來，細(xì)菌屬于原核生物，細(xì)胞中沒有染色體，D錯(cuò)誤；故選C。14．如圖為核移植實(shí)驗(yàn)過程示意圖，根據(jù)圖示分析下列敘述正確的是（

）A．去核的時(shí)期應(yīng)該在MⅠ期，原因是該時(shí)期第一極體和卵細(xì)胞核較近B．桑葚胚細(xì)胞應(yīng)提取出細(xì)胞核后，盡快注入去核的卵母細(xì)胞中C．電融合法可促使重構(gòu)胚形成，后期還需要其他方法激活重構(gòu)胚D．受體動物應(yīng)選擇與供體相同的品種，防止出現(xiàn)免疫排斥現(xiàn)象〖答案〗C〖解析〗受精前的準(zhǔn)備階段：（1）準(zhǔn)備階段1-精子獲能，剛剛排出的精子，不能立即與卵子受精，必須在雌性動物生殖道發(fā)生相應(yīng)的生理變化后，才能獲得受精能力。（2）準(zhǔn)備階段2-卵子的準(zhǔn)備，動物排出的可能是初級卵母細(xì)胞也可能是次級卵母細(xì)胞，都要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟，達(dá)到減數(shù)第二次分裂中期時(shí)，才具備與精子受精的能力。A、去核的時(shí)期應(yīng)該在MⅡ期，A錯(cuò)誤；B、由圖可知，桑葚胚細(xì)胞不需要提取出細(xì)胞核，可直接注入去核的卵母細(xì)胞中，B錯(cuò)誤；C、電融合法可促使重組胚胎形成，后期還需要其他方法（如電刺激、Ca2+載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等）激活重組胚胎，C正確；D、受體動物應(yīng)選擇與供體相同的品種，一般不會出現(xiàn)免疫排斥現(xiàn)象，兩者之間無關(guān)，D錯(cuò)誤。故選C。15．科研人員利用青菜（2n=20）幼嫩花粉與甘藍(lán)型油菜（2n=38）下胚軸細(xì)胞為材料，試驗(yàn)了兩種原生質(zhì)體密度及比率對原生質(zhì)體融合效果的影響，結(jié)果如下表。下列敘述正確的是（

）下胚軸原生質(zhì)體密度（104/mL）花粉原生質(zhì)體密度（104/mL）比率異源融合下胚軸同源融合（%）一對一融合（%）一對二及以上融合（%）15151∶118.58.324.710301∶324.616.220.57421∶634.518.212.55451∶933.017.17.0A．該實(shí)驗(yàn)的自變量是兩種原生質(zhì)的密度B．可通過加入過量的培養(yǎng)液終止原生質(zhì)體融合C．實(shí)驗(yàn)表明花粉原生質(zhì)體占比越高，異源融合效率越高D．某融合細(xì)胞的染色體數(shù)為58，說明該細(xì)胞是一對一異源融合細(xì)胞〖答案〗B〖解析〗植物體細(xì)胞雜交過程中需要先進(jìn)行去壁處理，植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，可利用酶解法，即利用纖維素酶和果膠酶分解細(xì)胞壁得到植物原生質(zhì)體。植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞，進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細(xì)胞雜交依據(jù)的原理是細(xì)胞膜的流動性和植物細(xì)胞的全能性。A、由表可知，該實(shí)驗(yàn)的自變量是兩種原生質(zhì)的密度及比率，A錯(cuò)誤；B、可通過加入過量的培養(yǎng)液使原生質(zhì)體充分被稀釋，終止原生質(zhì)體融合，B正確；C、實(shí)驗(yàn)表明花粉原生質(zhì)體占比越高，異源融合效率先增后減，C錯(cuò)誤；D、某融合細(xì)胞的染色體數(shù)為58，說明該細(xì)胞是一對二異源融合細(xì)胞，因?yàn)槭腔ǚ酆腕w細(xì)胞的融合，D錯(cuò)誤。故選B。16．乳酸菌無氧呼吸過程產(chǎn)生的丙酮酸會在LDH酶的催化下產(chǎn)生乳酸，如圖所示。由于工業(yè)需求，需要利用苯丙酮酸生產(chǎn)①處基團(tuán)體積更大的苯乳酸。因此科研人員擬改造LDH的結(jié)構(gòu)，使其成為能生產(chǎn)苯乳酸的mLDH。改造思路是改變LDH編碼基因的序列，使其編碼的蛋白質(zhì)第52位的酪氨酸替換為亮氨酸，使得活性中心增大，以容納更大的基團(tuán)。下列說法錯(cuò)誤的是（

