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第五章細(xì)胞能量供給和運(yùn)用第一節(jié)削減反映活化能酶一、細(xì)胞代謝與酶1、細(xì)胞代謝概念:細(xì)胞內(nèi)每時(shí)每刻進(jìn)展著很多化學(xué)反映,統(tǒng)稱(chēng)為細(xì)胞代謝。細(xì)胞代謝意義:細(xì)胞代謝是生命活動(dòng)根本。2、活化能:分子從常態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)楹?jiǎn)潔發(fā)生化學(xué)反映活潑狀態(tài)所需要能量。3、酶在細(xì)胞代謝中作用:。4、使化學(xué)反映加快方法:加熱:通過(guò)提高分子能量來(lái)加快反映速度;加催化劑:通過(guò)削減化學(xué)反映活化能來(lái)加快反映速度;同無(wú)機(jī)催化相比,酶能更明顯地削減化學(xué)反映活化能,因而催化效率更高。5巴斯德之前,人們以為:發(fā)酵是純化學(xué)反映,與生命活動(dòng)無(wú)關(guān)巴斯德觀點(diǎn):發(fā)酵與活細(xì)胞關(guān)于,發(fā)酵是整個(gè)細(xì)胞而不是細(xì)胞中某些物質(zhì)起作用。李比希觀點(diǎn):引起發(fā)酵是細(xì)胞中某些物質(zhì),但這些物質(zhì)只有在酵母細(xì)胞死亡并裂解后才能發(fā)揮作用;畢希納觀點(diǎn):酵母細(xì)胞中某些物質(zhì)可以在酵母細(xì)胞裂開(kāi)后連續(xù)起催化作用,就像在活酵母細(xì)胞中同樣;薩姆納提取酶,并證明酶是蛋白質(zhì);切郝、奧特曼覺(jué)察:少數(shù)RNA也具備生物催化功能;6、酶概念:酶是活細(xì)胞產(chǎn)生具備催化作用有機(jī)物,絕大多數(shù)是蛋白質(zhì),少數(shù)是RNA。來(lái)源化學(xué)本質(zhì)合成原料合成場(chǎng)合生理作用作用機(jī)理作用部位7、酶特性:

一般來(lái)說(shuō),活細(xì)胞都能產(chǎn)生酶絕大多數(shù)酶是蛋白質(zhì)RNA氨基酸或核糖核苷酸重要是核糖體,也可在細(xì)胞核內(nèi)合成生物催化作用削減化學(xué)反映活化能生物體內(nèi)〔細(xì)胞內(nèi)、外〕、生物體外107-1013倍。專(zhuān)一性:每一種酶只能催化一種或一類(lèi)化學(xué)反映酶作用條件較溫存:酶在最適當(dāng)溫度和PH條件下,活性最高。溫度過(guò)高,過(guò)酸或者過(guò)堿都會(huì)使酶變性失活,并且不行恢復(fù);低溫會(huì)使酶臨時(shí)失活,但恰當(dāng)升溫活性可恢復(fù)。二、影響酶促反映因素〔難點(diǎn)〕1〔反映物濃度〕;酶濃度2PH3與酶關(guān)于曲線1、表達(dá)酶高效性曲線催化劑可加快化學(xué)反映速率,與無(wú)機(jī)催化劑相比,酶催化效率更高。酶能縮短到達(dá)化學(xué)平衡所需時(shí)間,不變化化學(xué)反映平衡點(diǎn)2、表達(dá)酶具備專(zhuān)一性曲線在A反映物中參與酶A,反映速率較未加酶時(shí)明顯加快,說(shuō)明酶A催化底物A參與反映。在A反映物中參與酶B,反映速率和未加酶時(shí)相像,說(shuō)明酶B不催化底物A參與反映。3、影響酶活性曲線上述兩條曲線含義:在確定溫度〔pH〕范疇內(nèi),隨溫度〔pH〕上升,酶活性增加;最適溫度〔pH〕時(shí),酶活性到達(dá)最強(qiáng);超過(guò)這一范疇酶活性漸漸減弱。強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、高溫都破壞酶空間構(gòu)造,使酶永久性失活;而低溫只是抑制酶活性,溫度上升可恢復(fù)活性。