調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及其應(yīng)用

近年來(lái)，腫瘤免疫治療已逐步成為最熱門(mén)的腫瘤治療手段之一。免疫檢查點(diǎn)抑制劑等新型治療方法的出現(xiàn)也為許多腫瘤患者帶來(lái)了新的希望。

然而，目前只有20%~30%的患者能夠?qū)γ庖邫z查點(diǎn)抑制劑產(chǎn)生應(yīng)答。其原因之一就是在腫瘤微環(huán)境中存在著免疫抑制網(wǎng)絡(luò)。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）是這個(gè)抑制網(wǎng)絡(luò)中重要的組成部分。

研究表明，在腫瘤患者的外周血、腫瘤組織和引流淋巴結(jié)中，Tregs均有不同比例的升高，其中以腫瘤組織中最為顯著。

以往，科學(xué)家們通常認(rèn)為T(mén)regs與不良預(yù)后相關(guān)。發(fā)現(xiàn)利用抗CD25抗體去除Tregs可有效緩解多種實(shí)體瘤。最新的研究表明，Tregs可根據(jù)Foxp3和CD45RA的表達(dá)水平被分為3種類(lèi)型：天然Tregs、效應(yīng)Tregs和非Tregs?；谶@種分類(lèi)，結(jié)腸癌患者可被分為兩種類(lèi)型：一類(lèi)患者腫瘤組織中富含效應(yīng)Tregs；另一類(lèi)則富含非Tregs。前一類(lèi)患者的預(yù)后與腫瘤組織中Tregs的量呈負(fù)相關(guān)，而后一類(lèi)則呈正相關(guān)。目前，有力證據(jù)證明慢性炎癥性疾病能夠促進(jìn)某些癌癥（如結(jié)腸癌、肝癌和胰腺癌）的進(jìn)展。因此，靶向腫瘤組織中的炎癥網(wǎng)絡(luò)可能能夠促進(jìn)腫瘤的預(yù)防和治療。Tregs是主要的抗炎因素之一。流行病學(xué)數(shù)據(jù)顯示，暴露于多種環(huán)境的個(gè)體往往擁有預(yù)防腫瘤的保護(hù)性Tregs表型，與之相比，在生命早期沒(méi)有暴露于復(fù)雜衛(wèi)生環(huán)境的個(gè)體在生命后期遭受惡性腫瘤的風(fēng)險(xiǎn)增加。

腫瘤細(xì)胞的一個(gè)突出特征是其無(wú)限的增殖能力，這導(dǎo)致了巨大的能量需求。細(xì)胞獲得ATP有兩種主要途徑：一個(gè)是糖酵解途徑，另一個(gè)是氧化磷酸化途徑。研究表明，無(wú)論是在有氧環(huán)境還是缺氧環(huán)境下，腫瘤細(xì)胞都優(yōu)先選擇糖酵解途徑以獲得ATP和其他形式的能量，這種現(xiàn)象被稱(chēng)為Warburg效應(yīng)。通過(guò)糖酵解途徑，腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生大量代謝物，如乳酸和二氧化碳。這些產(chǎn)物不僅能抑制T細(xì)胞發(fā)揮功能，而且能抑制樹(shù)突狀細(xì)胞的成熟與活化。然而，Tregs更喜歡脂肪酸能量供應(yīng)途徑，并且可以利用腫瘤的代謝物來(lái)獲得能量。因此，有科學(xué)家認(rèn)為，在腫瘤組織中，Tregs與腫瘤細(xì)胞形成了共生關(guān)系。發(fā)現(xiàn)，與正常乳腺實(shí)質(zhì)和外周血相比，乳腺癌腫瘤組織中Tregs的表達(dá)量更高、增殖活性更強(qiáng)。而且，最具侵襲性的乳腺癌往往具有最高水平的Tregs。RNA-seq分析結(jié)果顯示：趨化因子受體蛋白CCR8的表達(dá)量在腫瘤組織中的Tregs中增加。CCR8和Foxp3在mRNA水平上的表達(dá)量比值也被證明與患者的無(wú)病生存率和總體生存率呈負(fù)相關(guān)。