）A．mLDH編碼基因原本不存在于自然界中B．根據(jù)mRNA反推的mLDH編碼基因只有一種堿基序列C．應(yīng)測定改造所得mLDH生產(chǎn)苯乳酸的能力D．上述改造過程屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)〖答案〗B〖解析〗從蛋白質(zhì)功能出發(fā)，先改造LDH的結(jié)構(gòu)，使其成為能生產(chǎn)苯乳酸的mLDH，再改造LDH編碼基因的序列，使其編碼的蛋白質(zhì)第52位的酪氨酸替換為亮氨酸，使得活性中心增大，，該方法屬于蛋白質(zhì)工程。A、mLDH是新的蛋白質(zhì)，其編碼基因原本不存在于自然界中，A正確；B、根據(jù)密碼子簡并性，同一蛋白質(zhì)的氨基酸序列可對應(yīng)多個(gè)mRNA序列，也就有多種可選的DNA序列，B錯(cuò)誤；C、合成出mLDH后，還需要測定改造所得mLDH生產(chǎn)苯乳酸的能力，C正確；D、蛋白質(zhì)工程是根據(jù)人類需求修改蛋白結(jié)構(gòu)，反推基因序列，上述改造過程屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，D正確。故選B。17．一對夫婦都是O型血，通過“試管嬰兒”技術(shù)卻生下一個(gè)A型血的孩子。經(jīng)檢測，作為獨(dú)生子的丈夫被確診為“異源嵌合體”(指身體中存在來自不同受精卵的細(xì)胞群)，該孩子的血型與“異源嵌合體”有關(guān)。下列敘述正確的是（

）A．“試管嬰兒”的培育過程涉及細(xì)胞核移植、體外受精等技術(shù)B．“試管嬰兒”與“克隆動物”的原理相同，不會面臨倫理問題C．該丈夫可能是在胚胎期“吸收”了異卵雙生兄弟的早期胚胎D．可將2個(gè)囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)與滋養(yǎng)層交換重組，構(gòu)建“異源嵌合體”〖答案〗C〖解析〗試管嬰兒技術(shù)的操作流程是：分別將卵細(xì)胞和精子取出后，置于試管內(nèi)使其受精，并培養(yǎng)成早期胚胎，再將早期胚胎植入母體內(nèi)發(fā)育成胎兒，孕育成熟后產(chǎn)出。A、試管嬰兒技術(shù)不涉及細(xì)胞核移植技術(shù)，A錯(cuò)誤；B、“試管嬰兒”屬于有性生殖，而“克隆動物”屬于無性生殖，兩者原理不同，且兩者均會面臨倫理問題，B錯(cuò)誤；C、分析題意可知，“異源嵌合體”是指身體中存在來自不同受精卵的細(xì)胞群，一對夫婦都是O型血，卻生下一個(gè)A型血的孩子，據(jù)此推測該丈夫可能是在胚胎期“吸收”了異卵雙生兄弟的早期胚胎，被吸收的早期胚胎含有A型血相關(guān)基因，C正確；D、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育為胎兒的各種組織，而滋養(yǎng)層發(fā)育為胎膜和胎盤，在現(xiàn)有技術(shù)條件下，無法將2個(gè)囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)與滋養(yǎng)層交換重組，構(gòu)建“異源嵌合體”，D錯(cuò)誤。故選C。18．乳腺生物反應(yīng)器產(chǎn)生重組人血小板生成素（rhTPO）的相關(guān)過程如下圖所示：下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．用HindⅢ和SmaI雙酶切可提高構(gòu)建重組克隆載體的成功率B．不能將rhTPO基因通過顯微注射法直接導(dǎo)入受精卵的原因可能是rhTPO基因在受精卵中不能自主復(fù)制C．受精卵在前三次分裂過程中細(xì)胞的體積在不斷變小，有機(jī)物種類不斷增多D．乳腺作為生物反應(yīng)器的優(yōu)點(diǎn)有乳汁成分簡單便于提純、頻繁采集不會對動物產(chǎn)生危害等〖答案〗A〖解析〗根據(jù)題圖可知：圖中目的基因（rhTPO）上存在三個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，由于SmaⅠ的酶切位點(diǎn)位于目的基因中間，利用該限制酶會破壞目的基因，因此應(yīng)選用HindⅢ和XhoⅠ兩種限制酶切割目的基因，而利用這兩種限制酶切割質(zhì)粒會破壞質(zhì)粒上的抗四環(huán)素基因，則質(zhì)粒上應(yīng)選用抗卡那霉素基因作為標(biāo)記基因。