酶促反酶促反酶濃度底物濃度對(duì)酶促反映影響〔酶量確定,其她條件適當(dāng)〕:在底物濃度較低時(shí),反映速率隨著底物濃度增長(zhǎng)而加快,反映速率與底物濃度幾乎成正比;在底物濃度很大時(shí),且到達(dá)確定限度時(shí),反映速率就到達(dá)一種最大值,此時(shí)受到酶數(shù)量和活性影響,即便再增長(zhǎng)底物濃度反映速率不變。酶濃度對(duì)酶促反映影響:在底物足量失活,其她條件適當(dāng)狀況下,反映系統(tǒng)不具有抑制酶活性物質(zhì)及其她不利于酶發(fā)揮作用因素時(shí),酶促反映速率與酶濃度成正比;但底物量確定期,受到底物量影響,即便酶濃度增長(zhǎng),反映速率不變。三、試驗(yàn)把握變量法:變量、自變量〔試驗(yàn)中人為把握變化變量〕、因變量〔隨自變量而變化變量〕、無(wú)關(guān)變量定義。比照試驗(yàn):除一種因素外,別的因素都保持不變?cè)囼?yàn)。一般設(shè)立比照組和試驗(yàn)組。試驗(yàn)設(shè)計(jì)要遵循原則:比照原則、單一變量原則、等量原則。比較過(guò)氧化氫酶在不同條件下分解試驗(yàn)留意事項(xiàng):⑴由于酶具備高效性,假設(shè)滴入FeCl溶液中混有少量過(guò)氧化氫酶,會(huì)影響試驗(yàn)準(zhǔn)確性.3⑵為什么要用穎肝臟?由于過(guò)氧化氫酶是蛋白質(zhì),放置過(guò)久,可受細(xì)菌作用而分解,使肝臟組織中酶分子數(shù)削減,活性削減。⑶為什么要有肝臟研磨液?研磨可破壞肝細(xì)胞構(gòu)造,使細(xì)胞內(nèi)酶釋放出來(lái),增長(zhǎng)酶與底物接觸面積。試驗(yàn)結(jié)論:酶具備催化作用,并且催化效率要比無(wú)機(jī)催化劑Fe3+高得多。驗(yàn)證唾液淀粉酶專(zhuān)一性試驗(yàn):⑴滴加斐林試劑水浴后假設(shè)消滅磚紅色沉淀,證明復(fù)原糖存在;⑵唾液淀粉酶將淀粉水解成麥芽糖,但不能水解蔗糖成為葡萄糖和果糖。麥芽糖、果糖、葡萄糖具備復(fù)原性,淀粉和蔗糖不具備復(fù)原性。問(wèn):在淀粉酶分解淀粉和蔗糖試驗(yàn)中鑒定試劑只能用斐林試劑而不能用碘液?答:⑴淀粉、蔗糖和斐林試劑沸水浴都無(wú)磚紅色沉淀,淀粉、蔗糖水解產(chǎn)物和斐林試劑沸水浴均有磚紅色沉淀,因此斐林試劑檢測(cè),只要有磚紅色沉淀就是發(fā)生水解試管。因此用斐林試劑檢測(cè)既能擬定淀粉有無(wú)水解,又能擬定蔗糖有無(wú)水解。⑵.因蔗糖和蔗糖水解產(chǎn)物和碘液都不變藍(lán),因此用碘液不能擬定蔗糖有無(wú)水解。影響酶活性條件〔規(guī)定用把握變量法,自己設(shè)計(jì)試驗(yàn)〕建議用淀粉酶探究溫度對(duì)酶活性影響,用過(guò)氧化氫酶探究PH對(duì)酶活性影響。探究溫度對(duì)酶活性影響〔留意操作挨次不能錯(cuò)〕試驗(yàn)原理:1.淀粉遇碘后,形成紫藍(lán)色復(fù)合物。2.淀粉酶可以使淀粉漸漸水解成麥芽糖和葡萄糖〔淀粉水解過(guò)程中,不同階段中間產(chǎn)物遇碘后,會(huì)呈現(xiàn)紅褐色或紅棕色?!雏溠刻呛推咸烟怯龅夂蟛伙@色。注:市售a-淀粉酶最適溫度約600C環(huán)節(jié)挨次環(huán)節(jié)挨次11’22’33’3%淀粉液2ml2ml2ml2%α淀粉酶液2ml2ml2ml溫度預(yù)解決0℃60℃100℃反映混合混合混合恒溫時(shí)間加碘5分鐘1滴5分鐘1滴5分鐘1滴預(yù)期現(xiàn)象藍(lán)色不變藍(lán)藍(lán)色問(wèn):在溫度影響酶試驗(yàn)中鑒定試劑只能用碘液而不能用斐林試劑?答:由于用斐林試劑需水浴加熱,兩次加熱,不是單

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