隨后的研究證實(shí)，CCR8也在結(jié)腸癌中高表達(dá)，并且靶向CCR8可對(duì)結(jié)腸癌起到有效的緩解作用。目前，針對(duì)CCR8的免疫療法正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)。

除此之外，也發(fā)現(xiàn)了其他在腫瘤組織中的Tregs中上調(diào)的基因，包括CTLA-4、CD134（OX40）、GITR、4-1BB、TIGIT、ICOS和CD27。然而，因?yàn)檫@些細(xì)胞表面標(biāo)志物在非腫瘤組織中的Tregs中也有部分表達(dá)，針對(duì)這些受體的抗腫瘤免疫療法的功效仍不確定。目前，基于Tregs的腫瘤免疫治療策略主要包括：Tregs相關(guān)的免疫檢查點(diǎn)抑制劑治療、抑制Tregs功能和特異性清除腫瘤組織中的Tregs。免疫檢查點(diǎn)（如CTLA-4，PD-1和PD-L1）抑制劑可以在多種腫瘤中誘導(dǎo)出穩(wěn)健且持久的反應(yīng)。由于CTLA-4信號(hào)對(duì)于Tregs和效應(yīng)T細(xì)胞（Teffs）都是必需的，因此治療性抗CTLA-4抗體的使用不僅減弱了Tregs的免疫抑制功能，而且能增強(qiáng)Teffs的功能。

目前有研究表明，抗CTLA-4抗體可能不是通過(guò)阻斷免疫檢查點(diǎn)發(fā)揮作用，而是通過(guò)誘導(dǎo)抗體依賴(lài)性細(xì)胞毒性?？筆D-1抗體在阻斷Tregs中的作用尚未確定。據(jù)報(bào)道，在小鼠模型中，表達(dá)PD-1的Tregs的抑制功能強(qiáng)于沒(méi)有表達(dá)PD-1的Tregs。

GITR和OX40是由Tregs組成型表達(dá)的共刺激分子，抗GITR、OX40的抗體能夠在抑制Tregs功能的同時(shí)，增強(qiáng)Teffs的功能。小鼠實(shí)驗(yàn)表明，與腫瘤接種前或接種后立即施用抗GITR抗體相比，當(dāng)腫瘤大小超過(guò)一定范圍時(shí)施用效果更佳。目前針對(duì)GITR和OX40的免疫療法正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)。

除表面分子外，Tregs特異性依賴(lài)的信號(hào)分子也可作為控制Tregs功能的潛在靶點(diǎn)。例如，磷脂酰肌醇3-激酶（PI(3)K）在細(xì)胞增殖、存活和運(yùn)動(dòng)中發(fā)揮重要作用。PI(3)K的失活已被證明在人類(lèi)白血病中具有良好的抗腫瘤效應(yīng)。在小鼠模型中，PI(3)K的阻斷也已被證明能夠誘導(dǎo)各種實(shí)體瘤的消退。以往，人們普遍認(rèn)為IL-2在激活Tregs和Teffs方面發(fā)揮的雙重作用限制了CD25和IL-2阻斷的臨床應(yīng)用。然而，發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過(guò)遺傳修飾的IL-2對(duì)CD25+細(xì)胞具有較低的結(jié)合親和力，并且其誘導(dǎo)Teffs增殖的能力比誘導(dǎo)Tregs增殖的能力更強(qiáng)。

與低劑量IL-2令人失望的治療效果相反，對(duì)轉(zhuǎn)移性黑素瘤和腎細(xì)胞癌患者施用高劑量IL-2不僅能延長(zhǎng)患者的無(wú)病生存期而且能對(duì)部分患者的腫瘤起到完全消退的作用?？笴D25單克隆抗體的作用目前也存在爭(zhēng)議。此外，小鼠實(shí)驗(yàn)表明，在接種腫瘤前施用抗CD25單克隆抗體比在腫瘤接種后施用效果更佳。

由于Tregs具有誘導(dǎo)腫瘤免疫逃逸和維持機(jī)體免疫平衡的雙重功能，Tregs的消除往往會(huì)伴隨著嚴(yán)重的自身免疫疾病。因此，如何實(shí)現(xiàn)腫瘤特異性Tregs的消除已成為迫切需要解決的關(guān)鍵問(wèn)題。

腫瘤組織中的Tregs分子特異性表達(dá)的趨化因子可