A、圖中目的基因（rhTPO）上存在三個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，由于SmaⅠ的酶切位點(diǎn)位于目的基因中間，利用該限制酶會破壞目的基因，因此應(yīng)選用HindⅢ和XhoⅠ兩種限制酶切割目的基因，可避免目的基因自連，保證目的基因按正確方向插入，A錯(cuò)誤；B、一般情況下，直接導(dǎo)入目的基因時(shí)，由于rhTPO基因在受精卵中不能自主復(fù)制和表達(dá)，母羊不會表達(dá)rhTPO基因，因此需要構(gòu)建基因表達(dá)載體，B正確；C、受精卵在卵裂期胚胎細(xì)胞數(shù)量不斷增加，胚胎總體積并不增加或略有縮小，有機(jī)物總量減少，種類增加，C正確；D、乳腺作為生物反應(yīng)器的優(yōu)點(diǎn)是乳汁成分簡單，收集產(chǎn)物蛋白比較容易，不會對動物造成傷害，D正確。故選A。19．嵌合體指生物個(gè)體體內(nèi)存在兩種或以上不同細(xì)胞群的現(xiàn)象，根據(jù)是否來自同一受精卵分可為同源嵌合體和異源嵌合體。某夫婦通過“試管嬰兒”技術(shù)生下一女孩，該女孩兩個(gè)不同細(xì)胞染色體組成情況如下圖所示，下列說法錯(cuò)誤的是（

）A．器官移植可導(dǎo)致異源嵌合體的產(chǎn)生B．該女孩可能是在胚胎期和另一異卵雙生兄弟的早期胚胎合并后發(fā)育而來的C．該女孩細(xì)胞中最多含有2條Y染色體，6條X染色體D．“試管嬰兒”和克隆動物涉及的生殖方式不同〖答案〗C〖解析〗圖示細(xì)胞中分別是含有XY、XX兩種性染色體組成的細(xì)胞，嵌合體是指由兩個(gè)或兩個(gè)以上具有不同遺傳物質(zhì)的細(xì)胞系形成的聚合胚胎發(fā)育而成的個(gè)體，嵌合體的生物學(xué)原理是細(xì)胞的增殖和分化。A、依據(jù)題意嵌合體指生物個(gè)體體內(nèi)存在兩種或以上不同細(xì)胞群的現(xiàn)象，因而器官移植可導(dǎo)致異源嵌合體的產(chǎn)生，A正確；B、因該女孩不同細(xì)胞性染色體組成既有XX，又有XY，則該女孩可能是在胚胎期和另一異卵雙生兄弟的早期胚胎合并后發(fā)育而來，B正確；C、該女孩有絲分裂后期染色體數(shù)目最多，最多含有2條Y染色體和4條X染色體，C錯(cuò)誤；D、試管嬰兒”是受精卵發(fā)育成新個(gè)體的生殖方式，屬于有性生殖，而“克隆動物”的生殖方式則屬于無性生殖，D正確。故選C。填空題（共5題，除說明外，每空1分，共62分）20．（12分）很多極端環(huán)境（高溫、干旱、鹽堿等）中的微生物仍未獲得分離和培養(yǎng)。我國研究人員提出了一些從沙漠環(huán)境中獲取純培養(yǎng)原核微生物的策略?；卮鹣铝袉栴}：(1)在采集時(shí)，需要用經(jīng)過處理的鏟子、采樣袋、離心管等收集土樣、水樣，低溫保存樣品，盡快進(jìn)行微生物分離。(2)培養(yǎng)基一般都含有和無機(jī)鹽等。配置適宜的培養(yǎng)基，也是培養(yǎng)沙漠微生物的關(guān)鍵步驟。沙漠炎熱，其中很可能存在噬熱微生物。若要篩選噬熱微生物需在高溫下進(jìn)行培養(yǎng)，此時(shí)瓊脂不凝固，非固態(tài)的培養(yǎng)基上無法獲得微生物的，因此需選用在高溫下仍有凝固能力的物質(zhì)代替瓊脂。(3)沙漠有強(qiáng)烈的紫外線照射。研究人員希望能從沙漠土樣中培養(yǎng)出更多的沙漠微生物，于是將獲得的沙漠樣品用紫外線照射10分鐘后再進(jìn)行樣品的稀釋。這樣做的原因是：①紫外線可以殺死、抑制一些雜菌，減少了雜菌的快速生長；②。(4)接下來，對上述樣品進(jìn)行溶解和稀釋，每次稀釋時(shí)需要在試管中加入和1mL待稀釋的菌液。全程需要操作。研究人員在進(jìn)行接種時(shí)，并不是只接種10-4的稀釋液，而是將下圖中四個(gè)濃度均進(jìn)行接種，原因是。(5)經(jīng)過分離、純化后，獲得的沙漠微生物值得進(jìn)一步研究。寫出一條研究方向：。〖答案〗(1)滅菌(2)水、碳源、氮源(2分）（單）菌落（或純培養(yǎng)）(3)沙漠樣品中的（原生）微生物在長期的紫外線照射環(huán)境中，適應(yīng)了紫外線照射，在培養(yǎng)中占有優(yōu)勢，得以迅速、大量增殖（2分）(4)9mL無菌水無菌接種單一濃度的稀釋液，若微生物濃度過高可能無法獲得單菌落，若濃度過低可能無法培養(yǎng)出菌落，四個(gè)濃度都接種，增加獲得適宜菌落數(shù)的可能性（2分）(5)探究沙漠微生物中與耐熱、耐紫外線有關(guān)的基因或蛋白（其他合理的也可得分）（2分）〖解析〗培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽；不同培養(yǎng)基還要滿足不同微生物對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。（1）在采集時(shí)，為防止雜菌污染，需要用經(jīng)過滅菌處理的鏟子、采樣袋、離心管等收集土樣、水樣，低溫保存樣品，盡快進(jìn)行微生物分離。（2）各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽。非固態(tài)的培養(yǎng)基上無法獲得微生物的（單）菌落（或純培養(yǎng)），無法起到篩選噬熱微生物的作用。（3）沙漠樣品中的（原生）微生物在長期的紫外線照射環(huán)境下，適應(yīng)了紫外線照射，在培養(yǎng)中占有優(yōu)勢，得以迅速、大量繁殖，進(jìn)而能從沙漠土樣中培養(yǎng)出更多的沙漠微生物。（4）據(jù)圖可知，稀釋倍數(shù)為10，故對上述樣品進(jìn)行溶解和稀釋，每次稀釋時(shí)需要在試管中加入9mL無菌水和1mL待稀釋的菌液。全程需要無菌操作，以避免雜菌污染。只接種10-4的稀釋液，即接種單一濃度的稀釋液，若微生物濃度過高可能無法獲得單菌落，若濃度過低可能無法培養(yǎng)出菌落，而四個(gè)濃度都接種，增加獲得適宜菌落數(shù)的可能性。（5）沙漠有強(qiáng)烈的紫外線照射且溫度很高，故可探究沙漠微生物中與耐熱、耐紫外線有關(guān)的基因或蛋白。21．（13分）玉米是人類糧食和畜牧飼料的重要來源，普通玉米缺乏人體及單胃動物生長發(fā)育必需的賴氨酸?？蒲泄ぷ髡呃没蚬こ碳夹g(shù)將馬鈴薯中已知序列的高賴氨酸蛋白基因（SBgLR）轉(zhuǎn)入玉米細(xì)胞獲得高賴氨酸玉米新品種。具體操作流程如圖所示，其中強(qiáng)啟動子能驅(qū)動基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄?；卮鹣铝袉栴}：(1)獲取馬鈴薯高賴氨酸蛋白基因時(shí)，取馬鈴薯葉片，加入DNA提取液研磨，提取液中含有的可以防止DNA被水解。獲取的目的DNA通過擴(kuò)增SBgLR基因，擴(kuò)增產(chǎn)物通過電泳進(jìn)行分離后，可割下回收擴(kuò)增的SBgLR基因。(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)選用的限制酶是。圖中目的基因上的強(qiáng)啟動子是（填“DNA聚合酶"或“RNA聚合酶”）的結(jié)合位點(diǎn)，Ti質(zhì)粒中的卡那霉素抗性基因是一種標(biāo)記基因，其作用是。(3)將重組的質(zhì)粒導(dǎo)入經(jīng)過處理的農(nóng)桿菌，利用農(nóng)桿菌侵染可將SBgLR基因送到玉米細(xì)胞中，原因是。(4)篩選轉(zhuǎn)化的玉米細(xì)胞時(shí)，需在培養(yǎng)基中加入，若加入的該抗生素濃度（填“過高”或“過低”）時(shí)，常會出現(xiàn)很多假陽性植株，因此在轉(zhuǎn)基因前需要對受體進(jìn)行抗生素檢測?！即鸢浮?1)DNA酶抑制劑PCR技術(shù)凝膠(2)BamHI和HindRNA聚合酶鑒別受體細(xì)胞（農(nóng)桿菌）中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來（2分）(3)CaCl2農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒中的T-DNA能將外源基因送到植物細(xì)胞中，并與植物細(xì)胞的染色體DNA整合在一起（2分）(4)潮霉素過低敏感性〖解析〗1、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。（4）目的基因的檢測與鑒定。2、利用PCR可以在體外進(jìn)行DNA片段的擴(kuò)增。PCR利用了DNA的熱變性原理，通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合PCR儀實(shí)質(zhì)上就是一臺能夠自動調(diào)控溫度的儀器。一次PCR一般要經(jīng)歷30次循環(huán)DNA分子具有可解離的基團(tuán)，在一定的pH下，這些基團(tuán)可以帶上正電荷或負(fù)電荷。在電場的作用下，這些帶電分子會向著與它所帶電荷相反的電極移動，這個(gè)過程就是電泳。PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定。在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)。凝膠中的DNA分子通過染色，可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來。3、基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因。啟動子是RNA聚合酶特異性識別和結(jié)合的DNA序列，是基因的一個(gè)組成部分，控制基因表達(dá)（轉(zhuǎn)錄）的起始時(shí)間和表達(dá)的程度。終止子是給予RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄終止信號的DNA序列。（1）從生物組織中提取DNA時(shí)，應(yīng)加入DNA酶抑制劑，以防研磨時(shí)DNA接觸到DNA酶被水解。要擴(kuò)增目的基因數(shù)量，可用PCR的方法。PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來分離和鑒定，所以要回收擴(kuò)增產(chǎn)物，可割下凝膠進(jìn)行回收操作。（2）所選的運(yùn)載體含KpnI、BamHI和Hind三種酶切位點(diǎn)，含目的基因的DNA也含KpnI、BamHI和Hind三種酶切位點(diǎn)。如果選擇限制酶KpnI，則所切下的目的基因不含強(qiáng)啟動子，所以不能選限制酶KpnI。選擇限制酶BamHI和Hind，所切下的目的基因含有強(qiáng)啟動子，雖不含終止子，但運(yùn)載體在限制酶Hind切割位點(diǎn)后有終止子。綜上分析，構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)選用的限制酶是BamHI和Hind。啟動子是一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的上游，緊挨轉(zhuǎn)錄的起始位點(diǎn)，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。運(yùn)載體上的標(biāo)記基因可供重組DNA的檢測和鑒定，所以Ti質(zhì)粒中的卡那霉素抗性基因可用來鑒別受體細(xì)胞（農(nóng)桿菌）中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。（3）在基因工程操作中，常用原核生物作為受體細(xì)胞，其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。研究人員一般先用Ca2+處理大腸桿菌細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，然后再將重組的基因表達(dá)載體導(dǎo)入其中。農(nóng)桿菌是一種在土壤中生活的微生物，能在自然條件下侵染雙子葉植物和裸子植物，而對大多數(shù)單子葉植物沒有侵染能力。農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)含有Ti質(zhì)粒，當(dāng)它侵染植物細(xì)胞后，能將Ti質(zhì)粒上的T-DNA轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞，并且將其整合到該細(xì)胞的染色體DNA上。根據(jù)農(nóng)桿菌的這種特點(diǎn)，如果將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA中，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞。（4）潮霉素抗性基因位于Ti質(zhì)粒上的T-DNA上，會隨T-DNA進(jìn)入植物細(xì)胞。如果目的基因進(jìn)入玉米細(xì)胞，則潮霉素抗性基因也進(jìn)入玉米細(xì)胞，則該細(xì)胞就有抗潮霉素的特性，可在加入了潮霉素的培養(yǎng)基中分裂。潮霉素濃度過低，作用太弱而起不到篩選的作用，則會出現(xiàn)假陽性結(jié)果。為了避免出現(xiàn)假陽性結(jié)果，在轉(zhuǎn)基因前需要對受體進(jìn)行抗生素敏感性檢測。22．（12分）雌性哺乳動物在早期胚胎發(fā)育過程中1條X染色體會發(fā)生整體范圍內(nèi)的沉默（基因轉(zhuǎn)錄活性被抑制），僅有少數(shù)“逃逸”基因仍能正常表達(dá)，這一生理過程稱作X染色體失活（XCI）。XCI能保證雌、雄間X染色體上基因表達(dá)水平的一致，也造成體外受精胎兒性別比例的失衡。(1)為制備體外受精（IVF）的胚胎，研究人員采用超數(shù)排卵方法采集小鼠期卵母細(xì)胞，另一方面，將成年健康公鼠的精子在體外條件下進(jìn)行處理，將二者置于適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液中完成體外受精。收集早期胚胎，移植到經(jīng)過處理的代孕母鼠中，獲得的胚胎含有（單/雙/三）親的遺傳物質(zhì)。(2)研究人員對體外受精胎兒性別進(jìn)行鑒定，表中結(jié)果顯示胎兒性別比例（雄/雌）自然生產(chǎn)（IVO）胎兒的性別比例。組別胚胎數(shù)活仔率（%）雄/雌IVO8156.251.08IVF8245.581.48(3)為進(jìn)一步揭示體外受精的胎兒性別比例失衡的原因，研究人員剖取第7.5天的小鼠胚胎進(jìn)行胎兒發(fā)育情況統(tǒng)計(jì)，結(jié)果如圖1。①結(jié)果顯示IVO組雌、雄胎兒形態(tài)異常比率相當(dāng)，而在IVF組中，。②研究人員收集不同組別的胚胎細(xì)胞，定量檢測具代表性的“非逃逸”基因，結(jié)果顯示這些基因的表達(dá)在IVF雌性胚胎中顯著IVO雌性胚胎，說明IVF雌性胚胎XCI不足。③已有研究表明，XCI高度依賴激活因子RNF12，研究人員利用免疫熒光技術(shù)檢測RNF12蛋白的表達(dá)量如圖2。注：均為鑒定性別后的雌性胚胎，DAPI標(biāo)記細(xì)胞核所在位置，標(biāo)尺：50μm結(jié)果顯示。(4)綜上所述，XCI造成體外受精的胎兒性別比例失衡的可能原因是?！即鸢浮?1)MII獲能同期發(fā)情雙(2)高于(3)雌性形態(tài)異常胎兒的比例顯著高于雄性形態(tài)異常胎兒（2分）高于IVF在4細(xì)胞和8細(xì)胞及桑葚胚時(shí)期RNF12蛋白表達(dá)水平顯著低于IVO（2分）(4)體外受精過程引發(fā)小鼠部分雌性胚胎RNF12低表達(dá)，引發(fā)XCI下降，導(dǎo)致雌性發(fā)育異常及雄/雌比例升高（2分）〖解析〗胚胎移植是指將雌性動物體內(nèi)的早期胚胎，或通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。（1）通常用促性腺激素處理雌性哺乳動物，使其超數(shù)排卵，采集小鼠MII期卵母細(xì)胞，此時(shí)的卵母細(xì)胞已經(jīng)發(fā)育成熟；另一方面，獲得的精子在體外進(jìn)行獲能處理，將二者置于適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液中完成體外受精。受精卵在體外培養(yǎng)成早期胚胎，移植到經(jīng)過同期發(fā)情處理的代孕母鼠中，獲得的胚胎含有提供卵細(xì)胞和精子雙親的遺傳物質(zhì)。（2）依據(jù)表格可得，表中結(jié)果顯示體外受精（IVF）胎兒性別比例（雄/雌）高于自然生產(chǎn)（IVO）胎兒的性別比例。（3）①根據(jù)圖示，IVF組中雌性形態(tài)異常胎兒的比例顯著高于雄性形態(tài)異常胎兒；②依題意，“非逃逸”基因起作用，即基因轉(zhuǎn)錄活性被抑制，表現(xiàn)出X染色體失活（XCI），因而從結(jié)果顯示這些基因的表達(dá)在IVF雌性胚胎中顯著高于IVO雌性胚胎。③根據(jù)圖2可知，IVF在4細(xì)胞和8細(xì)胞及桑葚胚時(shí)期RNF12蛋白表達(dá)水平顯著低于IVO。（4）綜上所述，體外受精過程引發(fā)小鼠部分雌性胚胎RNF12低表達(dá)，引發(fā)X染色體失活（XCI）下降，導(dǎo)致雌性發(fā)育異常及雄/雌比例升高。23．（12分）PMP22基因在人基因組中有多個(gè)拷貝，表達(dá)產(chǎn)生的PMP22蛋白在人髓鞘細(xì)胞中不可或缺，但PMP22蛋白過量可引發(fā)腓骨肌萎縮癥（CMT1A），科研人員希望利用CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)治療CMT1A?；卮鹣铝袉栴}：(1)CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)原理如圖1所示，Cas9蛋白可切割特定部位的DNA雙鏈，造成DNA損傷，一次切割過程中會產(chǎn)生個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。機(jī)體修復(fù)DNA損傷時(shí)，可能會改變堿基序列。圖中g(shù)RNA的作用有。(2)科研人員本來的基因編輯方案是將gRNA結(jié)合位點(diǎn)設(shè)計(jì)在PMP22基因內(nèi)部，后改為如圖2所示的方案，該方案比起原方案的優(yōu)點(diǎn)是。(3)科研人員希望在人髓鞘細(xì)胞中表達(dá)CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)，構(gòu)建的基因表達(dá)載體如圖3所示，請據(jù)圖回答下列問題：①在對gRNA對應(yīng)的DNA片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)，需要在上游和下游引物的5'端分別添加堿基序列和，保證DNA片段定向插入；②基因表達(dá)載體上，除了圖示序列和標(biāo)記基因外，還需要的序列是。(4)科研人員將人髓鞘細(xì)胞分為A、B、C三組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，A組不導(dǎo)入任何表達(dá)載體，B組導(dǎo)入不含目的基因的空白載體，C組導(dǎo)入含目的基因的重組載體。①科研人員提取三組細(xì)胞的DNA，用圖3中的引物I和引物Ⅱ進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并對PCR結(jié)果進(jìn)行電泳檢測，請?jiān)趫D4中的對應(yīng)位置補(bǔ)全可能的電泳結(jié)果；②科研人員進(jìn)一步檢測三組細(xì)胞中蛋白的表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)C組最低，能得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)論是〖答案〗(1)2定向引導(dǎo)Cas9蛋白與靶向基因結(jié)合(2)既能專一性切除多余的PMP22基因，又能確保必要的PMP22基因不被破壞，比破壞PMP基因結(jié)構(gòu)更可靠（2分）(3)①5’-G↓TCGAC-3’5’-C↓TCGAG-3’②Cas9基因(4)①（2分）②PMP22基因編輯系統(tǒng)切除了多余的PMP22基因，產(chǎn)生的PMP22蛋白減少（2分）〖解析〗1、基因表達(dá)載體的組成是：目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因，其中啟動子位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA；2、分析題圖：CRISPR基因轉(zhuǎn)錄的gRNA可指引Cas9到一個(gè)特定的基因位點(diǎn)進(jìn)行切割，使相應(yīng)部位的核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；3、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。（1）Cas9蛋白能剪切特定DNA片段，類似于限制酶的作用，切割DNA斷開磷酸二酯鍵，形成2個(gè)DNA片段，一次切割過程就會產(chǎn)生2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)；據(jù)圖可知gRN